Wstrzyknięcie do ściany pęcherza myszy

Summary

Wstrzyknięcie do ściany pęcherza moczowego myszy jest użytecznym podejściem do ortotopowego badania komórek macierzystych pęcherza moczowego i biologii raka. Tę delikatną metodę mikrochirurgiczną można opanować dzięki starannej technice i praktyce.

Abstract

Wstrzykiwanie w ścianę pęcherza myszy jest użyteczną techniką do ortotopowego badania zjawisk związanych z pęcherzem, w tym komórek macierzystych, mięśni gładkich i biologii raka. Przed rozpoczęciem iniekcji obszar operacyjny należy oczyścić wodą z mydłem i roztworem antyseptycznym. Sprzęt chirurgiczny musi być wysterylizowany przed użyciem i między każdym zwierzęciem. Każdą mysz umieszcza się w znieczuleniu wziewnym izofluranem (2-5% do indukcji, 1-3% do konserwacji), a jej pęcherz moczowy odsłania się poprzez wykonanie nożyczkami nacięcia brzucha w linii środkowej. Jeśli pęcherz jest pełny, jest częściowo rozprężany poprzez delikatne ściskanie między dwoma palcami. Zawiesina komórkowa będąca przedmiotem zainteresowania jest wstrzykiwana domięśniowo w ścianę kopuły pęcherza moczowego za pomocą igły o rozmiarze 29 lub 30 i strzykawki o pojemności 1 cm3 lub mniejszej. Rana jest następnie zamykana za pomocą klipsów do ran, a mysz pozwala się zregenerować na podkładce rozgrzewającej. Iniekcja do ściany pęcherza moczowego to delikatna technika mikrochirurgiczna, którą można opanować wraz z praktyką.

Protocol

1. Wstrzyknięcie do ściany pęcherza myszy

Wybór odmiany myszy, wieku i płci jest podyktowany potrzebami eksperymentalnymi. Używamy myszy w wieku od 8 do 12 tygodni, ponieważ jest to okno dojrzałości immunologicznej przed starzeniem się. Zgodnie z ogólną wskazówką, myszy powinny przybyć co najmniej tydzień przed eksperymentalną manipulacją, aby uniknąć czynników zakłócających wywołanych stresem.

1. Oczyść powierzchnię stołu chirurgicznego wodą z mydłem.
2. Przetrzyj powierzchnię stołu chirurgicznego chusteczkami Cide Swipes lub chusteczkami antyseptycznymi.
3. Autoklaw wyczyść narzędzia chirurgiczne przed użyciem w chirur....

Discussion

Iniekcja do ściany pęcherza moczowego myszy pozwala na implantację określonych komórek w określonych obszarach ściany pęcherza moczowego. Technika ta ma szerokie zastosowanie w mysich modelach raka pęcherza moczowego, mięśni gładkich i biologii komórek macierzystych. Z definicji wstrzyknięcie do ściany pęcherza moczowego myszy ułatwia wprowadzenie raka pęcherza moczowego lub komórek macierzystych do lokalizacji ortotopowej, dzięki czemu ich wzrost i różnicowanie można badać w fizjologicznie istotnym kontekście anatomiczn.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Izofluran (Aerrane)	Baxter Internationl Inc.	NDC 10019-773-60
Igły o rozmiarze 29 lub 30 Hamilton	Co	7803-06 lub 7803-07
Strzykawka 100 mikrolitrów	Hamilton Co	7656-01