$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Maze-Suite składa się z trzech głównych aplikacji; programu do edycji do budowy środowisk labiryntów (MazeMaker), modułu wizualizacji/renderowania (MazeWalker) i wreszcie narzędzia do analizy i wizualizacji ścieżek (MazeAnalyzer). Poniższe sekcje opisują korzystanie z MazeSuite, a więcej szczegółów można znaleźć w trzech dodatkowych filmach, po jednym dla każdego modułu MazeSuite.
1. Projektowanie labiryntów
Aplikacja MazeMaker w Maze-Suite umożliwia tworzenie trójwymiarowych (3D) środowisk, po prostu rysując je na dwuwymiarowym (2D) płótnie z lotu ptaka. Ściany i podłogi można rysować za pomocą kliknięć myszą w celu wskazania współrzędnych, a użytkownicy mogą importować pliki obiektów 3D lub edytować właściwości elementów w labiryncie, takie jak pozycja, orientacja, kolor, tekstura i światła.
Regiony początkowe i końcowe labiryntu mogą być przypisane oprócz innych kryteriów wyjścia, takich jak limit czasu. Można również wyświetlać oddzielne komunikaty tekstowe, aby poinformować uczestnika o każdym warunku wyjścia. W fazie projektowania labirynty mogą być testowane za pomocą funkcji "szybkiego uruchamiania" w MazeMaker.
W przypadku badań obrazowania funkcjonalnego, uczestnicy są zazwyczaj proszeni o wykonanie serii zadań z powtarzającymi się próbami. Aby ułatwić testowanie powtarzających się prób, MazeMaker może tworzyć pliki z listami labiryntów, które są posortowanymi listami labiryntów i wiadomościami tekstowymi dla sesji eksperymentalnej. Bardzo ważne jest, aby plik z listą labiryntów dla eksperymentu został przygotowany i dokładnie przetestowany pilotażowo przed dniem eksperymentu.
Pobieżny poradnik dotyczący użytkowania i tworzenia środowisk za pomocą MazeMaker znajduje się w 'Dodatkowym filmie II - MazeMaker'.
2. Konfiguracja fNIR i umieszczanie podkładki czujnika fNIR
Przygotowanie pudełka fNIR
- Za skrzynką fNIR znajdują się dwa złącza kablowe. Jedno z gniazd służy do podłączenia USB, a drugie do przewodu zasilającego.
- Podłącz skrzynkę urządową fNIR za pomocą USB do komputera stacjonarnego lub laptopa, który będzie używany do zbierania danych.
- Podłącz zasilacz do urządzenia i włącz przełącznik.
- taśmowy służy do połączenia podkładki czujnika ze skrzynką fNIR.
- W podkładce sensorycznej znajdują się źródła światła (diody LED) i detektory zdjęć.
- Diody LED emitują światło podczerwone o długości fali 730 nm i 850 nm, które jest pochłaniane głównie odpowiednio przez odtlenioną i natlenioną hemoglobinę, a tym samym mogą przenikać przez tkankę biologiczną.
Umieszczanie podkładki sensora
- Poproś uczestnika, aby oderwał włosy od czoła przed umieszczeniem czujnika. Umieść pasek czujnika tuż nad brwiami. Dopasuj środek czujnika do pionowej osi symetrii, która przechodzi również przez nos
- Mocno dociśnij podkładkę czujnika do czoła i użyj klipsa, aby przytrzymać razem z tyłu głowy. Chociaż nie jest to absolutnie konieczne, zaleca się owinięcie głowy lub bandanę tenisową w celu zabezpieczenia podkładki sensorycznej.
- Po umieszczeniu podkładki czujnika na czole przymocuj dwa końce taśmowego do skrzynki fNIR. taśmowe należy podłączać, dopasowując strony "I" i "II" taśmowego do odpowiednich złączy "I" i "II" w urządzeniu.
