Barwienie czerwoną polaryzacją Picrosiriusa: technika wykrywania zwłóknienia w skrawkach tkanki serca za pomocą mikroskopii jasnego pola

Streszczenie

Źródło: Ku, H. C. et al., Model przebudowy serca poprzez zwężenie aorty brzusznej u szczurów. J. Vis. Exp. (2016).

Ten film opisuje czerwone zabarwienie tkanek zwłóknieniowych metodą picrosiriusa w celu wykrycia nadmiernego odkładania się kolagenu w skrawkach tkanki zwłóknistej . Technika barwienia pomaga ocenić ekspresję kolagenu w chorobach tkanki łącznej.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Kwantyfikacja zwłóknienia tkanek

1. Umieść tkankę serca utrwaloną paraformaldehydem na urządzeniu do cięcia tkanek i wytnij odcinki o grubości 2 mm. Umieść skrawki tkanki w kasecie do zatapiania. Odwodnić tkankę poprzez serię stopniowanych kąpieli alkoholowych (50%, 75%, 95% i 100% przez 1 godzinę każda).
2. Naciekać tkankę ksylenem przez 1 godzinę, a na koniec w wosku przez 1 godzinę. Umieść naciekaną tkankę w kasecie do zatapiania i z....

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Paraformaldehyd	Sigma Aldrich	441244
Czerwony roztwór Picrosiriusa	Księga Abcam	ab150681
Imagequant (Ilościowy	Dynamika molekularna

powiedział: )