Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
2.1K wyświetleń
⸱
30 kwietnia 2023
Źródło: Fleming Martinez, A. K., et al. Naśladowanie i manipulowanie metaplazją międzyprzewodową trzustki w trójwymiarowej hodowli komórek. J. Vis. Exp. (2019).
Ten film opisuje technikę używaną do izolowania komórek groniastych trzustki - komórek zewnątrzwydzielniczych - zawierających różne enzymy trawienne. Pierwotne komórki groniaste są przydatne w badaniu ex vivo metaplazji wylotkowo-przewodowej (ADM) - wczesnego zdarzenia w rozwoju raka trzustki.
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami i komisję rewizyjną Jove Veterinary Review Board.
1. Izolacja komórek groniastych
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Inkubator z wytrząsaniem w temperaturze 37 °C | Thermo Scientific | SHKE4000-7 | |
| 5% CO2, 37 °C Inkubator | NUAIRE (NIEWIECH) | NU-5500 | |
| Probówki 50 ml | sokół | Numer katalogowy: 352070 | |
| Wkładka chłonna, 20" x 24" | Marka rybacka | 1420662 | |
| Igła do precyzyjnego ślizgu BD 21G x 1/2 | Fisher Naukowy | 305167 | Używaj jako szpilek do preparowania |
| Zlewka, 600 ml | Marka rybacka | FB-101-600 | |
| wirówka | Beckman Coulter | Wirówka Allegra X-15R | |
| Kolagenaza typu I, Clostridium histolyticum | Sigma | Klasa C0130-1G | Stworzyć roztwór o stężeniu 100 mg/ml, rozpuszczając proszek w sterylnej wodzie klasy biologii molekularnej. Podczas rozmrażania jednej podwielokrotności rozcieńczyć do 10 mg/ml, przefiltrować wysterylizować i umieścić 1 ml podwielokrotności w temperaturze -20 °C. |
| deksametazon | Sigma | Zobacz materiał D1756 | Sporządzić roztwór o stężeniu 4 mg/ml przez rozpuszczenie proszku w metanolu, porcjowanie i przechowywanie w temperaturze -20 °C. |
| Etanol, 200 proof | Laboratoria Decon | Numer katalogowy 2701 | |
| Surowica bydlęca płodu | Sigma | F0926-100 ml | |
| Kleszcze | Narzędzia naukowe | Numer katalogowy: 11002-12 | |
| Kleszcze | Narzędzia naukowe | Numer katalogowy 91127-12 | |
| Zbilansowany roztwór soli Hanka (HBSS), bez wapnia, bez magnezu, bez czerwieni fenolowej | Fisher Naukowy | SH3048801 | |
| Wiadro na lód, prostokątne | Fisher Naukowy | 07-210-103 | |
| Worki na próbki LAB GUARD (dla myszy po sekcji) | Uchwyt Minigrip | SBL2X69S | |
| Parafilm | Bemis | Zobacz materiał PM992 | Określana w manuskrypcie jako "folia parafinowa z tworzywa sztucznego" |
| Pbs | Fisher Naukowy | SH30028.02 | |
| Penicylina-Streptomycyna | ThermoFisher Naukowy | 15140122 | |
| Końcówki do pipet, 10 μl | USA Naukowe | Nr kat. 1110-3700 | |
| Końcówki do pipet, 1000 μl | Olympus Plastics | 24-165RL | |
| Końcówki do pipet, 200 μl | USA Naukowe | Lata 1111-1700 | |
| Pomoc w pipetowaniu | Drummond | ||
| PIPETMAN Classic P10, 1-10 μl | Gilson | F144802 | |
| PIPETMAN Classic P1000, 200-1000 μl | Gilson | F123602 | |
| PIPETMAN Classic P20, 2-20 μl | Gilson | F123600 | |
| PIPETMAN Classic P200, 20-200 μl | Gilson | F123601 | |
| Pipety, 10 ml | sokół | 357551 | |
| Pipety, 25 ml | sokół | 357525 | |
| Pipety, 5 ml | sokół | 357543 | |
| Siatka polipropylenowa, 105 μm | Laboratoria widma | 146436 | |
| Siatka polipropylenowa, 500 μm | Laboratoria widma | 146418 | |
| nożyczki | Narzędzia naukowe | Numer katalogowy: 14568-12 | |
| nożyczki | Narzędzia naukowe | Numer katalogowy: 14568-13 | |
| Wodorowęglan sodu (drobny biały proszek) | Fisher Naukowy | Zobacz materiał BP328-500 | |
| wodorotlenek sodu | Fisher Naukowy | S318-500 | |
| Inhibitor trypsyny sojowej | Gibco (firma Gibco) | 17075029 | |
| łopatka | Marka rybacka | 21-401-10 | |
| Filtry Steriflip 50 ml, 0,22 mikrona | Milipory | SCGP00525 | |
| Kolagen z ogona szczura typu I | Corning | 354236 | |
| Waymouth MB 752/1 Medium (proszek) | Sigma | W1625-10X1L | |
| Łódka wagowa, sześciokątna, średnia | Marka rybacka | 02-202-101 |