Uruchamianie oprogramowania COBI Studio do zbierania danych
- Kliknij ikonę Cognitive Optical Brain Imaging (COBI) Studio13 na pulpicie, aby otworzyć okno główne.
- Program będzie zawierał pewne wstępnie ustawione ustawienia do zbierania i wizualizacji danych.
- Ważne jest, aby w razie potrzeby sprawdzić i potwierdzić parametry akwizycji danych i wyzwolenia (synchronizacji znaczników) w oknie ustawień urządzenia.
- COBI Studio może automatycznie nazwać wszystkie powiązane pliki danych, jeśli "Tryb eksperymentu" jest aktywowany za pomocą kreatora "Nowy eksperyment".
- W folderze danych zostaną utworzone 3 typy plików: (*.nir) dla danych fNIR, (*.mrk) dla danych znaczników i (*.txt) dla dziennika sesji eksperymentu.
3. Przeprowadzanie eksperymentu: Renderowanie labiryntów
Device Setting and starting data acquisition fNIR
- Prąd napędu LED określa, jak jasno świeci każda dioda LED. Domyślna wartość prądu napędu LED to 20mA. Wartość ta może ulec zmianie w zależności od pigmentacji skóry i innych cech uczestnika. Sugerowany zakres prądu LED wynosi od 5mA do 20mA
- Domyślna wartość początkowego wzmocnienia dla wszystkich kanałów to 20. Sugerowane wartości wzmocnienia to 1,5,10,15,20.
- Kliknij link "Uruchom bieżące urządzenie" i sprawdź jakość sygnału. Jeśli wartości intensywności surowej pokazane w COBI zbliżają się do 4000 lub są poniżej 1000, kliknij "Zatrzymaj urządzenie" i dostosuj prąd napędu LED i wzmocnienie urządzenia, aż do uzyskania odpowiednich wartości. W warunkach słabego sygnału zwiększ prąd napędu LED przed zwiększeniem wzmocnienia urządzenia. W warunkach nasycenia sygnału zmniejsz wzmocnienie urządzenia przed zmniejszeniem prądu napędu LED. Gdy jakość sygnału będzie akceptowalna, przejdź do kroku 4.
- Rozpocznij linię bazową. Spowoduje to zebranie 10-sekundowych danych i wykorzystanie ich jako punktu odniesienia w zmodyfikowanym równaniu Beera-Lamberta do obliczania zmian stężenia dla hemoglobiny tlenoweji deoksy-8.
- Poczekaj, aż linia bazowa zostanie zakończona (może to potrwać 10-20 sekund)
- Kliknij "Rozpocznij nagrywanie". Spowoduje to rozpoczęcie zapisywania wszystkich danych. Protokół eksperymentu powinien rozpocząć się po tym.
- Eksperymentator może zdecydować się na dodanie ręcznych znaczników w trakcie sesji eksperymentalnej, aby oznaczyć określone zdarzenia, naciskając przyciski "dodaj ręczny znacznik" za pomocą menu ręcznych znaczników znajdującego się w lewym dolnym rogu ekranu.
- Uruchom Labirynt Suite, aby zaprezentować bodźce wizualne.
Używanie MazeWalker do renderowania labiryntów
- Uruchom MazeWalker z menu w Start>Maze Suite>MazeWalker
- Włącz synchronizację znaczników, wybierając opcję "Włącz port szeregowy" z menu w obszarze Zaawansowane>Opcje portu szeregowego. Upewnij się, że wybrano prawidłowy adres portu COM.
- Wybierz plik listy labiryntów (który został utworzony przez program MazeMaker), a także wybierz nazwę nowego pliku dziennika dla tej sesji. Imię i nazwisko lub numer uczestnika można zapisać w polu spacerowicza. Opcjonalnie autolog może być używany do automatycznego zapisywania do pliku dziennika ze znacznikiem czasu zamiast ręcznego określania pliku dziennika.
- Kliknij "Start", aby rozpocząć proces. W zależności od ustawień wideo, protokół może działać w trybie pełnoekranowym lub okienkowym.
4. Wizualizacja ścieżki podmiotu
Korzystając z MazeAnalyzer, badacz może wizualizować labirynt i ścieżkę uczestnika z plików labiryntu i dziennika. Dodatkowo, raport podsumowujący zawierający całkowitą długość ścieżki i czas do ukończenia każdego labiryntu jest tworzony jako pobieżne pomiary behawioralne. Pliki dziennika zawierają informacje z rozdzielczością milisekundową o ścieżce, którą przebył podmiot, a także o wektorze widoku obiektu i interakcjach z obiektami.
Film instruktażowy znajduje się w 'Uzupełniającym filmie I - MazeAnalyzer' i opisuje użycie podstawowej funkcjonalności MazeAnalyzer wraz z metodami tworzenia wskaźników behawioralnych opisanych w sekcji wyników.
5. Przetwarzanie i analiza danych fNIR
Usuwanie szumów jest pierwszym krokiem do przetworzenia danych. Źródła hałasu obejmują: 1) ruchy głowy, 2) sygnały fizjologiczne, takie jak tętno i oddech oraz 3) hałas związany z instrumentami i środowiskiem.
Ruch głowy może spowodować przesunięcie detektorów fNIR i utratę kontaktu ze skórą, narażając je na: 1) światło otoczenia; 2) światło emitowane bezpośrednio ze źródeł fNIR; lub 3) światło odbite od skóry, a nie odbite od tkanki w korze mózgowej. Ten typ artefaktu ruchu jest łatwo rozpoznawalny, ponieważ powoduje nagłe, duże skoki w danych fNIR. Bardziej subtelny artefakt ruchu głowy wynika z wpływu grawitacji na krew mózgową. Szybki ruch głowy może spowodować, że krew będzie przemieszczać się w kierunku (lub od) obszaru, który jest monitorowany, szybko zwiększając (lub zmniejszając) objętość krwi z jednoczesnym zniekształceniem danych. Ponieważ dynamika tego typu artefaktów ruchowych jest wolniejsza niż "pop" diod LED, można je pomylić z rzeczywistą reakcją hemodynamiczną spowodowaną aktywacją mózgu. W związku z tym usunięcie artefaktu ruchu z danych fNIR jest ważnym i niezbędnym krokiem, jeśli fNIR ma być stosowany jako technologia monitorowania mózgu w środowisku naturalnym16.
Sygnały fizjologiczne, takie jak tętno (powyżej 0,5 Hz) i oddychanie (powyżej 0,2 Hz) są w wyższych zakresach częstotliwości niż odpowiedzi hemodynamiczne, dlatego mogą być eliminowane za pomocą liniowego filtra dolnoprzepustowego FIR z częstotliwością graniczną od 0,1 do 0,15 Hz9.
Hałas instrumentu i otoczenia może powstać z powodu światła otoczenia, takiego jak światło dzienne (DC) i światło w pomieszczeniu (60Hz) lub światło z monitora komputerowego (60-75Hz). Sugeruje się, że najlepszym sposobem na wyeliminowanie tego typu szumów jest odpowiednie przygotowanie środowiska eksperymentalnego i akwizycji danych. Analogowy filtr dolnoprzepustowy (filtr antyaliasingowy) został zaimplementowany w skrzynce fNIR w celu wyeliminowania fałdowania szumów o wysokiej częstotliwości w zakresie częstotliwości próbkowania.
Dostępnych jest wiele zaawansowanych algorytmów redukcji szumów, które wykorzystują różne charakterystyki sygnału17-20. Jeśli jednak temat lub sesja mogą zostać wykluczone, jeśli dane są niemożliwe do odzyskania (tj. nasycone).

