Wrzesień 2011: W tym miesiącu w JoVE

Obrazowanie na żywo aksonów korzenia grzbietowego po kłączotomii

Andrew Skuba¹, B. Timothy Himes^{2, 3}, Young-Jin Son^4
1Temple University, Shriners Hospitals Pediatric Research Center and Department of Anatomy and Cell Biology, ²Medical Research Service, Department of Veterans Affairs Hospital, ³Wydział Neurobiologii i Anatomii, Drexel University College of Medicine, ⁴Shriners Hospitals Pediatric Research Center and Department of Anatomy and Cell Biology, Temple University School of Medicine

Opisano protokół obrazowania in vivo do monitorowania pierwotnych aksonów czuciowych po zmiażdżeniu korzenia grzbietowego. Procedury wykorzystują mikroskopię fluorescencyjną o szerokim polu widzenia i transgeniczne myszy thy1-YFP i umożliwiają wielokrotne obrazowanie regeneracji aksonów powyżej 4 cm w PNS i interakcji aksonów z interfejsem OUN.

Wprowadzenie naprężeń ścinających do badań nad adhezją bakteryjną

Magali Soyer, Guillaume Duménil
Naczynia krwionośne jako cel infekcji, paryskie centrum badań sercowo-naczyniowych, INSERM U970

Podczas procesu infekcji, kluczowym krokiem jest adhezja patogenów z komórkami gospodarza. W większości przypadków ten etap adhezji występuje w obecności naprężeń mechanicznych generowanych przez przepływającą ciecz. Opisujemy technikę, która wprowadza naprężenie ścinające jako ważny parametr w badaniu adhezji bakterii.

Cewnikowanie wspomagane drutem prowadzącym i iniekcja kolorowego barwnika do mapowania naczyniowego bliźniaczych łożysk jednokosmówkowych

Eric B. Jelin¹, Samuel C. Schecter¹, Kelly D. Gonzales¹, Shinjiro Hirose¹, Hanmin Lee¹, Geoffrey A. Machin², Larry Rand³, Vickie A. Feldstein^4
1Oddział Chirurgii Dziecięcej i Płodu, Wydział Chirurgii, Uniwersytet Kalifornijski, San Francisco, ²Wydział Patologii, Uniwersytet Alberty, ³Wydział Położnictwa i Ginekologii, Uniwersytet Kalifornijski, San Francisco, ⁴Wydział Radiologii, Uniwersytet Kalifornijski, San Francisco

Mapowanie naczyniowe łożysk bliźniąt jednokosmówkowych (MC) po urodzeniu dostarcza środków do szczegółowego wykazania połączeń naczyniowych między krążeniami bliźniąt. Uważa się, że brak równowagi tych połączeń odgrywa kluczową rolę w rozwoju powikłań bliźniaczych MC, w tym zespołu transfuzji między bliźniętami.

Dokładna i prosta ocena zespoleń naczyniowych w łożysku jednokosmówkowym przy użyciu kolorowego barwnika

Enrico Lopriore¹, Femke Slaghekke², Johanna M. Middeldorp², Frans J. Klumper², Jan M. przez Lith³, Frans J. Walther¹, Dick Oepkes^2
1Oddział Neonatologii, Oddział Pediatrii, Centrum Medyczne Uniwersytetu w Lejdzie, ²Oddział Terapii Płodu, Oddział Położnictwa, Centrum Medyczne Uniwersytetu w Lejdzie, ³Oddział Położnictwa, Centrum Medyczne Uniwersytetu w Lejdzie

Zespół transfuzji między bliźniętami i sekwencja czerwienicy niedokrwistości bliźniaczej to dwa potencjalnie niszczące problemy w medycynie okołoporodowej. Oba zaburzenia występują tylko u bliźniąt jednokosmówkowych i wynikają z niezrównoważonego przepływu krwi przez zespolenia naczyniowe łożyska. Zapewniamy prosty protokół do dokładnej oceny obecności zespoleń naczyniowych za pomocą kolorowego barwnika iniekcji naczyń łożyskowych po urodzeniu.

Diagnoza ekto- i endopasożytów u szczurów i myszy laboratoryjnych

Christina M. Parkinson¹, Alexandra O'Brien¹, Theresa M. Albers¹, Meredith A. Simon¹, Charles B. Clifford¹, Kathleen R. Pritchett-Corning^{2, 3
1}Usługi diagnostyczne zwierząt badawczych, Charles River, ²Modele i usługi badawcze, Charles River, ³Wydział Medycyny Porównawczej, Uniwersytet Waszyngtoński

Ten artykuł opisuje różne procedury badań przesiewowych szczurów i myszy w celu wykrycia endopasożytnictwa lub ektopasożytnictwa. Zademonstrowanych zostanie kilka testów diagnostycznych, zarówno tych odpowiednich do stosowania na żywych zwierzętach, jak i tych stosowanych po eutanazji zwierzęcia. Dołączone zostaną fotografie pomocne w identyfikacji pasożytów szczurów i myszy.

