Artykuł metodologiczny

Hodowla salisfer z tkanki gruczołów ślinowych: metoda rozwoju salisfer z komórek nabłonka pochodzących z ludzkich gruczołów ślinowych

30 kwietnia 2023

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Beucler, M. J., Miller, W. E. Izolacja komórek nabłonka śliny z ludzkich gruczołów ślinowych do wzrostu in vitro w postaci salisfer lub monowarstw. J. Vis. Exp. (2019)

Ten film przedstawia protokół hodowli salisfer, trójwymiarowych sferoid pochodzących z gruczołów ślinowych. Ślikule mogą być dalej wykorzystywane do oceny wpływu raka głowy i szyi na produkcję śliny z gruczołów ślinowych dotkniętych chorobą pacjentów.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury z udziałem ludzi zostały przeprowadzone zgodnie z instytucjonalnymi, krajowymi i międzynarodowymi wytycznymi dotyczącymi dobrobytu ludzi i zostały sprawdzone przez lokalną komisję rewizyjną instytucji.

1. Trawienie tkankowe

  1. Używając płytki do hodowli tkankowej o średnicy 100 mm, mechanicznie zmielić tkankę na drobne kawałki o wielkości ~1–2 mm za pomocą sterylizowanych w autoklawie nożyczek preparacyjnych i kleszczy chirurgicznych (ryc. 1B, C). Tkanka łączna między kawałkami powinna zostać przecięta, aby zapewnić prawidłowe oddzielenie i łatwość w dalszych kr....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Szalki hodowlane 100 mm Thermo Scientific172931
Probówki stożkowe 15 ml Thermo Scientific 339651
Probówki stożkowe 50 ml Thermo Scientific 339653
Pożywka do wzrostu komórek nabłonka oskrzeli Lonza CC-3171 Dodaj zestaw pocisków zgodnie z instrukcjami producenta. Uzupełnij 20 ml surowicy pozbawionej węgla drzewnego.
Sitko do komórek, siatka nylonowa 70 μm rybak 22-363-548
Surowica bydlęca pozbawiona węgla drzewnego Gibco (firma Gibco) Numer katalogowy: 12676-029
Kolagenaza typu III Worthington LS004182 Przechowywać w temperaturze 4 °C.
Rozpuść Zastosowania komórkowe Zobacz materiał 7923Rozpuść kolagenazę, aby uzyskać 0,15% (w/v) zapasu. Filtrować, sterylizować, a następnie przechowywać w temperaturze -20 °C.
Nożyczki preparacyjne rybak Numer katalogowy: 08-940
Sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco Corning 55-031-SZT.
PathClear Ekstrakt z błony podstawnej Kultura Nr kat. 3432-005-01 Rozmrozić w temperaturze 4 °C co najmniej 24 godziny przed użyciem. Zawsze obchodź się z lodem.
Sześciodołkowe naczynia hodowlane sokół 353046
Kleszcze chirurgiczne rybak 22-079-742
powiedział: TGL

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Hodowla salisferizolacja kom rek nab onkowychtrawienie tkanekkolagenaza i dispazafiltracja przez sitko do kom rekbufor do lizy RBCmatryca b ony podstawnejpowlekanie BMMformowanie salisfer

Powiązane artykuły