Rysunek 1. Składowe sygnału fNIR
Surowe sygnały fNIR są pomiarami natężenia światła (patrz Rysunek 1). Mierząc zmiany gęstości optycznej (OD) na dwóch długościach fali, względną zmianę oksy-Hb i deoksy-Hb w czasie można uzyskać za pomocą zmodyfikowanego prawa Beera-Lamberta21-23. OD przy określonej długości fali wejściowej (λ) jest logarytmicznym stosunkiem natężenia światła wejściowego (I in) i natężenia światła wyjściowego (wykrytego) (I out). OD jest również związany ze stężeniem (c) i współczynnikiem ekstynkcji (e) chromoforów, skorygowaną odległością (d) między źródłem światła a detektorem oraz stałym współczynnikiem tłumienia (G).

Mając ten sam Iw dwóch różnych instancjach czasowych i wykryte natężenie światła podczas linii bazowej (odpoczywam) i podczas wykonywania zadania (testuję), różnica w OD dla długości fali λ wynosi

Pomiar średnicy zewnętrznej na dwóch różnych długościach fal daje

Ten zestaw równań może być rozwiązany dla stężeń, jeśli macierz 2x2 jest nieosobliwa. Zazwyczaj wybiera się dwie długości fal i) w zakresie 700-900 nm, gdzie absorpcja oksy-Hb i deoksy-Hb są dominujące w porównaniu z innymi chromoforami tkankowymi, oraz ii) poniżej i powyżej punktu izobestowego (~ 805 nm, gdzie widma absorpcyjne deoksy- i oksy-Hb krzyżują się ze sobą), aby skupić zmiany absorpcji odpowiednio na deoksy-Hb lub oksy-Hb. Instrument fNIR użyty w tym badaniu wykorzystuje długości fal 730 nm i 850 nm.
Na koniec, za pomocą znaczników (sygnałów synchronizacji czasu), oznaczane są okresy linii bazowej/odpoczynku i zadań, a wybrane cechy z danych natlenienia są wyodrębniane, takie jak wartości średnie, minimalne i maksymalne. COBI Studio zapisuje zarówno surowe pomiary natężenia światła, jak i obliczone wartości natlenienia (przy użyciu zmodyfikowanego prawa Lamberta Piwa) do plików tekstowych, a także plików synchronizacji czasu (markerów). COBI Studio może być również używany do stosowania metod usuwania szumów, takich jak filtry dolnoprzepustowe lub pasmowo-przepustowe o skończonej odpowiedzi impulsowej. Pliki wyjściowe można eksportować do popularnych programów analitycznych, takich jak (Matlab, Excel, SPM i SPSS) lub dedykowanego oprogramowania analitycznego, takiego jak fnirSoft24 w celu dalszego przetwarzania.
6. Reprezentatywne wyniki:
fNIR Przykłady sygnałów
Rysunki 2-5 wstępnie ustawionych surowych sygnałów fNIR z jednego miejsca pomiarowego z dwoma składowymi długości fali (730nm i 850nm) pokazanymi osobno. Rysunek 2 przedstawia prawidłową i akceptowalną epokę sygnału, podczas gdy rysunki 3 i 4 są niedopuszczalne i należy je odrzucić. Rysunek 5 przedstawia surowy sygnał, który został zanieczyszczony artefaktem ruchu i musi zostać oczyszczony lub wyrzucony.

Rysunek 2. Dobra próbka surowego sygnału fNIR

Rysunek 3. Zła próbka surowego sygnału fNIR, w której kanał 850 nm jest nasycony.

Rysunek 4. Zła próbka surowego sygnału fNIR, w której występuje problem ze sprzętem lub połączeniem kablowym.

