Artykuł metodologiczny

Wykorzystanie matryc wieloelektrodowych do pomiaru fizjologii synaptycznej w sferach kokultury 3D

8 lipca 2025

W tym artykule

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Cvetkovic, C., et al. Modelowanie mikroukładów synaptycznych z kokulturami 3D astrocytów i neuronów z ludzkich pluripotencjalnych komórek macierzystych. J. Vis. Exp. (2018)

Ten film demonstruje procedurę użycia matrycy wieloelektrodowej (MEA) do pomiaru fizjologii synaptycznej w sferach kokultury 3D. Metoda ta pozwala zrozumieć dynamikę sieci neuronowych i aktywność impulsów sieci synaptycznych w sferach 3D.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pomiar żywej fizjologii synaptycznej za pomocą matryc wieloelektrodowych (MEA)

1. Przygotuj MEA do hodowli komórkowej.

  1. Oczyść powierzchnię każdego MEA 1 ml detergentu przez 1 godzinę. Spłucz sterylną wodą dejonizowaną (DI), spłucz 70% etanolem w celu sterylizacji, a następnie wysusz na powietrzu w komorze bezpieczeństwa biologicznego w świetle UV.
    nuta: MEA mogą być przechowywane w wodzie demineralizowanej w temperaturze 4 °C w sterylnych warunkach do czasu użycia.
  2. Przygotować roztwór poliornityny (PLO) o stężeniu 0,5 mg/ml, rozpuszczając 50 mg PLO w 100 ml buforu kwasu borowego....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Rysunek 1: Reprezentatywna fizjologia synaptyczna na żywo sfer nerwowych na matrycach wieloelektrodowych (MEA). (A, A') MEA są wykorzystywane do pomiaru żywej fizjologii synaptycznej sfer nerwowych. Kule iNeurons (A) lub kokultury iNeurons i hAstros (A') mogą być hodowane na powierzchniach MEA za pomocą substratów naśladujących ECM (patrz krok 4.1). (B, B') Wykresy .......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
DMEM/F12Rybak termicznyNumer katalogowy: 10565-042Z suplementem GlutaMAX
Anty/antyRybak termiczny15240062
B27Rybak termiczny17504044Dodatek dla mediów
heparynaSigmaZobacz materiał H3149-50KUStężenie robocze: 2 mg/ml
Matrigel membrana matrycowaCorningNumer telefonu 354230Rozwiązanie do powlekania ECM. Stężenie robocze: 80 ug/ml. Przygotuj na lodzie i upewnij się, że pipety, probówki i media są wstępnie schłodzone.
System MEA 2100Systemy wielokanałoweMEA2100
N2Rybak termiczny17502048Dodatek dla mediów
Poli-l-ornityna (PLO)SigmaZobacz materiał P3655-100MGStężenie robocze: 0,5 mg/ml

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Macierz wieloelektrodowa3D sfery kokulturowedynamika sieci neuronalnychpowlekanie macierz zewn trzkom rkowtraktowanie poliornityng owica z kontrol temperaturyspontaniczna aktywno elektrycznakomunikacja w z czach neuronalnychludzkie pluripotencjalne kom rki macierzyste

Powiązane artykuły