Sprzęt użyty podczas pozyskiwania danych
Okulograf
Okulograf użyty w niniejszym protokole to system EyeLink II (SR Research Ltd; Mississauga, Ontario, Kanada). Ten montowany na głowie, oparty na obrazie wideo okulograf rejestruje pozycję oka w układzie współrzędnych X, Y z częstotliwością próbkowania 50 lub 250 Hz, z rozdzielczością przestrzenną < 0.1°. Jedna kamera służy do monitorowania pozycji głowy poprzez wysyłanie markerów podczerwieni do czujników umieszczonych w czterech rogach monitora wyświetlacza, na który patrzą uczestnicy. Dwie dodatkowe kamery są zamontowane na opasce na głowę, poniżej każdego z oczu, a iluminatory podczerwieni są wykorzystywane do rejestracji odbić z źrenicy i rogówki. Pozycja oka może być wyznaczana na podstawie odbić z źrenicy i rogówki lub wyłącznie na podstawie źrenicy. Wyściełana opaska okulografu może być regulowana w dwóch płaszczyznach, aby komfortowo dopasować ją do rozmiaru głowy dorosłego uczestnika. Okulograf jest kompatybilny z większością okularów oraz soczewkami kontaktowymi.
Komputery
Do rejestracji ruchów gałek ocznych wykorzystuje się dwa komputery PC. Jeden komputer służy jako komputer wyświetlacza, który prezentuje uczestnikom ekrany kalibracyjne, niezbędne instrukcje do zadań oraz obrazy wykorzystywane w paradygmacie eksperymentalnym. Komputer wyświetlacza określa parametry zbierania danych, które są następnie sterowane przez drugi, komputer główny. Komputer główny oblicza w czasie rzeczywistym pozycję spojrzenia i rejestruje dane o ruchach gałek ocznych do późniejszej analizy, a także wszelkie reakcje uczestnika w postaci naciśnięć przycisków lub klawiatury. Konfiguracja uczestnika oraz obsługa eyetrackera odbywają się za pośrednictwem głównego komputera PC.
Oprogramowanie
W niniejszym protokole czas i kolejność prezentacji bodźców eksperymentalnych uczestnikom oraz sposób gromadzenia pozycji oka przez komputer nadrzędny są programowane za pomocą Experiment Builder, oprogramowania opracowanego specjalnie przez SR Research Ltd w celu komunikacji z komputerem sterującym eye trackerem. Prezentacja bodźców może być jednak przeprowadzona również za pomocą innych programów (np. Presentation, Neurobehavioral Systems; Albany, CA). Konwersja danych o ruchach gałek ocznych na serię zdarzeń fiksacji i sakad, które są zsynchronizowane czasowo z prezentacją bodźca (lub innym zdarzeniem zewnętrznym), odbywa się za pomocą komputera nadrzędnego i może być analizowana w programie Data Viewer opracowanym przez SR Research Ltd; niemniej jednak do wyznaczenia wymaganych parametrów ruchów gałek ocznych można wykorzystać również inne programy. W tym przypadku detekcja fiksacji i sakad zależy od parsera online, który rozdziela surowe próbki ruchów oczu na znaczące stany (sakady, mrugnięcia i fiksacje). Jeśli prędkość dwóch następujących po sobie próbek ruchu oka przekracza 2 stopnie na sekundę na dystansie 0.1°, próbki te są klasyfikowane jako sakada. Jeśli źrenica jest niewidoczna przez 3 lub więcej próbek, aktywność oka w strumieniu danych jest oznaczana jako mrugnięcie. Aktywność niebędąca sakadą ani mrugnięciem jest uznawana za fiksację.
Procedury okulografii.
Poniżej szczegółowo opisujemy procedury pozyskiwania zapisów ruchów gałek ocznych dla każdego uczestnika.
- Zgoda. Przed przygotowaniem uczestników prezentowana jest im opaska z okularym eye-trackery. Eksperymentator wyjaśnia uczestnikom, że pozycja głowy i oczu jest monitorowana za pomocą kamer znajdujących się w opasce.
- W przypadku danego paradygmatu eksperymentalnego uczestnicy siedzą w stałej odległości od monitora, aby zachować ten sam kąt widzenia u wszystkich badanych.
- Konfiguracja kamer eyetrackera. Hełm eytrackera zostaje dopasowany tak, aby ściśle przylegał do głowy i nie przemieszczał się, lecz nie powodował dyskomfortu. Hełm jest dalej regulowany w taki sposób, aby kamera głowowa mogła wysyłać promieniowanie podczerwone do markerów zewnętrznych znajdujących się na monitorze wyświetlacza. Każda z kamer oka jest osadzona na oddzielnym ramieniu wysuniętym z hełmu, co umożliwia regulację we wszystkich osiach. Kamery oka są rozmieszczone tuż poniżej i lekko oddalone od każdego oka, w sposób niezasłaniający uczestnikowi widoku monitora wyświetlacza (patrz Rysunek 1). Ostrość kamer jest ustawiana tak, aby uzyskać wyraźny i stabilny obraz źrenicy oraz odblasków rogówkówki. Panele stanu w komputerze sterującym wskazują, czy obraz źrenicy i odblasków rogówki są rejestrowane. Próg podświetlenia można dostosować, aby uzyskać najstabilniejszy zapis źrenicy i odblasków rogówki. Następnie eksperymentator wybiera odpowiedni paradygmat eksperymentalny i nadaje nazwę plikowi dla nadchodzących zapisów ruchów gałek ocznych.