Autologiczna technologia wysiewu komórek progenitorowych śródbłonka i testowanie biokompatybilności dla urządzeń sercowo-naczyniowych w dużym modelu zwierzęcym

Alexandra E. Jantzen¹, Whitney O. Pas², Shawn M. Gage³, Justin M. Haseltine¹, Lauren J. Galinat¹, Ryan M. Jamiolkowski⁴, Fu-Hsiung Lin³, George A. Truskey¹, Hardean E. Achneck^3
1Wydział Inżynierii Biomedycznej, Uniwersytet Duke'a, ²Szkoła Medyczna, Uniwersytet Duke'a, ³Wydział Chirurgii, Centrum Medyczne Uniwersytetu Duke'a, ⁴Szkoła Medyczna, Uniwersytet Pensylwanii

Opisano metodę wysiewania biomateriałów tytanowych mających kontakt z krwią z komórkami autologicznymi i testowania biokompatybilności. Metoda ta wykorzystuje śródbłonkowe komórki progenitorowe i tytanowe rurki, wysiewane w ciągu kilku minut od chirurgicznego wszczepienia do żył głównych świń. Technikę tę można dostosować do wielu innych wszczepialnych urządzeń biomedycznych.

Wieloparametryczne mapowanie optyczne serca królika z perfuzją Langendorffa

Qing Lou, Wenwen Li, Igor R. Efimov
Wydział Inżynierii Biomedycznej, Uniwersytet Waszyngtoński w St. Louis

Ten artykuł opisuje podstawowe procedury przeprowadzania eksperymentów mapowania optycznego w sercu królika z perfuzją Langendorffa przy użyciu systemu obrazowania panoramicznego oraz metody obrazowania dualnego (napięcie i wapń).

Optyczne mapowanie potencjałów czynnościowych i stanów przejściowych wapnia w sercu myszy

Di Lang, Matthew Sulkin, Qing Lou, Igor R. Efimov
Wydział Inżynierii Biomedycznej, Uniwersytet Waszyngtoński w St. Louis

Ten artykuł szczegółowo opisuje procedurę preparacji, ustawienie instrumentalne i warunki eksperymentalne podczas optycznego mapowania potencjału transbłonowego (Vm) i wewnątrzkomórkowego przejściowego wapnia (CaT) w nienaruszonych izolowanych perfundowanych sercach myszy Langendorffa.

Obrazowanie zdarzeń sygnalizacyjnych za pośrednictwem receptora sprzężonego z białkiem G (GPCR), które kontrolują chemotaksję Dictyostelium discoideum

Xuehua Xu, Sekcja Sygnałowa Chemotaxis Tian Jin
, Laboratorium Immunogenetyki, Narodowy Instytut Alergii i Chorób Zakaźnych, Narodowe Instytuty Zdrowia

Tutaj opisujemy szczegółowe metody obrazowania żywych komórek do badania chemotaksji. Przedstawiamy mikroskopijne metody fluorescencji do monitorowania czasoprzestrzennej dynamiki zdarzeń sygnalizacyjnych w migrujących komórkach. Pomiar zdarzeń sygnalizacyjnych pozwala nam lepiej zrozumieć, w jaki sposób sieć sygnalizacyjna GPCR osiąga gradientowe wykrywanie chemoatraktantów i kontroluje kierunkową migrację komórek eukariotycznych.

Wykorzystanie podejścia porównawczego gatunków do badania neurobiologii reakcji ojcowskich

Catherine L. Franssen¹, Massimo Bardi², Kelly G. Lambert^1
1Wydział Psychologii, Randolph-Macon College, ²Wydział Psychologii, Uniwersytet Marshalla

Podejście porównawcze gatunków pozwala neuronaukowcom behawioralnym badać różne czynniki neurobiologiczne związane z określonymi zachowaniami postrzeganymi jako charakterystyczne dla konkretnego modelu zwierzęcego. Wykorzystując naturalnie występujące różnice w zachowaniu między blisko spokrewnionymi gatunkami, technika ta nie wymaga technik inwazyjnych do manipulowania ekspresją zachowania.