Modelowanie przezmacicznej niedrożności tchawicy płodu w modelu mysim: zabieg chirurgiczny podwiązania tchawicy płodu u ciężarnej myszy

W tym artykule

Streszczenie

Źródło: Aydın, E. et al. Model przezmacicznego okluzji tchawicy płodu u myszy. J. Vis. Exp. (2021)

Ten film pokazuje procedurę przezmacicznego zamknięcia tchawicy u płodu myszy u ciężarnej myszy. Model ten można wykorzystać do badania wpływu niedrożnej tchawicy na rozwój płuc.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Laparotomia

Oczyść powierzchnię brzucha alkoholem i jodowidonem. Utrzymuj sterylne warunki przez cały czas trwania operacji.
Wykonaj pionowe nacięcie do laparotomii ciężarnych matek. Wytnij wszystkie warstwy osobno.
Zidentyfikuj rogi macicy po każdej stronie.
Określ potencjalne płody do operacji.
nuta: Nie należy operować płodów, które znajdują się najbliżej pochwy.
Operuj dwa płody w każdym rogu macicy, jeśli po każdej stronie jest parzysta liczba płodów (4 w większości przypadków) i na 1 płodzie w każdym rogu macicy, jeśli macica ma nieparzystą liczbę (3 w większości przypadków).

2. Niedrożność tchawicy (TO)

Do wizualizacji używaj okularów z 2,5-krotnym powiększeniem.
Ustaw róg macicy w kierunku poprzecznym.
Weź szczenięta, skierowane do góry, między dwa palce, używając oczu szczeniąt i ogona jako przewodnika do ułożenia płodu.
Delikatnie dociśnij głowę szczeniaka, aby umożliwić wyprostowanie głowy, a tym samym wizualizację szyi.
Użyj szwu polipropylenowego 6.0 z atraumatyczną igłą, aby wykonać TO (ryc. 1). Łożysko należy trzymać z boku i z dala od punktów wejścia i wyjścia igły.
Wbić igłę poprzecznie przez bok macicy z dala od łożyska przez 1/3 przedniej części szyi.
Delikatnie przesuwaj igłę do linii środkowej szyi i skieruj ją do części przedniej, a następnie wyjdź z szyjki między tchawicą i naprzeciwko pochewki szyjnej i macicy.
Zawiąż szew, zwracając uwagę na zachowanie integralności błon i ściany macicy oraz utrzymuj pępowinę bezpiecznie podczas wiązania.

3. Zamknięcie ściany brzucha

Wymień róg macicy w jamie brzusznej.
Wstrzyknąć 2 ml ciepłego sterylnego roztworu soli fizjologicznej do jamy otrzewnej przed zamknięciem.
Załóż biegnący szew poliglaktynowy 5/0, aby zamknąć ścianę brzucha i zamknij skórę niebiegnącym jedwabnym szwem.
Zastosować dootrzewnowo 0,1 mg/kg buprenorfiny w celu znieczulenia i pozwolić matce na regenerację w ciepłym inkubatorze.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

figure-results-1
Rysunek 1. Niedrożność tchawicy. (A) Szew przezmaciczny przechodzący przez szyję. (B) Schematyczne przedstawienie struktur po przejściu szwu przez węzeł i przed nim. Skróty: C = tętnica szyjna; J = żyła szyjna; T = tchawica; E = przełyk; V = Kręg.