Kolekcja White and Brown Adipose Depot od Mouse Pup: procedura chirurgiczna mająca na celu zebranie białej tkanki tłuszczowej i brązowej tkanki tłuszczowej od szczeniaka myszy

Streszczenie

Źródło: Galmozzi, A. et al. Izolacja i różnicowanie pierwotnych białych i brązowych preadipocytów od nowonarodzonych myszy. J. Vis. Termin ważności (2021)

W tym filmie pokazujemy procedurę chirurgiczną polegającą na izolowaniu podskórnej białej tkanki tłuszczowej i brązowej tkanki tłuszczowej między łopatkami od nowonarodzonej myszy.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Zbieranie i trawienie magazynów tłuszczu (dzień 1)

1. Przygotuj dwie probówki o pojemności 1,5 ml dla każdego szczeniaka: jedną dla brązowej tkanki tłuszczowej (BAT) i jedną dla białej tkanki tłuszczowej (WAT). Do każdej probówki dodać 250 μl soli fizjologicznej buforowanej fosforanami (PBS) + 200 μl 2x buforu izolacyjnego (123 mM NaCl, 5 mM KCl, 1,3 mM CaCl₂, 5 mM glukozy, 100 mM kwasu 4-(2-hydroksyetylo)-1-piperazynoetanosulfonowe....

Wyniki

Rysunek 1: Zbieranie i przetwarzanie poduszek tłuszczowych. (A) Schematyczne przedstawienie pierwotnej białej (na górze) i brązowej (na dole) izolacji adipocytów. (B) Podskórne białe (na górze) i brązowe (na dole) magazyny tłuszczu. U myszy P0 podskórny WAT jest prawie niewidoczny, ale staje się rozpoznawalny w ~ dniu 2 po urodzeniu. Natomiast BAT ma wyraźny ciemny .......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Płytki 6-dołkowe	Corning	353046
BSA bez kwasów tłuszczowych	Sigma-Aldrich	A8806
CaCl2	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał C4901
glukoza	Sigma-Aldrich	Kontroler G7021
HEPESY	Sigma-Aldrich	H3375
Kcl	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał P9333
Zawartość NaCl	Sigma-Aldrich	Zobacz materiał S7653
Pióro/Paciorkowiec	Gibco (firma Gibco)	15140122
Kleszcze chirurgiczne	Instrument chirurgiczny ROBOZ Co	Złącze RS-5158
Nożyczki chirurgiczne	Instrument chirurgiczny ROBOZ Co	Złącze RS-5880
DPBS, bez wapnia, bez magnezu	Gibco (firma Gibco)	14190144

powiedział: powiedział: powiedział: