Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
712 wyświetleń
⸱
8 lipca 2025
Źródło: Stefani, S. P., et al. Aplikacja szumu stochastycznego do oceny wrażliwości neuronów jądra przedsionkowego przyśrodkowego in vitro. J. Vis. Exp. (2019).
Ten film demonstruje protokół polegający na zastosowaniu podprogowych prądów szumu do neuronów jądra przedsionkowego przyśrodkowego za pomocą techniki patch-clamp dla całej komórki w celu zbadania wpływu prądów szumu na wrażliwość neuronów na bodźce elektryczne.
Wszystkie procedury związane z pobieraniem próbek zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi instytutu IRB.
1. Zwierzęta
UWAGA: Myszy uzyskano z Australijskiego Centrum Gryzoni (ARC; Perth, Australia) i odbyło się w Medical Foundation Building Animal Facility na Uniwersytecie w Sydney.
2. Przygotowanie roztworów
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Rysunek 1: Obiektywne określenie progu 12 pA. Szybkości wyzwalania dla mniej niż 12 pA (3 i 6 pA) i więcej niż 12 pA (18 i 24 pA) zostały zebrane i uśrednione. Średnie te zostały następnie przeanalizowane przy użyciu ANOVA i istotności statystycznej między pozorem a >12 pA oraz między <12 pA a >12 pA. *p < 0,05.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| CaCl2 | Scharlau | CA01951000 | Używany do ACSF i sACSF |
| D-(+)-glukoza | Sigma | Kontroler G8270 | Używany do ACSF i sACSF |
| EGTA (EGTA) | Sigma | E0396-25G | Używany do roztworu wewnątrzkomórkowego na bazie K |
| HEPESY | Sigma | Zobacz materiał H3375-25G | Używany do roztworu wewnątrzkomórkowego na bazie K |
| Kcl | Zaopatrzenie w chem-supply | PA054-500G | Stosowany do ACSF, sACSF i roztworu wewnątrzkomórkowego |
| K-glukonian | Sigma | Zobacz materiał P1847-100G | Używany do roztworu wewnątrzkomórkowego na bazie K |
| Mg-ATP (Mg-ATP) | Sigma | A9187-500MG | Używany do roztworu wewnątrzkomórkowego na bazie K |
| MgCl | Zaopatrzenie w chem-supply | MA00360500 | Używany do ACSF i sACSF |
| Na3-GTP | Sigma | G8877-100MG | Używany do roztworu wewnątrzkomórkowego na bazie K |
| Zawartość NaCl | Zaopatrzenie w chem-supply | SO02270500 | Stosować do ACSF i roztworu wewnątrzkomórkowego |
| NaH2PO4.2H 2O | Ajax | AJA471-500G | Używany do ACSF i sACSF |
| NaHCO3 | Sigma | S5761-1KG | Używany do ACSF i sACSF |
| sacharoza | Zaopatrzenie w chem-supply | SA030-500G | Używany do sACSF |
| Izofluran | Henryk Schein | 1169567762 | Służy do znieczulania myszy |
| sprzęt | |||
| Kapilary ze szkła borokrzemianowego | Instrumenty Warnera | GC150T-7.5 | 1,5 mm średnica zewnętrzna, średnica wewnętrzna 1,16 mm, 7,5 cm długość |
| Oprogramowanie do akwizycji danych | Aksograf | Używany do elektrofizjologii i analizy | |
| Friedmen-Pearson Rongeurs | Światowe instrumenty precyzyjne | Numer katalogowy: 14089 | Służy do preparacji |
| Ściągacz do mikropipet | Narishige powiedział: | Zobacz materiał PP-830 | Używany do mikropipet |
| Wzmacniacz wielozaciskowy | Instrumenty firmy Axon | 700 mld | Używany do elektrofizjologii |
| pH-metr | Sper naukowy | 860033 | Używany do rozwiązania wewnętrznego |
| Nożyczki o standardowym wzorze | Certyfikat FST | Numer katalogowy 14028-10 | Służy do preparacji |
| Mikromanipulator Suttera | Sutter | Szybkostrzelny silnik MP-225/M | Używany do elektrofizjologii |
| Mikroskop pionowy | Olympus | BX51WI | Używany do elektrofizjologii |
| Wibratomizm | Księga Leica | Zobacz materiał VT1200 | Służy do krojenia tkanki mózgowej |
