Ósmy numer JoVE skupia się na modelowaniu komórek i technologiach mikroprzepływowych wykorzystywanych w produkcji licznych BioMEMS (Biologicznych Systemów Mikroelektromechanicznych) z zastosowaniami od wysokoprzepustowych badań przesiewowych leków do podstaw neuronauki.
Szczególnie widoczna wśród technologii umożliwiających produkcję BioMEMS jest miękka litografia, która polega na formowaniu tych miniaturowych urządzeń z organicznego polimeru polidimetylosiloksanu (PDMS). Laboratorium Folcha na Uniwersytecie Waszyngtońskim w Seattle <a href="https://www.jove.com/video/296"> demonstruje produkcję mieszalnika równoległego</a> – urządzenia mikroprzepływowego umożliwiającego naukowcom szybkie poddanie komórek działaniu różnych stężeń roztworów za pomocą sterowanych komputerowo mikrozaworów wykonanych z cienkiego arkusza PDMS. Proces produkcji mikrofabrykowanych detektorów po macierzy (mPADs) <a href="https://www.jove.com/video/296"></a> jest opisany przez laboratorium Chen na Uniwersytecie Pensylwanii, które następnie stosuje ten system do badań sił mechanicznych na poziomie pojedynczej komórki, mierzących kurczliwość komórek pod wpływem stymulacji surowicy.
Urządzenia mikrofludyczne stanowią podstawę do rozwoju nowych narzędzi diagnostycznych dla HIV, raka i innych chorób, gdzie precyzyjne i opłacalne wykrywanie rzadkich typów komórek jest bardzo ważne. Laboratorium tonera w Massachusetts General Hospital demonstruje <a href="https://www.jove.com/video/319">proces produkcji urządzenia mikroprzepływowego</a> do wychwytywania i analizy określonych populacji komórek krwi, takich jak granulocyty. Zastosowanie tej technologii do analizy immunofluorescencyjnej komórek CD4 + <a href="https://www.jove.com/video/315"></a> wykazuje również laboratorium Demirci (Brigham and Women's Hospital).
Technologie tworzenia wzorców komórkowych ułatwiają rozwój nowych podejść do inżynierii tkankowej. Laboratorium Demirci opisuje jedną z takich technologii opartą na enkapsulacji i wyrzucaniu komórek <a href="https://www.jove.com/video/316">.</a> Inny został zademonstrowany przez laboratorium Voldmana (MIT) i pozwala na <a href="https://www.jove.com/video/318">mikromanipulację różnicowaniem embrionalnych komórek macierzystych (ES).</a>
Obecnie metody stosowane do stosowania neuroprzekaźników na wycinkach mózgu ograniczają się do globalnego nakładania ich na cały wycinek, co nie naśladuje wzorców stymulacji zwykle wywoływanych in vivo. Grupa Eddington z University of Illinois w Chicago dzieli się swoją techniką <a href="https://www.jove.com/video/302"> do skonstruowania prototypowego urządzenia Brain Slice Device</a>, które pozwoli na precyzyjne czasoprzestrzenne zastosowanie neuroprzekaźników do wycinków mózgu.   Być może najbardziej użyteczną cechą tego urządzenia jest fakt, że można je zintegrować ze standardowymi komorami perfuzyjnymi powszechnie stosowanymi w metodologii zapisu warstw, co pozwoli na szybkie wdrożenie w pracowniach elektrofizjologii. Jeon Lab (UC Irvine) przeprowadza procedurę dysocjacji kory <a href="https://www.jove.com/video/305"> płodowej kory szczura</a> i ładowania neuronów korowych do urządzenia mikroprzepływowego zaprojektowanego do płynnego izolowania somy neuronów i aksonów.  Procedura wykonywania aksotomii (lub cięcia aksonów) jest również zilustrowana.
Podstawowe protokoły w tym wydaniu koncentrują się na szeroko stosowanych technikach, takich jak <a href="https://www.jove.com/video/308">immunohistochemia na skrawkach parafiny</a> i <a href="https://www.jove.com/video/309">mikrodysekcja laserowa,</a> a także podstawowe techniki ograniczone do dyscyplin takich jak immunologia i <a href="https://www.jove.com/video/306">badanie rozwoju piskląt</a>.

JoVE 8. wydanie

W tym artykule

Przedruki i uprawnienia

Tagi