Przenoszenie wirusów roślinnych za pomocą mączlików

Podsumowanie

Poprawa naszego zrozumienia i naszej zdolności do radzenia sobie z wieloma wirusami roślinnymi przenoszonymi przez owady wymaga użycia wektora. Przenoszenie wirusów roślinnych przez owady jest interakcją tritroficzną i jako takie wymaga manipulacji owadami, wirusami i roślinami. Wektory muszą być hodowane w dużych ilościach i manipulowane w taki sposób, aby zapewnić wysokie wskaźniki transmisji na rośliny testowe. Przedstawiono podstawy hodowli i manipulacji mączlikiem, Bemisa tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae), wektorem wirusów roślinnych należących do kilku pojawiających się rodzajów wirusów roślinnych, reprezentujących dużą liczbę wirusów o znaczeniu gospodarczym

.

Streszczenie

Mączliki, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, kompleks morfologicznie niezniszczalnych gatunków⁵, są wektorami wielu wirusów roślinnych. Kilka rodzajów tych wirusów roślinnych przenoszonych przez mączliki (Begomowirus, Carlawirus, Crinivirus, Ipomowirus, Torradowirus) obejmuje kilkaset gatunków pojawiających się i istotnych gospodarczo patogenów ważnych roślin spożywczych i włóknistych (przegląd^9,10,16). Wirusy te nie replikują się w swoim wektorze, ale mimo to są łatwo przenoszone z rośliny na roślinę przez dorosłego mączlika na różne sposoby (przegląd^{przez 2,6,7,9,10,11,17}). W przypadku większości tych wirusów do nabycia i zaszczepienia wymagane jest żerowanie mączlików, podczas gdy w przypadku innych wymagane jest tylko sondowanie. Wiele z tych wirusów nie jest w stanie lub nie może być łatwo przenoszonych w inny sposób. Dlatego utrzymanie kultur wirusów, charakterystyka biologiczna i molekularna (identyfikacja zakresu żywiciela i objawów)^3,13, ekologia^2,12, wymagają, aby wirusy były przenoszone do gospodarzy doświadczalnych za pomocą wektora mączlika. Ponadto opracowanie nowych podejść do zarządzania, takich jak ocena nowych substancji chemicznych¹⁴ lub związków¹⁵, nowe podejścia kulturowe 1 4 i¹⁹ lub selekcja i rozwój odpornych odmian^{7 8 i 18} wymagają wykorzystania mączlików do przenoszenia wirusa. Wykorzystanie przenoszenia wirusów roślinnych przez mączliki do selekcji i rozwoju odpornych odmian w programach hodowlanych jest szczególnie trudne⁷. Skuteczna selekcja i badania przesiewowe pod kątem odporności angażują dużą liczbę roślin i istnieje potrzeba zaszczepienia 100% roślin w celu znalezienia kilku genotypów, które posiadają geny odporności. W badaniach tych wykorzystuje się bardzo dużą liczbę mączlików zjadliwych, często kilka razy w roku.

Opisana tutaj pielęgnacja mączlików może generować setki lub tysiące dorosłych mączlików na roślinach każdego tygodnia, przez cały rok, bez skażenia innymi wirusami roślinnymi. Rośliny wolne zarówno od mączlików, jak i wirusa muszą być produkowane w celu wprowadzenia do kolonii mączlika każdego tygodnia. Kultury mączlików muszą być wolne od patogenów, pasożytów i parazytoidów, które mogą zmniejszać populacje mączlików i/lub zmniejszać skuteczność transmisji wirusa. Kolonie wyprodukowane w opisany sposób mogą być szybko skalowane w celu zwiększenia lub zmniejszenia liczebności populacji w zależności od potrzeb i mogą być dostosowane do preferencji żywieniowych mączlika w oparciu o roślinnego gospodarza wirusa.

Istnieją dwa podstawowe typy kolonii mączlików, które mogą być utrzymywane: kolonia mączlików niewirusowych i wirusowa. Niezwirusiała kolonia składa się z mączlików hodowanych na roślinach wolnych od wirusów i umożliwia cotygodniową dostępność mączlików, które mogą być wykorzystywane do przenoszenia wirusów z różnych kultur. Zjadliwa kolonia mączlików, składająca się z mączlików hodowanych na roślinach zakażonych wirusem, umożliwia tygodniową dostępność mączlików, które nabyły wirusa, pomijając w ten sposób jeden etap procesu przenoszenia wirusa.