Rycina 1. Przykład nałożonego na głowę eyetrackera wideo (po lewej) oraz monitora i komputera sterującego (po prawej). Należy zwrócić uwagę, że monitor wyświetlany przed uczestnikiem pokazuje położenie źrenicy (niebieska kropka z celownikiem) i odbicia rogówkowego (żółta kropka z celownikiem), co ułatwia konfigurację kamery.
- Kalibracja. Aby uzyskać dokładne zapisy pozycji oka na monitorze, po konfiguracji kamery uruchamia się procedurę kalibracji. Podczas procedury kalibracji uczestnicy otrzymują polecenie patrzenia na serię punktów odniesienia pojawiających się w różnych miejscach na wyświetlaczu. Zazwyczaj wykorzystuje się dziewięć lokalizacji punktów odniesienia, jednak kalibrację można przeprowadzić przy użyciu nawet trzech takich punktów. Na podstawie tych dziewięciu zarejestrowanych lokalizacji można interpolować pozycję oka w dowolnym punkcie ekranu.
- Walidacja. Po kalibracji stosowana jest procedura walidacji w celu sprawdzenia dokładności rejestracji ruchów gałek ocznych. Uczestnik ponownie fiksuje te same dziewięć lokalizacji celów, a następnie obliczana jest różnica między bieżącą pozycją fiksacji a poprzednio zarejestrowaną pozycją fiksacji. Jeśli średnia dokładność rejestracji pozycji dla jednego (lub obu) oczu przekracza dopuszczalne poziomy (średni błąd < 0.5° or maksymalny błąd w dowolnym punkcie < 1.0°), ponownie przeprowadza się procedury kalibracji i walidacji. Po zaakceptowaniu poziomów dokładności badacz może określić, czy rejestracja ruchów gałek ocznych powinna być monokularna czy binokularna. W przypadku rejestracji monokularnej badacz może wskazać oko, z którego mają być rejestrowane dane, lub komputer sterujący może automatycznie wybrać oko o niższym średnim i maksymalnym błędzie. Choć kalibracja i walidacja mogą odbywać się przy niewielkich ruchach głowy, korzystne jest, aby uczestnicy siedzieli tak nieruchomo, jak to możliwe. Uczestnicy otrzymują również instrukcję, aby nie antycypować nadchodzących lokalizacji celów, lecz przemieszczać wzrok i świadomie fiksować go na celach dopiero w momencie ich pojawienia się oraz utrzymywać fiksację na celu aż do jego zniknięcia.
- Paradygmat eksperymentalny. Uczestnikowi prezentowane są instrukcje właściwe dla danego paradygmatu (np. „Proszę swobodnie oglądać każde z poniższych zdjęć”), a następnie rozpoczyna się rejestrację danych dla danej sesji.
- Korekcja dryftu. Przed rozpoczęciem każdego bodźca eksperymentalnego można przeprowadzić korekcję dryftu, prosząc uczestników o patrzenie na centralny punkt fiksacji przy jednoczesnym naciskaniu przycisku na joypadzie lub klawiaturze w celu zatwierdzenia pozycji fiksacji. W przypadku zastosowania korekcji dryftu próba nie rozpocznie się, dopóki uczestnik nie ustali pomyślnie fiksacji w centralnym obszarze fiksacji w ramach 2.0° punktu centralnego celu. Jeśli uczestnik konsekwentnie fiksuje wzrok powyżej 2.0°uczestnik musi ponownie przejść procedury kalibracji i walidacji. Każda różnica mniejsza niż 2.0° Różnica między zarejestrowaną pozycją oka a początkową pozycją fiksacji uzyskaną podczas pomiarów kalibracyjnych/walidacyjnych jest następnie odnotowywana jako błąd i uwzględniana w danych.
- Prezentacja bodźca. Pozycję oka, w tym zdarzenia fiksacyjne i sakadyczne, rejestruje się po przeprowadzeniu procedur korekcji dryfu dla każdej prezentacji bodźca. Eksperymentator może monitorować dokładność rejestracji w czasie rzeczywistym, dokonując inspekcji na komputerze głównym.
- Po zakończeniu sesji rejestracji ruchów gałek ocznych, za pomocą różnych pakietów oprogramowania, takich jak Data Viewer firmy SR Research Ltd, można wyznaczyć miary charakteryzujące wzorce skanowania podczas ruchów gałek ocznych dla różnych typów obrazów (np. nowych, powtarzanych). Ponadto analizę patrzenia na konkretne obszary bodźca (np. niezmienione, zmodyfikowane) można przeprowadzić poprzez analizę ruchów gałek ocznych w odniesieniu do wyznaczonych przez eksperymentatora obszarów zainteresowania (regions of interest), które są tworzone dla każdego obrazu albo na etapie programowania paradygmatu, albo po zebraniu danych.
