Test przesiewowy nematocydów drobnocząsteczkowych: metoda o średniej przepustowości do badania przesiewowego potencjalnych nematocydów przeciwko Ditylenchus dipsaci

Abstract

Źródło: Cammalleri, S. R., et al. Hodowla i badania przesiewowe pasożytniczego nicienia Ditylenchus dipsaci. J. Vis. Exp. (2022).

W tym filmie demonstrujemy test przesiewowy w celu określenia skuteczności małocząsteczkowych nematocydów przeciwko nicieniom. Nematocydy uważa się za skuteczne, jeśli powodują zmniejszenie liczby ruchomych nicieni w próbce po ekspozycji.

Protocol

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny komitet ds. opieki nad zwierzętami oraz komisję weterynaryjną JoVE

.

1. Badanie in vitro małych cząsteczek

1. Przygotuj płytki testowe, wykonując poniższe czynności.
   1. Wlać autoklawowaną wodę destylowaną do sterylnego koryta i za pomocą pipety wielokanałowej dozować 40 μl wody destylowanej z koryta do każdej studzienki 96-dołkowej płytki z płaskim dnem.
2. Przygotuj narzędzie do przypinania i dodaj chemikalia.
   1. Ustaw tace na kołki (patrz tabela materiałów) w pobliżu pł....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Zlewka 50 ml	Pyrex	CLS100050
Płytka 96-dołkowa	Sarstedt	Numer katalogowy: 83.3924
folia aluminiowa	Alcan Plus
Zakres preparacyjny	Księga Leica	Leica MZ75
Dmso	Sigma-Aldrich	472301-500ML
szkiełko szklane	Magna	60-1200
Niestrzępiąca się bibuła	V&P Scientific	VP 522-100
Końcówki do pipet o niskiej retencji (200 uL)	SIŁA LABORATORYJNA	Numer katalogowy: 1159M44
Pipeta wielokanałowa	Badania Eppendorf plus	3125000036
NaOH	Sigma-Aldrich	S8045-500G
parafilm	Bemis	PM-996 (wersja angielska)
Roztwory do czyszczenia szpilek	V&P Scientific	VP110A
Pinner	V&P Scientific	VP381N
Tace do płukania Pinner	V&P Scientific	VP 421
Zbiornik na odczynnik z pokrywką do pipet wielokanałowych	Sigma-Aldrich	BR703459
inkubator z wytrząsaniem	Naukowy Nowy Brunszwik	Formularz I26