Protokół

1. Utrzymanie kolonii mączlików

1. Warunki środowiskowe: Kolonie mączlików powinny być utrzymywane w pomieszczeniu o kontrolowanym wzroście. Kontrola wilgotności względnej, temperatury, fotoperiodu i natężenia światła jest niezbędna do optymalnego wzrostu kolonii (ryc. 1). Temperatura 28 °C, wilgotność względna 30-50% i 14-godzinny fotoperiod stworzą kolonię, która rozwija się od jaja do pojawienia się dorosłego osobnika w ciągu 18 dni (czas ten różni się w zależności od gospodarza rośliny). Wilgotność względna powinna być utrzymywana poniżej 70%, aby zapobiec rozwojowi patogenów owadów i grzybów roślinnych. Należy zmniejszyć dawki nawozów i podlewanie, aby zniechęcić do patogenów grzybowych i gromadzenia się soli. Natężenie światła dla kolonii powinno być dość wysokie. Żarówki fluorescencyjne VHO używane w wystarczającej liczbie, aby wytworzyć około 800-1,000 stóp świec na wysokości baldachimu, są odpowiednie dla większości roślin (tj. bawełny, fasoli zwyczajnej, fasoli, pomidora). Czystość jest niezbędna w kolonii mączlików do utrzymania optymalnych warunków chowu.
2. Klatki kolonijne: Mączliki powinny być trzymane na roślinach w klatkach, a nie swobodnie w pomieszczeniu do wzrostu. Klatki mogą być zbudowane z różnych materiałów, ale muszą zapewniać: wentylację, łatwość dostępu, zdolność do zapobiegania ucieczce lub infiltracji mączlików oraz wystarczającą wielkość, aby utrzymać wystarczającą liczbę roślin, aby wytworzyć potrzebną populację mączlików. Dobre wyniki uzyskano przy użyciu przesiewania organzy i aluminium (pod kątem wytrzymałości), a także przesiewania przeciwko mączlikom (patrz tabela konkretnego sprzętu i materiałów).
3. Przygotowanie roślin kolonijnych: Wybrany gatunek rośliny jest ważnym czynnikiem przy zakładaniu kolonii mączlików. Roślina powinna być w stanie utrzymać dużą populację owadów bez zapadania się. Roślina wybrana do kolonii niezwirusowej powinna być żywicielem dla wirusa lub wirusów, które mają być przenoszone, aby uniknąć zakażenia w kolonii, a jeśli utrzymuje kolonię wirusa, musi być gospodarzem wirusa. Rośliny powinny rosnąć dość szybko, aby umożliwić pojawienie się nowych dorosłych osobników w ciągu 18 dni od wprowadzenia do kolonii, ale nie tak szybko, aby wyrosnąć z klatek w ciągu czterech tygodni. Zalecane są odmiany roślin karłowatych, krzewiastych lub patio, ponieważ często wytwarzają podobną powierzchnię liści do wyższych odmian, ale bez wydłużenia łodygi.
4. Bardzo ważne jest, aby hodować rośliny dla rodziny w szklarniach w klatkach, które wykluczają mączliki i inne owady. Stosowanie roślin zaatakowanych przez mączliki, wciornastki lub roztocza przed ich wejściem do kolonii może spowodować jej upadek. Porażone rośliny mogą również zostać zainfekowane wirusami przenoszonymi przez owady, które będą zakłócać badania nad przenoszeniem wirusa.

