Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
3.9K wyświetleń
⸱
30 kwietnia 2023
Źródło: Sharrow, A. C. et al. Wykorzystanie błony kosmówkowo-omoczniowej kurczaka w modelu in vivo do badania nowotworów ginekologicznych i urologicznych. J. Vis. Exp.(2020)
W tym filmie opisujemy wszczepianie komórek rakowych na błonę kosmówkowo-omoczniową kurczaka w celu wygenerowania modelu in ovo. Model z powodzeniem wszczepia komórki raka jajnika w celu zbadania progresji raka ginekologicznego.
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Przygotowanie zawiesiny komórek rakowych do przeszczepu (opcja 1)
UWAGA: To powinno być zakończone tuż przed implantacją, która powinna mieć miejsce między 7 a 10 dniem. Prosimy o zapoznanie się z uwagami na początku kroku 3 lub 4 w celu uzyskania dalszych informacji na temat daty implantacji. Podejście to zastosowano dla wszystkich linii komórkowych i hodowlanych trawień guza raka nerki.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| 010 Teflon (PTFE) Biały 55 O-ringi Duro Shore D | Sklep z O-ringami | TEF010 | Nieprzywierający pierścień do wysiewu komórek. 1/4 "ID X 3/8" OD X 1/16 "CS Politetrafluoroetylen (PTFE). |
| Delikatne nożyczki operacyjne; Zakrzywiony; ostry-ostry; 30mm Długość ostrza; 4-3/4 cala Długość całkowita | Roboz Chirurgiczny | Złącze RS6703 | Jest to podane jako przykład. Wszelkie podobne zakrzywione nożyczki również by się sprawdziły. |
| Zestaw narzędzi Dremel 8050-N/18 Micro 8 V Max | Dremel | 8050-N/18 | Ten zestaw zawiera wszystkie niezbędne narzędzia |
| Zapłodnione jaja kurze (Rhode Island Red - Brown, klasa laboratoryjna) | AA Lab Jaja Inc. | N/a | Konieczne byłoby zidentyfikowanie lokalnego dostawcy jaj, ponieważ ten dostawca dostarcza jaja tylko regionalnie. |
| Hovabator Genesis 1588 Deluxe Zestaw Combo do inkubatora do jaj | Magazyn inkubatora | HB1588D-BRAK-1102-1588-1357 | Mogą być stosowane inne inkubatory do jaj, ale ich niezawodność musiałaby zostać zweryfikowana. Po implantacji można również zastosować inkubator komórkowy z wyłączonym CO2 |
| Incu-Bright Cool Light Egg Candler | Magazyn inkubatora | Numer katalogowy 1102 | Można użyć innych świec, jednak jest to preferowane spośród tych, które testowaliśmy. Ten świecownik znajduje się we wspomnianym zestawie inkubatora. |
| Matrigel Membrana Matrix HC; Nie zawiera LDEV | Corning | 354248 | Roztwór macierzy zewnątrzkomórkowej |
| SKOV3 | Kontroler ATCC (Kontroler T | Zobacz materiał HTB-77 | Linia komórkowa ludzkiego raka jajnika. |
| Pręty mieszające z gumą Policeman; średnica 5 mm, długość 6 cali | Zjednoczone Zaopatrzenie Naukowe | GRPL06 | Jest to podane jako przykład. Wszelkie podobne szklane pręty do mieszania również by się sprawdziły. |
| Kleszcze do próbek | Nauki o mikroskopii elektronowej | Numer katalogowy: 72914 | Jest to podane jako przykład. Kleszcze służące do odciągania skorupy do obrazowania bioluminescencyjnego mają około 12,8 cm długości i końcówki o szerokości 3 mm. |
