$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Przygotowanie łożyska
- Łożysko powinno zostać pobrane z sali porodowej tak szybko, jak to możliwe po porodzie, aby zminimalizować tworzenie się skrzepów, wysuszenie i ogólne pogorszenie stanu tkanki.
- Należy dołożyć starań, aby łożysko nie było narażone na działanie formaliny lub innych utrwalaczy.
- Należy zachować standardowe środki ostrożności BSL2 dotyczące tkanek ludzkich, a personel powinien nosić maskę, fartuch, rękawiczki i ochraniacze na buty.
- Umieść łożysko w dużej plastikowej lub metalowej misce z wyciętymi otworami, aby umożliwić odpływ płynu. Miskę tę należy umieścić w większej misce ze stali nierdzewnej, aby zapobiec rozlaniu.
- Umyj łożysko ciepłą solą fizjologiczną.
- Aby uzyskać lepszą wizualizację łożyska, użyj nożyczek Metzenbaum, aby wyciąć między bliźniaczymi błonami owodniowymi, uważając, aby nie uszkodzić samego łożyska. Pozostaw 1/2 cm mankiet z membrany międzywarstwowej na miejscu. (Rysunek 1A).
2. Cewnikowanie naczyń łożyskowych
- Zidentyfikuj przewody odpowiednich bliźniąt. Położnicy zwykle identyfikują każde bliźnięta na podstawie liczby klamer umieszczonych na każdej pępowiny. Pamiętaj, aby potwierdzić, który przewód został dostarczony do prezentującego bliźniaka (bliźniaka A).
- Pojedynczo, śledząc, który przewód jest który, przeciąć każdy przewód tuż poniżej zacisków (Rysunek 1B). Delikatnie wytworzyć skrzep mleka z naczyń (ryc. 1C). Na przeciętej krawędzi sznura będzie jedna żyła i co najmniej jedna, zwykle dwie tętnice. Tętnice identyfikuje się na podstawie ich stosunkowo mniejszej średnicy (w porównaniu z żyłą) i otaczającego ją mankietu mięśniowego (ryc. 1D).
- Użyj standardowego drutu prowadzącego promieniową linię tętniczą o średnicy 0,46 mm i długości 80 cm (Arrow, Reading PA, USA) z miękką końcówką, aby uzyskać dostęp do otworu tętniczego na przeciętej krawędzi sznurka bliźniaczego A (rysunek 1E).
- Przewód doprowadzający należy umieścić w naczyniu co najmniej 3 cm. Delikatne przeciwprężenie na nienaczyniowej części ciętej krawędzi sznurka za pomocą zacisku Kelly'ego znacznie ułatwia przesuwanie drutu. Niewielkie obrócenie sznurka w celu wyprostowania krętych naczyń może pomóc w postępie drutu. Należy zachować ostrożność, aby uniknąć fałszywych pasaży.
- Stosując technikę Seldingera, nawlecz cewnik polietylenowy o średnicy wewnętrznej 0,6-1,19 mm o długości 20 cm (Intramedic, Batavia IL, USA) z tępo ściętym dystalnym końcem nad drutem do tętnicy (ryc. 1F). Należy uważać, aby nie przesunąć drutu podczas przesuwania cewnika. Usuń drut po umieszczeniu cewnika w naczyniu co najmniej 3 cm.
- Alternatywnie, niektóre grupy odniosły sukces bez użycia prowadnika i bezpośredniej kaniulacji naczyń pępowinowych za pomocą cewników do tętnic pępowinowych. Chociaż ta technika dobrze sprawdza się w naszych rękach, użycie prowadnika skróciło czas potrzebny nam na wykonanie zabiegu.
- Przymocuj igłę z końcówką 18 G (BD Biosciences, Franlik Lakes, NJ, USA) do bliższego końca rurki. Upewnij się, że cewnik jest prawidłowo umieszczony, wstrzykując niewielką ilość soli fizjologicznej do naczynia i obserwując udrażnienie dystalnych tętnic. Delikatne przesuwanie palcami po naczyniach podczas wstrzykiwania soli fizjologicznej może ułatwić przemieszczanie się wszelkich resztek skrzepów.
- Ostrożnie powtórzyć kroki od 2.3 do 2.6 dla żyły bliźniaka A, zwracając uwagę, aby uniknąć przemieszczenia cewnika tętniczego.
- Przywiąż kawałek taśmy pępowinowej 1 cm dystalnie do krawędzi cięcia wokół pępowiny i cewników. Upewnij się, że jest szczelnie uszczelniony, aby uniknąć przepływu wstecznego.
- Powtórz kroki od 2.3 do 2.9 dla pępowiny bliźniaka B (bliźniaka niebędącego obecnego) tak, aby w tętnicy pępowinowej i żyle każdego bliźniaka znajdowały się cewniki zabezpieczone taśmą pępowinową, a oba krążenia zostały wstrzyknięte solą fizjologiczną (ryc. 2).
3. Wstrzykiwanie kolorowego barwnika do naczyń łożyskowych
- Barwnik patologiczny, zawiesiny baru, żelatyna lub inne lepkie barwniki kolorowe mogą być używane do wizualizacji unaczynienia łożyska. Wybierz cztery kontrastujące kolory, za pomocą których chcesz wstrzyknąć tętnice i żyły bliźniąt A i B. Kolory tętnicy i żyły dla każdego bliźniaka powinny być łatwe do odróżnienia. Powierzchowne zespolenia powinny być wykrywalne przez zmieszanie barwnika i utworzenie innego (zmieszanego), łatwo wykrywalnego koloru.
- Za pomocą strzykawki o pojemności 3 ml ręcznie wstrzyknąć do tętnicy bliźniaczej A barwnik pod niskim ciśnieniem. Delikatnie przesuń jednym lub dwoma palcami wzdłuż naczyń w kierunku przepływu barwnika, aby zapewnić wypełnienie całego drzewa naczyniowego. W przypadku zidentyfikowania powierzchownego zespolenia naczyniowego można zastosować ręczną okluzję naczynia do karmienia, aby umożliwić wypełnienie reszty łożyska naczyniowego o wyższym oporze (ryc. 3A).
- Użyj oddzielnej strzykawki o pojemności 3 ml, aby ręcznie wstrzyknąć tętnicę bliźniaka B (Rycina 3B).
- Powtórzyć kroki 3.2 i 3.3 dla wstrzyknięć dożylnych.
- Jeśli barwnik wycieka z uszkodzonego naczynia, naprawę należy wykonać za pomocą cienkiego szwu i wkrętaka igłowego. Uważaj, aby nie zszyć podwiązki całego naczynia.
- Za pomocą aparatu cyfrowego o wysokiej rozdzielczości należy wykonać zdjęcie po każdym wstrzyknięciu. Po zakończeniu wszystkich wstrzyknięć należy wyjąć próbkę z miseczek, umieścić ją na neutralnym kolorystycznie tle i ponownie wykonać zdjęcie (ryc. 4). Udokumentuj liczbę i rodzaj połączeń zaobserwowanych między krążeniami bliźniąt.
4. Reprezentatywne wyniki:
Wykazano, że zespolenia tętnica-tętnica (AA) są "ochronne", ponieważ wiążą się ze znacznie zmniejszonym ryzykiem TTTS i lepszymi wynikami dla obu bliźniąt5. Rycina 4 przedstawia bliźniacze łożysko MC, któremu wstrzyknięto implant. AA zostało prospektywnie zidentyfikowane przez USG Doppler in utero. Odkrycie to zostało potwierdzone przez zmieszanie barwnika tętniczego bliźniaka A (żółty) i barwnika tętniczego bliźniaka B (niebieski) w komunikującej się strukturze tętniczej (zielony, strzałka). Uwidocznione jest również zespolenie przedsionkowo-komorowe z tętnicą z bliźniaka A (żółty) i żyłą z bliźniaka B (pomarańczowy) (grot strzałki). Ryciny 5 i 6 przedstawiają fotografie dwóch innych próbek łożyska, którym wstrzyknęliśmy implant.

