$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.
1. Niebieskie barwienie toluidyny
- Przygotuj 1% roztwór błękitu toluidynowego, rozpuszczając 2 g boranu sodu w 100 ml wody dejonizowanej, następnie dodaj 1 g błękitu toluidynowego i mieszaj aż do rozpuszczenia. Przefiltrować roztwór za pomocą bibuły filtracyjnej (wielkość porów: 11 μm) i przechowywać roztwór w nieprzezroczystej butelce w temperaturze pokojowej przez okres do dwóch tygodni.
- Za pomocą plastikowej pipety lub mikropipety dodaj kroplę roztworu błękitu toluidynowego na wierzch odcinków nerwowych i pozostaw na 20-30 sekund.
- Spłucz nadmiar roztworu błękitu toluidynowego, delikatnie zanurzając szkiełka w słoiku z wodą dejonizowaną i powtórz 3-4 razy, aż skrawki będą czyste. Szkiełka należy suszyć przez co najmniej 15 minut w temperaturze 60 °C lub przez noc w temperaturze pokojowej, a następnie przykryć sekcje szkiełkiem nakrywkowym przy użyciu zwykłego środka montażowego. Natychmiast sprawdź zamontowane szkiełka lub przechowuj w temperaturze pokojowej.
- Zbadaj pod mikroskopem świetlnym. Soczewka immersyjna z olejkiem 100X jest zalecana do szczegółowych obrazów używanych do obliczania współczynników g.