Method Article

Stymulacja korzeni nerwów słuchowych i nagrania prądu postsynaptycznego w klinie mózgu myszy

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Źródło: Fischl, M. J., et al. In Vitro Wedge Slice Preparation for Immicking In Vivo Neuronal Circuit Connectivity. J. Vis. Exp.(2020)

Ten film demonstruje protokół stymulacji korzenia nerwu słuchowego i rejestrowania prądów postsynaptycznych w przyśrodkowych neuronach olivocochlear w wycinkach klina mózgu myszy.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury dotyczące próbek zwierzęcych zostały sprawdzone i zatwierdzone przez odpowiednią komisję ds. oceny etycznej zwierząt.

1. Konfiguracja i rejestracja elektrofizjologii

  1. Umieść plasterek klinowy w komorze nagrywającej i zabezpiecz plasterek harfą lub systemem stabilizującym. Perfaktorować tkankę w sposób ciągły z szybkością 7-10 ml/min ciepłym (35 °C) ACSF z bąbelkami karbogenu.
  2. Zidentyfikuj genetycznie znakowane przyśrodkowe neurony MOC olivocochlear w jądrze brzusznym ciała trapezoidalnego VNTB za pomocą epifluorescencji z filtrami emisyjnymi 561 nm do nagrań typu patch-clamp. Odwróć ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Nie stwierdzono konfliktu interesów.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Pionowy mikroskop konfokalny A1RInstrumenty firmy NikonMikroskop elektrofizjologiczny i obrazowy, może to być dowolny mikroskop zgodny z elektrofizjologią
Elektroda ze szkła borokrzemianowego z żarnikiem o średnicy zewnętrznej 1,5 mm, średnica wewnętrzna 1,1 mm, długość 10 cmInstrument SutteraZobacz materiał BF150-110-10 Zobacz materiał BF150-110Szkło do pipet z mocowaniem punktowym
Wypełniacz elektrod MicroFilWskaźnik WPIZobacz materiał CMF20GNapełniacz do pipet z elektrodą krosową
Podgrzewacz roztworu w liniiWarner Instruments (GSAdvantage)Zobacz materiał SH-27BGrzałka systemu perfuzyjnego Slice
Systemy wielomikromanipulacyjneInstrumenty SutteraMPC-200 z MP285Mikromanipulatory do umieszczania elektrod krosowych i elektrod stymulacyjnych
Ściągacz do pipet poziomych P-1000 do mikropipet szklanychInstrumenty SutterFG-P1000Ściągacz do pipet z zaciskiem krosowym
Wzmacniacz patch-clamp i oprogramowanieHEKA powiedział:EPC-10 / Patchmaster NastępnyMoże to być dowolny wzmacniacz / oprogramowanie
Komora nagraniowaInstrumenty WarneraKontroler RC26GPlastr "kąpiel" podczas nagrywania
Harfa komorowa nagraniowaInstrumenty Warnera640253Stabilizuje przekrój podczas rejestracji elektrofizjologicznej
Komora inkubacyjna SliceBudowa niestandardowaPodgrzewana, natleniona komora przetrzymywania plastrów podczas rekonwalescencji po krojeniu
Jednostka izolacji bodźcówA.M.P.I.Iso-Flex (Izo-ElastycznyJednostka izolacji bodźców do elektrofizjologii
Strzykawka 60CCFischer Scientific (centra handlowe)Numer katalogowy: 14-820-11Elektrofizjologia obchodzenie się z płynem perfuzyjnym
Regulator temperaturyWarner Instruments (GSAdvantage)TC-324CRegulator temperatury systemu perfuzji Slice
Rurka 1/8 OD 1/16 IDFischer Scientific (centra handlowe)14-171-129Elektrofizjologia obchodzenie się z płynem perfuzyjnym
Koncentryczna mikroelektroda bipolarna szarpniętaWskaźnik WPITM33CCINSElektroda stymulująca do elektrofizjologii
)

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Auditory Nerve RootPostsynaptic Current RecordingsMouse Brain Wedge SliceMedial Olivocochlear NeuronsPatch Clamp ElectrophysiologyElectrical StimulationExcitatory Inhibitory SignalsCochlear Nucleus CellsWhole Cell ConfigurationEpifluorescence Microscopy

Related Articles