- Po zakończeniu sesji uczestnicy zostali poinformowani o celu eksperymentu.
Reprezentatywne wyniki
Z rejestracji ruchów gałek ocznych można wyprowadzić wiele miar, w tym wskaźniki opisujące ogólne oglądanie obrazu (w tym charakterystykę każdego utrwalenia wzroku/sakady) oraz miary opisujące wzorzec oglądania skierowany na konkretny obszar zainteresowania w obrębie obrazu 3. Miary ogólnego oglądania obrazu mogą obejmować (między innymi): liczbę utrwaleń wzroku i liczbę sakad wykonanych na obrazie, średni czas trwania każdego utrwalenia oraz całkowity czas oglądania poświęcony na fiksację obrazu. Miary opisujące wzorzec oglądania konkretnego obszaru zainteresowania mogą obejmować (między innymi): liczbę utrwaleń wzroku w obszarze zainteresowania, czas spędzony w obszarze zainteresowania oraz liczbę przejść do obszaru zainteresowania lub z niego. Ponadto z rejestracji ruchów gałek ocznych można wyprowadzić miary określające czas (tj. jak wcześnie) wystąpienia konkretnego zdarzenia ruchowego, takie jak moment utrwalenia wzroku na określonym obszarze zainteresowania po pojawieniu się bodźca, moment wykonania pierwszej sakady na obrazie oraz entropię (stopień ograniczenia/losowości) właściwą dla sekwencji wzorców ruchów gałek ocznych.
W przypadku każdego obrazu pomiary ruchów gałek ocznych mogą szczegółowo określić, gdzie wzrok był utrwalony, kiedy i jak długo. Aby uzyskać wskaźnik pamięci, możemy poddać obserwatorów różnym typom lub ilościom ekspozycji na odmienne zestawy obrazów, a następnie porównać wzorce oglądania między tymi zestawami oraz między uczestnikami. Na przykład, aby zbadać pamięć dotyczącą powtórzenia obrazu, można zestawić wzorce skanowania obrazów nowych z obrazami, które były oglądane wielokrotnie w trakcie sesji testowej. Wielokrotne oglądanie obrazów w trakcie sesji testowej prowadzi do zmniejszenia całkowitego czasu oglądania obrazu 2, 4-5, 8. Można to zaobserwować na Rysunku 2. W tym reprezentatywnym wyniku z pracy Riggs i wsp. 1 uczestnicy oglądali nowe zdjęcia twarzy raz w każdym z pięciu bloków testowych; wraz ze wzrostem ekspozycji zmniejszała się liczba fiksacji, które obserwatorzy kierowali na twarze. Aby zbadać pamięć dotyczącą szczegółów obrazu, można zestawić wzorce skanowania obrazów, które były wielokrotnie oglądane w ich oryginalnej, niezmienionej formie (obrazy powtórzone), z obrazami, które były analogicznie oglądane wielokrotnie w trakcie sesji testowej, ale podczas ostatniej ekspozycji wprowadzono zmianę w niektórych elementach sceny (obrazy manipulowane). W takich przypadkach wzorce skanowania są w różny sposób przyciągane do obszaru, który został zmieniony w obrazie manipulowanym, w porównaniu z tym samym, niezmienionym obszarem w obrazach powtórzonych 2-3, 7-8. Jednakże takie wskaźniki pamięci oparte na ruchach gałek ocznych nie występują w niektórych populacjach, na przykład gdy ocenia się pamięć relacji przestrzennych między obiektami w scenach u zdrowych osób starszych oraz u pacjentów z amnezją spowodowaną uszkodzeniem przyśrodkowego płata skroniowego, co przedstawiono na Rysunku 3 2, 8. Zatem wyniki monitorowania ruchów gałek ocznych mogą być wykorzystywane do kontrastowania pamięci w grupach uczestników o różnym stanie neuropsychologicznym 2-3, 8-10.

Rycina 2. Ruchy gałek ocznych ujawniają pamięć o powtórzeniu. W tym reprezentatywnym wyniku z naszego laboratorium [11] uczestnicy oglądali twarze w ciągu 5 bloków badawczych; wraz ze wzrostem liczby wyświetleń (od 1 do 5), liczba fiksacji na twarzach uległa zmniejszeniu.

Rysunek 3. Ruchy gałek ocznych ujawniają pamięć o zmienionych szczegółach. Młodzi dorośli [2 (eksperymenty 1, 2), 8 (warunek swobodnego oglądania)] kierowali większą proporcję całkowitych fiksacji wzroku na krytyczny obszar w manipulowanym obrazie, który uległ zmianie w porównaniu z poprzednim oglądaniem, niż w przypadku, gdy obszar ten nie uległ zmianie, jak ma to miejsce w obrazach nowych i powtarzanych. Takie efekty pamięciowe nie wystąpiły u zdrowych starszych dorosłych [8 (warunek swobodnego oglądania)] oraz u pacjentów z amnezją [2].