Rysunek 5. Zła próbka surowego sygnału fNIR, w której występują artefakty ruchu.
Protokół badania
Oceny uczenia się są najlepiej zilustrowane przez testy zapamiętywania (tj. pamięci) i transferu (np. uogólniania). W naszym badaniu trzy labirynty (labirynt1, labirynt2 i labirynt3) były ćwiczone w fazie akwizycji, w sumie 105 prób każda w ciągu trzech dni. Dwa warunki; losowa kolejność ćwiczeń (RND) i zablokowana kolejność ćwiczeń (BLK) są podsumowane na rysunku 6. Dwóch badanych zgłosiło się na ochotnika do czterodniowego badania. Czwartegodnia przeprowadzono 10 prób retencyjnych dla każdego labiryntu, a labirynty zostały przedstawione w losowej kolejności. Stworzono dwa nowatorskie labirynty (labirynt4 i labirynt5), które miały dodatkowe korytarze oraz różne punkty początkowe i końcowe niż labirynty pierwotnie praktykowane. Badani wykonali dziesięć prób dla każdego z dwóch nowych labiryntów. Labirynty te stanowiły fazę transferu i były prezentowane wszystkim w losowej kolejności. Labirynty fazy transferu zostały wykorzystane do określenia zakresu, w jakim każdy badany był w stanie uogólnić swoją naukę i praktykę za pomocą labiryntów akwizycji.

Rysunek 6. Reprezentatywny zarys protokołu eksperymentu.
Wyniki badania behawioralnego
Poniższe rysunki od 7 do 9 pokazują średnie wartości cech (długość ścieżki, całkowity czas ukończenia i prędkość) badanych w ciągu każdego dnia. Po pierwsze, wyniki z labiryntu1, labiryntu2 i labiryntu3 są wymienione zarówno dla praktyki RND, jak i BLK. Następnie wyświetlane są wyniki labiryntu/labiryntu/labiryntu,5 w celu porównania wyników ćwiczeń losowych i zablokowanych. Wszystkie słupki błędów są błędami standardowymi średniej (SEM).

Rysunek 7. RND ćwiczy podsumowanie wydajności behawioralnej dla zadań akwizycji i zapamiętywania, w tym całkowitą długość ścieżki, całkowity czas ukończenia i średnią prędkość.

Rysunek 8. BLK ćwiczy podsumowanie wydajności behawioralnej dla zadań akwizycji i zapamiętywania, w tym całkowitą długość ścieżki, całkowity czas ukończenia i średnią prędkość.

Rysunek 9. Porównanie wydajności behawioralnej BLK i praktyki RND dla zadań transferowych, w tym całkowita długość ścieżki, całkowity czas ukończenia i średnia prędkość.
Wyniki badania fNIR
Zmiany stężenia hemoglobiny natlenionej w stosunku do linii wyjściowej zostały uśrednione w czasie każdego pojedynczego labiryntu przy użyciu danych znacznikowych otrzymanych od MazeWalker (wskazuje początek i koniec każdego labiryntu). Przyjmuje się, że zmiany stężenia o większej wielkości reprezentują wyższe poziomy regionalnej aktywacji mózgu. Zaobserwowano wyższy poziom aktywacji zarówno podczas zadań związanych z utrzymaniem, jak i przeniesieniem w praktyce BLK w porównaniu z praktyką RND. Podczas zadań transferowych wyższy poziom aktywacji zaobserwowano w praktyce BLK w porównaniu z praktyką RND (patrz rysunek 10).
Dla podmiotu praktyki BLK, próby transferu wymagały wyższej aktywacji w porównaniu do prób retencyjnych. W przypadku osoby ćwiczonej RND poziom aktywacji NIE różnił się dla zadań związanych z przenoszeniem i zatrzymywaniem, w przeciwieństwie do przedmiotu praktyki BLK (patrz rysunek 11).

Rysunek 10. Porównanie średnich zmian stężenia oksy-Hb dla praktyki BLK i RND zarówno dla zadań retencji (po lewej), jak i zadań transferowych (po prawej).

Rysunek 11. Porównanie średnich zmian stężenia oksy-Hb dla zadań związanych z retencją i przenoszeniem zarówno dla praktyki BLK (po lewej), jak i RND (po prawej).