Elektrofizjologiczne zapisy in vivo aktywności mózgu z wielu miejsc u szczurów

Streszczenie

Źródło: Haumesser, J. K., et al. Ostre elektrofizjologiczne zapisy in vivo lokalnych potencjałów pola i aktywności wielojednostkowej ze szlaku hiperbezpośredniego u znieczulonych szczurów. J. Vis. Exp.(2017).

Ten film demonstruje szczegółową procedurę przygotowania znieczulonego szczura do elektrofizjologicznych zapisów aktywności mózgu z wielu miejsc. Skóra głowy jest preparowana w celu uzyskania dostępu do czaszki, a otwory są wiercone w precyzyjnych miejscach, aby zainstalować i zabezpieczyć elektrody. Elektrody wolframowe są następnie umieszczane w docelowym miejscu w celu zarejestrowania danych.

Protokół

Wszystkie procedury dotyczące modeli zwierzęcych zostały sprawdzone przez lokalny instytucjonalny komitet opieki nad zwierzętami oraz weterynaryjną komisję rewizyjną JoVE.

1. Chirurgia

1. Do zapisów elektrofizjologicznych użyj uretanu (UWAGA) do znieczulenia.
   ostrożność: Uretan jest toksyczny i rakotwórczy, dlatego zawsze należy przestrzegać przepisów bezpieczeństwa i karty charakterystyki podanej przez producenta substancji.
2. Przygotować roztwór 200 mg/ml uretanu w 0,9% roztworze soli fizjologicznej chlorku sodu (NaCl).
3. Podawać dootrzewnowo (IP) łącznie 1,3 g/kg masy ciał....

Wyniki

Rysunek 1: Charakterystyczna aktywność wielojednostkowa z trajektorii elektrody grzbietowo-brzusznej ukierunkowanej na STN. (A) Wielojednostkowe zapisy brzusznego tylno-przyśrodkowego jądra wzgórza (VPM), zona incerta (ZI), jądra podwzgórzowego (STN) i istoty czarnej pars reticularis (SNr). VPM wykazuje rzadkie i nieregularnie rozmieszczone skoki o wysokiej amplitudzie. Ten wzór skoków ustaje, gdy z.......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Niestandardowe elektrody zewnątrzoponowe Ag/AgCl	Goodfellow GmbH D-61213 Bad Nauheim, Niemcy info@goodfellow.com	Identyfikator produktu AG005127 dla drutu 99,99% srebrnego	Elektrody Ag/AgCl pozwolą na uzyskanie lepszej jakości sygnału, ale mogą być używane tylko w ostrych eksperymentach. Możliwa wymiana: Elektrody ze stali nierdzewnej
Uchwyt stereotaktyczny z blokiem akrylowym	David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, Stany Zjednoczone	ID produktu: Model 1770 Standardowy uchwyt elektrody	Upewnij się, że blok akrylowy ma wgłębienia, które pasują do ustawienia elektrod dla żądanego celu. Bloki akrylowe można łatwo modyfikować za pomocą pilnika, aby uzyskać pożądaną konfigurację. Możliwa wymiana: Samodzielnie skonstruowane uchwyty elektrod
Elektrody mikrodrutowe wolframowe o impedancji 1,5 MΩ	Microprobes.com 18247-D Flower Hill Way Gaithersburg, Maryland, 20879 Stany Zjednoczone	ID produktu: WE3ST31.5A5-250um	1,5 MΩ jest niezbędne do jednoczesnego nagrywania MUA i LFP. Możliwa wymiana: Można zastosować mikroelektrody z różnych materiałów. Elektrody muszą być proste, wytrzymałe i jak najcieńsze.
Narzędzie do wyrównywania szczurów	David Kopf Instruments, 7324 Elmo Street, Tujunga, CA 91042, Stany Zjednoczone	Identyfikator produktu: Model 944 Narzędzie do wyrównywania szczurów	Pozwala na dokładną orientację mózgu w celu dopasowania do atlasów stereotaktycznych. Możliwa zamiana: Uchwyt stereotaktyczny z kaniulą
Dwuskładnikowy akryl dentystyczny	Associated Dental Products Ltd. Kemdent Works, Purton, Swindon Wiltshire, SN5 4HT, Wielka Brytania	Simplex Rapid Powder Clear 225g, Kod produktu: ACR803; Simplex Rapid Liquid 150ml, Kod produktu: ACR920	W zależności od zastosowanych elektrod, superglue może być łatwą alternatywą, jeśli elektrody są małe i lekkie. Możliwa zamiana: Superglue (na bazie cyjanoakrylanu)
Klatka Faradaya	Samodzielna budowa		Odpowiednia klatka Faradaya będzie najlepszą ochroną przed artefaktami elektromagnetycznymi, ale wszystko, co można uformować w kształt pudełka lub nałożyć na ramę i jest wykonane z materiału przewodzącego, może pomóc. Możliwa zamiana: Folia aluminiowa lub siatka miedziana
Konfiguracja elektrofizjologiczna z oprogramowaniem do nagrywania i możliwością sortowania skoków online	System akwizycji danych neuronowych OmniPlex® Plexon Inc 6500 Greenville Avenue, Apartament 700 Dallas, Teksas 75206 USA		Oprogramowanie do sortowania offline jest potencjalną alternatywą, wiele skryptów i programów można znaleźć za darmo w społeczności open source.