Wsteczna perfuzja serca Langendorffa: technika ex vivo perfuzji izolowanego serca myszy

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Wu, K. et al. Modyfikacje metody Langendorffa do jednoczesnej izolacji miocytów przedsionkowych i komorowych od dorosłych myszy. J. Vis. Exp. (2021)

W tym filmie wykonujemy retrogradacyjną perfuzję Langendorffa izolowanego serca myszy. Podczas zabiegu czynność serca jest utrzymywana poprzez jego wsteczne perfuzję roztworem perfuzyjnym przez tętnice wieńcowe za pomocą kaniuli wprowadzanej do aorty wstępującej. Model służy do badania patofizjologii serca serca.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Przygotowanie roztworu i aparatu perfuzyjnego

Zmontuj aparat Langendorffa o stałym przepływie (dostępny na rynku lub własnej produkcji). Rysunek 1 przedstawia prosty schemat.
Przygotować roztwory zgodnie z odczynnikami podanymi w Tabeli 1 i Tabeli 2.
Włącz łaźnię z krążącą wodą i wyreguluj odpowiednią temperaturę wejściową (42,7 °C w naszym laboratorium), aby upewnić się....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

figure-results-1
Rysunek 1. Schemat ideowy zmontowanego zmodyfikowanego systemu Langendorffa.System ten jest ekonomiczny i przenośny dla użytkowników. Składa się z dwóch części rurki z tworzywa sztucznego - jednej do wody (średnica wewnętrzna, 8 mm) i jednej do perfuzatu (średnica wewnętrzna, 1,5 mm) - z których dystalny koniec jest podłączony do medycznego trzydrogowego kranu PE z zamkiem Luer. Szkl.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
Nazwa	Firma	Numer katalogowy
Monoksym 2,3-butanodionu (BDM)	Sigma-Aldrich	Numer katalogowy: 31550
CaCl₂	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał C4901
glukoza	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał G7528
HEPESY	Sigma-Aldrich	H3375
Kcl	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał P9333
KH₂PO₄	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał P5655
KHCO₃	Sigma-Aldrich	237205
MgCl₂	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał M8266
MgSO₄	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał M7506
Na₂HPO₄	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał S7907
Zawartość NaCl	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał S7653
NaHCO₃	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał S5761
Pompa perystaltyczna	Dłuższa pompa	Zobacz materiał BT100-2J
tauryna	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał T0625
Kąpiel wodna	JULABO	ED (wersja 2)

powiedział: powiedział: powiedział: powiedział: