Monitorowanie kory mózgowej za pomocą układu wieloelektrodowego w odpowiedzi na czynniki wywołujące napady

Abstract

Źródło: Lu, H. C., et al. Stymulacja prądem stałym i zapis wieloelektrodowy aktywności podobnej do napadu w przygotowaniu wycinków mózgu myszy. J. Vis. Exp. (2016).

W tym filmie badane są efekty przezczaszkowej stymulacji prądem stałym (tDCS) na wycinki mózgu zawierające przednią korę obręczy (ACC) i obszary wzgórza, używając matrycy wieloelektrodowej (MEA) do pomiaru sygnałów elektrycznych. Dostarczając impulsy elektryczne i podając leki wywołujące napady, badanie bada odpowiedź ACC na napady.

Protocol

Wszystkie procedury dotyczące próbek zwierzęcych zostały sprawdzone i zatwierdzone przez odpowiednią komisję ds. oceny etycznej zwierząt.

1. Przygotowanie eksperymentalnego roztworu i sprzętu do nagrywania MEA (Multielectrode Array)

1. Przygotować sztuczny płyn mózgowo-rdzeniowy (aCSF; 124 mM NaCl, 4,4 mM KCl, 1 mM NaH₂PO₃, 2 mM MgSO₄, 2 mM CaCl₂, 25 mM NaHCO₃ i 10 mM glukozy, pęcherzykowy z 95% O₂ i 5% CO_{2 ).}
2. Użyj dwóch typów sond MEA: 6 x 10 płaskich MEA i 8 x 8 MEA. Pierwsza sonda obejmuje obszar obejmujący korę, prążkowie i w....

Results

Rysunek 1: Przygotowanie plastra talamocingulate i konfiguracji systemu rejestracji MEA. (a) Procedura plastrów MT-ACC (a) Usunąć mózg i (b) przenieść do chłodnego natlenionego aCSF. (c) Wykonaj dwa cięcia przystrzałkowe od linii środkowej. (d) Widok z boku na przyśrodkową część bloku mózgowego. (e) Wykonaj dwa ukośne brzuszne nacięcia bloku mózgu. (f) Przyklej blok mózgowy do ustawionej pod kątem p.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Izofluran	Korporacja Produktów Halowęglowych	NDC 12164-002-25	4 proc
aCSF (całkowita:1 L):
D(+)-Glukoza	Merck	1.08337.1000	10 mM
Wodorowęglan sodu	Merck	1.06329.0500	25 mM
chlorek sodu	Merck	Numer katalogowy: 1.06404.1000	124 mM
(+)-L-askorbinian sodu, >=98%	Sigma	A4034-100G	0,15 g/2 c.c
Siarczan magnezu, bezwodny, ReagentPlus	Sigma	Zobacz materiał M7506-500G	2 mM
Chlorek wapnia dwuwodny	Merck	1.02382.1000	2 mM
Diwodorofosforan sodu jednowodny	Merck	1.06346.1000	1 mM
Chlorek potasu	May & Baker Ltd Dagenham, Anglia	Zobacz materiał MS 7616	4,4 mln
(+)-Bicuculline	TOCRIS	130	5 μM w aCSF
4-aminopirydyna	TOCRIS	940	250 μM w CSF
Wibratomizm	Wibratomizm	Seria 1000	Krojenie bloków na plastry o grubości 500 μm
Sondy wieloelektrodowe (MEA): 6 x 10 płaskie MEA	Systemy wielokanałowe	60MEA500/30iR-Ti-pr MEAS 6x10	średnica elektrody, 30 μm; rozstaw elektrod, 500 μm; impedancja, 50 kΩ przy 200 Hz
Sondy wieloelektrodowe (MEA): 8 x 8 MEA	Ayanda Biosystems	60MEA200/10iR-Ti-pr MEAS 8x8	elektroda piramidalna; średnica, 40 μm; wysokość końcówki, 50 μm; rozstaw elektrod: 200 μm; impedancja, 1 000 kΩ przy 200 Hz
Zastosowano 60-kanałowy wzmacniacz z filtrem pasmowo-przepustowym ustawionym w zakresie od 0,1 Hz do 3 kHz przy 1200-krotnym wzmocnieniu	Systemy wielokanałowe	MEA-1060-BC
Oprogramowanie MC Rack z częstotliwością próbkowania 10 KHz	Systemy wielokanałowe		Oprogramowanie do zbierania i rejestrowania danych
sterowanie generatorem impulsów	Systemy wielokanałowe	Zobacz materiał STG 1002
Zestawy kotwiące i dociski Slice	Instrumenty Warnera	SHD-26H/10; WI64-0250
Pompa perystaltyczna-minipuls3	Gilsom powiedział:	MINIPULS3	Szybkość perfuzji: 8 ml/min
Izolowany stymulator	Systemy A-M	nr wzoru 2100	natężenie ±350 μA, czas trwania 200 μsec
Elektroda	Systemy A-M	Numer katalogowy: 575300	umieszczony we wzgórzu