Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
2.7K wyświetleń
⸱
30 kwietnia 2023
Źródło: Morris, R. J. et al. Izolacja keratynocytów naskórka myszy i ich klonogenna hodowla in vitro. J. Vis. Exp. (2019 rok)
W tym filmie przeprowadzamy test klonogenny keratynocytów pobranych od dorosłych myszy, aby określić zdolność poszczególnych komórek do proliferacji i tworzenia kolonii. Ta technika zbierania keratynocytów jest przydatna do badania innych dalszych aspektów chemicznej kancerogenezy skóry i promocji guza.
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Pierwotny zbiór i siew keratynocytów
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 0,4% błękit trypanowy 1x w 0,9% soli fizjologicznej | Technologie życiowe Gibco | Numer katalogowy: 15250-061 | |
| 1,5-calowy mieszadł magnetyczny z pierścieniem obrotowym | Bel-Art, Wayne | 371101128 | W słoiku Nalgene o pojemności 2 uncji |
| Pipety jednorazowe 10 ml | BD Sokół | 357551 | |
| Kolba hodowlana 150 cm2 (T-150) | Corning | 430825 | |
| 2 uncje słoika Nalgene | Thermo Fisher Naukowy | 2118-0002 | 60 ml |
| 2,5% roztwór trypsyny 10x | Technologie życiowe Gibco | Numer katalogowy: 15090-046 | |
| 50 ml sterylnej probówki stożkowej | BD Sokół | 352098 | |
| Sitko do komórek, sterylne 70 μm | Oprogramowanie laboratoryjne BD Discovery | Numer katalogowy: 352350 | |
| Kolagen bydlęcy, typ I, 30 mg | BD Nauki biologiczne | 354231 | |
| Woda destylowana Milli-Q | Świeża; dwukrotnie destylowana woda z odwróconej osmozy | ||
| Sól fizjologiczna buforowana fosforanami Dulbecco 1x, bez Ca2+ i Mg2+ | Technologie życiowe Gibco | Nr kat. 14190-144 | sterylny |
| Zmodyfikowany Medium Orła Dulbecco (DMEM) | Kontroler ATCC (Kontroler T | 30-2002 | |
| Surowica płodowa bydlęca (FBS) | Termo Fisher Naukowy Hyclon | SH 300070.03 | |
| Gentamycyna 50 mg/10 ml | Technologie życiowe Gibco | Numer katalogowy: 15750-060 | |
| Nr 22 sterylne ostrza ze stali nierdzewnej | BD Bard-Parker | 371222 | |
| Rękojeści do skalpela nr 4 | Instrumenty do badań biomedycznych | 26-1200 | W filiżance z 70% etanolem |
| Jedna para nożyczek | Instrumenty do badań biomedycznych | 25-1050 | W filiżance z 70% etanolem |
| Jedna para kleszczy opatrunkowych na kciuk | Militex | 6-kwiecień | W filiżance z 70% etanolem |
| Kwadratowe sterylne plastikowe szalki Petriego | BD Sokół | 351112 | |
| Szwajcarskie mysie fibroblasty 3T3 | Kontroler ATCC (Kontroler T | Zobacz materiał CCL-92 | Używany w 10 przejściach |
| Williams E Średni | Technologie życiowe Gibco | Numer katalogowy: 12551-032 | |
| SMEM: Wolne od Ca2+ i Mg2+ minimalne niezbędne podłoże do hodowli zawiesiny | Technologie życiowe Gibco | Numer katalogowy: 11380-037 |
