Izolacja genomowego DNA z ogonów myszy

Protocol

1. Wytnij kawałki ogona (3 mm) i zaznacz uszy.
2. Dodaj 720 ml STE i 30 ml Proteinaza K (zapas 10 mg/ml).
3. Inkubacja w 55°C na bloku grzewczym i wirować co godzinę przez 3 godziny z maksymalną prędkością przez 10 sekund.
4. Dezaktywuj proteinazę K w 70°C przez 5 minut.
5. Quić na lodzie przez 5 minut.
6. Wirować DNA ogona przez 10 minut z pełną prędkością.
7. Dekantacja do nowej probówki zawierającej 720 ml Isopropanol.  
8. Wytrącić DNA, odwracając rurkę lub wirując.
9. Obracaj DNA przez 5 minut z pełną prędkością. Usunąć supernatant.
10. Umyj pellet 70% etanolem.
11. Zakręć genomowym DNA przez 5 minut z pełną prędkością. Usunąć supernatant.
12. Pozostaw DNA do wyschnięcia na 1-2 minuty.
13. Zawieś DNA w 100-200 ml w zależności od wielkości granulki.
14. Umieść probówkę na 55°C na 1 godzinę, aby ułatwić rozpuszczenie DNA.  

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
	STE Bufor			100 mm Tris; pH 8,5 /5 mM EDTA /0,2% SDS /200 mM NaCl / in H2O
	Bufor			TE 100 mM Tris; pH 5,0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl