$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące zwierząt zostały sprawdzone przez lokalny komitet ds. opieki nad zwierzętami oraz komisję weterynaryjną JoVE.
1.18Obrazowanie F-FDG PET i CT u myszy
UWAGA: Używaj sprzętu ochronnego podczas pracy z radioaktywnością. Podczas obchodzenia się z promieniotwórczością należy przestrzegać wszystkich obowiązujących procedur regulacyjnych.
- Umieść klatkę z myszami, które mają być zobrazowane, na ciepłym łóżku w temperaturze 37 °C na 1 godzinę przed wstrzyknięciem 18F-FDG, aby zmniejszyć spożycie brązowego tłuszczu przez 18F-FDG.
nuta: Post myszy przez 4 - 16 godzin może pomóc zmniejszyć zużycie 18F-FDG w mięśniu sercowym.
- Zważ mysz i zapisz jej wagę.
- Znieczulić mysz za pomocą 2 - 3% izofluranu w tlenie w ilości 0,5 - 2 l/min przez 2 - 3 minuty za pomocą komory anestezjologicznej utrzymywanej w temperaturze 37 °C. Upewnij się, że mysz została znieczulona przez uszczypnięcie palca u nogi; nie zaobserwuje się żadnej reakcji, jeśli mysz została znieczulona. Nałóż maść okulistyczną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia.
- Rozcieńczyć 18F-FDG (109 min radioaktywny okres półtrwania) w sterylnym roztworze soli fizjologicznej przy skorygowanym o rozpad stężeniu iniekcji wynoszącym 70 - 75 μCi/100 μL.
nuta: Postępuj zgodnie z zalecaną przez producenta skanera PET dawką 18F, aby uzyskać optymalne obrazowanie skanera.
- Pobrać 70 - 75 μCi za pomocą strzykawki insulinowej z igłą 28 G, zmierzyć dawkę radioaktywności za pomocą kalibratora dawki, a następnie zapisać pomiar i czas. Umieścić strzykawkę w ołowianym uchwycie na strzykawkę.
nuta: Ilość radioaktywności 18F-FDG w każdej dawce jest mierzona za pomocą kalibratora dawki, który jest kalibrowany względem standardowego materiału odniesienia, takiego jak cez-137, zgodnie z protokołami producenta. Czas odczytu jest również rejestrowany w celu określenia korekcji zaniku.
- Nakłuj dystalny koniec ogona myszy i zmierz poziom glukozy we krwi myszy za pomocą glukometru.
- Ogrzewaj ogon przez 1 - 2 minuty gazą nasączoną ciepłą wodą. Przetrzyj ogon 70% izopropanolem, aby rozszerzyć żyłę ogonową tuż przed wstrzyknięciem. Podać 100 μl 18F-FDG (cała objętość w strzykawce) z wstrzyknięciem bolusa przez żyłę ogonową boczną i zanotować czas wstrzyknięcia. Odmierzyć pozostałą dawkę w strzykawce za pomocą kalibratora dawki i zapisać pomiar oraz czas.
nuta: W strzykawce pozostanie pewna ilość sondy. Stosowanie strzykawek insulinowych jest preferowane w stosunku do strzykawek połączonych z igłami za pomocą zamków Luer ze względu na zmniejszoną ilość dawki uwięzionej w strzykawce/igle po wstrzyknięciu.
- Umieść mysz, której wstrzyknięto iniekcję, w komorze anestezjologicznej utrzymywanej w temperaturze 1,5 - 2% izofluranu w temperaturze 37 °C, aby umożliwić rozprowadzenie sondy przez krążenie ogólnoustrojowe myszy przez 1 godzinę przed skanowaniem PET.
nuta: Korzystne może być opróżnienie pęcherza moczowego przed skanowaniem, aby umożliwić łatwiejszą wizualizację 18F-FDG PET guzów wszczepionych w dolne boki myszy.
- Po 1 godzinie umieścić mysz w komorze obrazowania w znieczuleniu izofluranem stożkowym na nos i w temperaturze 37 °C, a następnie zabezpieczyć jej kończyny taśmą medyczną w pozycji leżącej.
- Umieść komorę obrazowania w skanerze PET/CT.
- Uzyskaj skany PET i CT zgodnie z opisem w instrukcji skanera PET/CT.
nuta: Obrazy PET są pozyskiwane przez 600 s z oknem energetycznym 150 - 650 keV, zrekonstruowane przy użyciu maksymalizacji oczekiwań maksymalnego prawdopodobieństwa z poprawkami na tłumienie fotonów, normalizację detektora i rozpad radioizotopów (nie zastosowano poprawki rozproszenia). Obrazy TK są pozyskiwane w trybie ciągłym przez 50 s przy użyciu źródła promieniowania rentgenowskiego 50 kVp, 200 μA i detektora płaskiego, a następnie rekonstruowane są za pomocą algorytmu Feldkampa.
- Po zakończeniu badania PET/CT wyjmij mysz z komory obrazowania i pozwól jej dojść do siebie w klatce.