Rysunek 1. (A) Błona owodniowa jest ostrożnie usuwana z powierzchni płodu wspólnego łożyska MC za pomocą nożyczek Metzenbauma. (B) Czysta krawędź pępowiny bliźniaka A jest odsłonięta przez proksymalne przecięcie nożyczkami Metzenbauma. (C) Skrzep jest dojony ze sznura przez ręczne ściskanie. (D) Zidentyfikowano tętnice pępowinowe (groty strzałek) i żyłę (strzałkę) bliźniaka A. (E) Po umieszczeniu zacisku Kelly'ego na jałowej części przeciętej powierzchni sznura w celu ciągnięcia, drut prowadzący umieszcza się w tętnicy pępowinowej bliźniaka A i delikatnie przesuwa się przez kręte naczynie. (F) Mały cewnik jest następnie wprowadzany przez prowadnik do światła naczynia przy użyciu techniki Seldingera.

Rysunek 2. Cewniki umieszczono w jednej tętnicy pępowinowej oraz w żyle pępowinowej każdego z bliźniąt. Cewniki te są zabezpieczone taśmą pępowinową wokół całej pępowiny. Potwierdzono prawidłowe ułożenie każdego cewnika, a skrzepy śródświetlne zostały usunięte przez wstrzyknięcie podgrzanej soli fizjologicznej.

Rysunek 3. (A) Krążenie tętnicze bliźniaka A jest wstrzykiwane żółtym barwnikiem. Kontrast wyraźnie przechodzi przez równik naczyniowy do krążenia tętniczego bliźniaka B. (B) Krążenie tętnicze bliźniaka B jest wstrzykiwane niebieskim barwnikiem. Zmieszanie barwnika żółtego i barwnika niebieskiego powoduje powstanie barwnika zielonego w obrębie wykazanego zespolenia AA (strzałka).

Rysunek 4. Żylna bliźniaka A (czerwona) i żyła bliźniaka B (pomarańczowa) zostały wstrzyknięte. Zaznaczono zespolenie AA (strzałka) i zespolenie przedsionkowo-komorowe, z przepływem skierowanym od bliźniaka A w kierunku bliźniaka B (grot strzałki).

Rysunek 5. Przykład bliźniaczego łożyska MC, które zostało poddane laseroterapii po iniekcji poporodowej. Tętnica i żyła bliźniaka dawcy są odpowiednio w kolorze żółtym i zielonym. Tętnica i żyła biorcza są odpowiednio w kolorze niebieskim i pomarańczowym. Nie wykryto szczątkowych połączeń między obiegami.

Rysunek 6. Przykład podwójnego łożyska MC po wstrzyknięciu. Tętnica i żyła bliźniaka po lewej stronie są odpowiednio w kolorze żółtym i czerwonym. Tętnica i żyła bliźniaka prawostronnego są odpowiednio w kolorze niebieskim i pomarańczowym. AA (grot strzałki) i VV (strzałka) są widoczne na powierzchni łożyska.