Listopadowe wydanie Journal of Visualized Experiments rozpoczyna się od serii eksperymentów behawioralnych służących do pomiaru zdolności chwytania u naczelnych. Badacze z Uniwersytetu w Fryburgu prezentują cztery zadania polegające na chwytaniu i sięganiu, z których każde obejmuje wspólne etapy komfortowego unieruchomienia zwierzęcia i prawidłowego ustawienia jego głowy. Test tablicy Brinkmana (Brinkman Board) jest wykorzystywany do oceny sięgania po obiekty statyczne, podczas gdy obrotowa tablica Brinkmana (Rotating Brinkman Board) tworzy warunki, w których zwierzęta muszą przewidzieć pozycję obiektu. Test pudełka Brinkmana (Brinkman Box) pozwala badać zręczność w warunkach, w których małpa ma mniej stopni swobody podczas wykonywania zadania chwytania i nie może wykorzystywać wzroku do prowadzenia ruchu. Podczas gdy testy z tablicą i pudełkiem Brinkmana opierają się wyłącznie na analizie wideo uzyskanej podczas eksperymentów, aparat do zadania sięgania do szuflady posiada detektory monitorujące siły chwytu i obciążenia oraz pozycję szuflady, co czyni ten test odpowiednim do pomiaru zarówno siły, jak i zdolności chwytania. Łącznie te cztery testy stanowią potężne narzędzie do oceny kontroli motorycznej w dystalnej części kończyny przedniej; grupa z Fryburga przedstawia dane zarówno z badań nad uszkodzeniami, jak i z eksperymentów mających na celu przetestowanie potencjalnych terapii urazów rdzenia kręgowego.
W sekcji Clinical and Translational Medicine współpracownicy z Division of Surgical Research w szpitalu uniwersyteckim w Zurychu oraz Institute of Laboratory Animal Science na Uniwersytecie w Zurychu wspólnie pracują nad implantacją urządzenia radiotelemetrycznego u myszy, które może być wykorzystywane do pomiarów fizjologicznych u swobodnie poruszających się zwierząt. Urządzenia składają się z dwóch elektrod, które umożliwiają pomiar aktywności biopotencjałowej (EKG, EEG lub EMG) oraz temperatury, a także lekkiego nadajnika radiowego (pasmo 1-200 Hz), który może być implantowany w jamie brzusznej. Stres związany z manipulowaniem zwierzętami oraz anestezja są znanymi czynnikami zakłócającymi, które wpływają na pomiary fizjologiczne, dlatego urządzenia radiotelemetryczne są wygodnym sposobem pozyskiwania danych fizjologicznych od zwierząt w niezakłóconym, naturalnym stanie, a także jednoczesnego pomiaru wielu osobników.
JoVE rozszerza również swoją kolekcję protokołów elektroporacji o metodę wprowadzania makromolekuł do mezenchymy kraniofacjalnej rozwijających się kijank *Xenopus laevis*, opracowaną przez laboratorium Liu w King's College London. Kijanki *Xenopus* są przenoszone do komory elektroporacyjnej, gdzie są wstrzykiwane kwasy nukleinowe, a następnie poddawane elektroporacji, która dostarcza wektory ekspresyjne lub morfolino do rozwijającej się tkanki kraniofacjalnej. Dostarczanie genów do zróżnicowanej chrząstki jest z natury problematyczne, a laboratorium Liu wykazuje, że dzięki elektroporacji morfolino mogą być wprowadzane do tkanek prochrząstkowych i chrzęstnych kijanki *Xenopus* na różnych etapach rozwoju.
W sekcji Bioengineering grupa Zuckermana z Lawrence Berkeley National Laboratory ilustruje swoją metodę syntezy peptoidów – klasy biologicznie aktywnych cząsteczek organicznych przypominających peptydy, lecz posiadających łańcuchy boczne przyłączone do azotu wiązania peptydowego, a nie do węgla alfa, co czyni je odpornymi na proteolizę. Grupa Zuckermana demonstruje syntezę submonomeryczną, w której monomery peptydowe są dodawane sekwencyjnie w reakcjach bromoacetylacji i wypierania bromku, co pozwala na precyzyjną kontrolę długości i składu łańcucha peptoidowego. Ponadto fakt, że synteza odbywa się na żywicy amidowej i jest zatem syntezą w fazie stałej, znacznie upraszcza oczyszczanie zsyntetyzowanych peptoidów. Autorzy pokazują również, jak nowo zsyntetyzowane peptoidy mogą być indukowane do samozgromadzenia w wysoce uporządkowane struktury, zwane nanoarkuszami, które można wizualizować za pomocą fluorescencji i skaningowej mikroskopii elektronowej. Nanoarkusze te mogłyby służyć jako potencjalna platforma dla mimetyków białek i błon.
Później w tym miesiącu JoVE prezentuje w sekcji Immunology and Infection test służący do pomiaru aktywności fagocytycznej w komórkach eksponowanych na próbki przeciwciał klinicznych. Współpracownicy z Massachusetts General Hospital i Dartmouth College pokazują w mikroskopii wideo time-lapse, że komórki THP-1 pochłaniają kuleczki pokryte antygenem związanym z przeciwciałem, oraz przedstawiają metodę cytometrii przepływowej na płytkach do ilościowego określenia zakresu fagocytozy. Autorzy wykorzystują tę metodę do określenia zdolności różnych próbek przeciwciał do indukowania fagocytozy, np. próbek od pacjentów z HIV, zarówno leczonych, jak i nieleczonych terapiami antyretrowirusowymi.
Powyższe podsumowanie treści JoVE w listopadzie stanowi krótki przegląd najważniejszych materiałów w tym miesiącu. Inne godne uwagi artykuły obejmują metody obrazowania na żywo dynamiki cytoszkieletu w komórkach śródbłonka, pomiar przepływu wapnia w kardiomiocytach oraz elektrofizjologię skrawków neuronów powstałych w dorosłym organizmie w opłacie węchowej.