$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Wnętrze naszego jelita jest zamieszkane przez ogromną liczbę bakterii komensalnych. Powierzchnia błony śluzowej przewodu pokarmowego jest stale narażona na ich działanie, a czasami na patogeny. Tkanka limfatyczna związana z jelitami (GALT) odgrywa kluczową rolę w indukcji odpowiedzi immunologicznej błony śluzowej na te drobnoustroje1, 2. Aby zainicjować odpowiedź immunologiczną błony śluzowej, antygeny błony śluzowej muszą zostać przetransportowane ze światła jelita przez barierę nabłonkową do zorganizowanych pęcherzyków limfatycznych, takich jak plastry Peyera. W tej transcytozie antygenowej pośredniczą wyspecjalizowane nabłonkowe komórki M3, 4. Komórki M to atypowe komórki nabłonkowe, które aktywnie fagocytozują makrocząsteczki i drobnoustroje. W przeciwieństwie do komórek dendrytycznych (DC) i makrofagów, które kierują antygeny do lizosomów w celu degradacji, komórki M głównie transcytozują zinternalizowane antygeny. Ta energiczna transcytoza makromolekularna przez komórki M dostarcza antygen do leżących pod spodem zorganizowanych pęcherzyków limfoidalnych i uważa się, że jest niezbędna do zainicjowania specyficznych dla antygenu odpowiedzi immunologicznych błony śluzowej. Jednak mechanizmy molekularne promujące ten wychwyt antygenu przez komórki M są w dużej mierze nieznane. Wcześniej informowaliśmy, że glikoproteina 2 (Gp2), specyficznie ulegająca ekspresji na wierzchołkowej błonie plazmatycznej komórek M wśród enterocytów, służy jako receptor transcytotyczny dla podzbioru enterobakterii komensalnych i patogennych, w tym Escherichia coli i Salmonella enterica serowar Typhimurium (S. Typhimurium), poprzez rozpoznawanie FimH, składnika pilusów typu I na zewnętrznej błonie bakteryjnej 5. W tym miejscu przedstawiamy metodę zastosowania mysiego testu pętli jelitowej z łatą Peyera w celu oceny wychwytu bakteryjnego przez limfocyty M. Metoda ta jest ulepszoną wersją testu pętli jelitowej myszy opisanego wcześniej 6, 7. Poprawione punkty są następujące: 1. Izofluran był stosowany jako środek znieczulający. 2. Założono około 1 cm podwiązaną pętlę jelitową wraz z plastrem Peyera. 3. Bakterie pobrane przez komórki M znakowano fluorescencyjnie za pomocą odczynnika do znakowania fluorescencji lub przez nadekspresję białka fluorescencyjnego, takiego jak białko zielonej fluorescencji (GFP). 4. Limfocyty M w nabłonku związanym z pęcherzykami pokrywającym plaster Peyera wykryto za pomocą barwienia immunologicznego całej góry z przeciwciałem anty Gp2. 5. Fluorescencyjną transcytozę bakteryjną przez komórki M obserwowano za pomocą konfokalnej analizy mikroskopowej. Test pętli jelitowej z łatą Peyera u myszy może dostarczyć odpowiedzi, jakiego rodzaju bakterie komensalne lub chorobotwórcze są transcytozowane przez komórki M i może doprowadzić nas do zrozumienia molekularnego mechanizmu stymulacji układu odpornościowego błony śluzowej przez komórki M.