Artykuł metodologiczny

Test inwazji komórek nowotworowych: natywna metoda 3D oparta na macierzy in vitro do oceny interakcji komórek nabłonkowo-mezenchymalnych

30 kwietnia 2023

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Ng, Y. Z. et al. Inżynieria tkankowa mikrośrodowiska zrębu guza z zastosowaniem do inwazji komórek rakowych. J. Vis. Exp. (2014)

Ten film opisuje technikę wykorzystania natywnej matrycy do badania inwazji komórek nowotworowych. Technika zastosowana w tym teście zapewnia możliwość oceny interakcji komórek nabłonkowo-mezenchymalnych w warunkach 3D bez konieczności stosowania syntetycznej lub obcej matrycy.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Przygotowanie pożywek i odczynników

  1. Przygotowanie 200x bulionu z 2-fosforanu kwasu L-askorbinowego
    1. Rozpuścić 29 mg 2-fosforanu kwasu L-askorbinowego w 5 ml roztworu zmodyfikowanego podłoża Orła (DMEM) firmy Dulbecco i przefiltrować przez filtr membranowy 0,22 μm. Przechowywać w postaci 0,25 ml sterylnych podwielokrotności w temperaturze -20 °C.
    2. Dodać 0,25 ml podwielokrotności 200x 2-fosforanu kwasu L-askorbinowego do każdych 50 ml pożywki fibroblastów (DMEM z 1% L-glutaminą i 10% płodową surowicą bydlęcą) w wymaganym dniu, aby uzyskać końcowe stężenie 0,1 mM 2-fosforanu kwasu L-askorbinowego.
    2. <....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rysunek 1. Przebieg generowania natywnej matrycy pochodzącej z fibroblastów i testu inwazji guza.

....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
2-fosforan kwasu L-askorbinowego SigmaNumer katalogowy A8960
DMEM z L-glutaminą, 4 500 mg/L D-glukozą, 110 mg/L pirogronianem sodu Technologie życioweNumer katalogowy 11995-073
100x Penicylina-Streptomycyna Technologie życioweNumer katalogowy: 15070
wazelina Firma VWRPROL28908.290
Cylindry klonalne SigmaZ370789
Nylonowa siatka filtracyjna hydrofilowa 100 μm 25 μm średnica 100/pk MiliporyNY1H02500
Wygięta siatka druciana ze stali nierdzewnej Wyprodukowano we własnym zakresieWymiary zostały wykonane tak, aby siatka pasowała do płytek 6-dołkowych

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

3D test in vitrometoda macierzy natywnejoddzia ywania nab onkowo mezenchymalnezawiesina kom rek fibroblast wdepozycja macierzy zewn trzkom rkowejgranica powietrze cieczrakowiak p askonab onkowy sk rypo ywka do wzrostu keratynocyt wtest cylindr w klonalnych

Powiązane artykuły