2. Założenie kolonii mączlików

1. Rozpocznij kolonię po raz pierwszy, używając czystych mączlików - wolnych od wirusów roślinnych, innych owadów i patogenów owadzich. Można je uzyskać od współpracowników lub w terenie. W przypadku zbioru na polu mączliki powinny być hodowane przez co najmniej 8 tygodni na roślinach niebędących żywicielami wirusa roślinnego i sprawdzać, czy na roślinach nie występują objawy, aby upewnić się, że są wolne od wirusów roślinnych.
2. Tydzień 1: Wprowadź czyste mączliki do pierwszej klatki roślin. Mączliki mogą być wprowadzane przez aspirację znanych liczb lub przez delikatne potrząsanie mączlikami z innej rośliny źródłowej, w zależności od wymagań kolonii. W 1 tygodniu mączliki składają jaja na spodniej stronie powierzchni liści roślin. Przybliżoną wielkość populacji można przewidzieć dla każdego pojawienia się na podstawie liczby dorosłych osobników wykorzystanych do złożenia jaj i średniej liczby jaj złożonych przez samicę mączlika na danej roślinie żywicielskiej.
3. Tydzień 2: Rozpocznij kolejną klatkę, wprowadzając mączliki do nowych roślin żywicielskich w celu złożenia jaj. Rośliny w klatce, która rozpoczęła się w 1 tygodniu, będą miały jaja i kilka niedojrzałych mączlików pokrywających spodnie strony liści (ryc. 2). Niektóre dorosłe mączliki wprowadzone w 1. tygodniu będą nadal żywe.
4. Tydzień 3: Rozpocznij trzecią klatkę, wprowadzając mączliki do nowych roślin, aby składały jaja. Rośliny w klatce, która rozpoczęła się w 1 tygodniu, będą miały niedojrzałe rośliny, a także pojawi się wiele nowych dorosłych mączlików i powinien nastąpić bardzo zauważalny wzrost populacji dorosłych mączlików. Rośliny w klatce, która rozpoczęła się w 2 tygodniu, będą miały wiele jaj i niedojrzałych mączlików pokrywających spodnie strony liści.
5. Tydzień 4: Rozpocznij czwartą klatkę, wprowadzając mączliki do nowych roślin, aby złożyły jaja. Rośliny w klatce, która rozpoczęła się w 1 tygodniu, będą miały wiele dorosłych mączlików, które są około tygodnia po wschodach. Na roślinach w klatce, która rozpoczęła się w 2 tygodniu, pojawi się wiele nowych dorosłych mączlików i powinien nastąpić bardzo zauważalny wzrost populacji mączlików. Rośliny w klatce, która rozpoczęła się w 3 tygodniu, będą miały wiele jaj i niedojrzałych mączlików pokrywających spodnie strony liści.
6. Co tydzień po pierwszych 4 tygodniach: Każdego tygodnia rozpocznij nową klatkę, wprowadzając dorosłe mączliki z czwartej najstarszej klatki (klatka rozpoczęła się w 1 tygodniu) do nowych roślin w nowej, czystej klatce. Stara klatka powinna zostać usunięta, a jej rośliny wyrzucone. Te mączliki są około 1 tydzień po wschodach. W przypadku rodziny wirusowatych mączliki przenoszą wirusa na nowe rośliny, a także składają jaja dla następnego pokolenia mączlików.
7. Zaplanuj eksperymenty transmisyjne, aby wykorzystać mączliki, które pojawią się w klatce w trzecim tygodniu. Jeśli potrzeba więcej mączlików, można zwiększyć liczbę roślin i dodać więcej mączlików do klatki w 1. tygodniu, aby zwiększyć populację mączlików.

3. Metoda inokulacji roślin testowych

1. Aby zapewnić wysokie szybkości transmisji: 1) z mączlikami należy obchodzić się tak delikatnie, jak to możliwe, aby zapobiec uszkodzeniu owada, co zmniejszy szybkość przenoszenia; 2) Musi być dostępna odpowiednia powierzchnia liści dla mączlików do sondowania lub żerowania. Wydłużenie czasu akwizycji lub zwiększenie liczby roślin żywicielskich może zwiększyć niskie wskaźniki zakaźności w roślinach testowych z powodu zatłoczenia w okresie dostępu do nabycia lub szczepienia.
2. Kolekcja mączlików. Poniżej przedstawiono procedurę zbierania i przemieszczania dokładnej liczby mączlików wymaganej do celów doświadczalnych. Aby przenieść dużą liczbę mączlików, co jest potrzebne na przykład do badań przesiewowych odporności, wystarczy delikatnie potrząsnąć roślinami zaatakowanymi przez mączliki nad roślinami testowymi lub żywicielami nabycia zakażonymi wirusem (a później roślinami testowymi). Pamiętaj, aby potrząsnąć roślinami w wielu miejscach, aby zminimalizować efekty agregacji.
3. Nowo pojawiające się dorosłe mączliki (1-3 dni po wschodach) są bardzo aktywne i często żerują, więc zwykle dają najwyższe wskaźniki transmisji ⁴. Starsze mączliki nadal przenoszą, ale z mniejszą częstotliwością. W celu uzyskania wysokich wskaźników transmisji należy stosować wiele mączlików na roślinę badaną (15–40 na roślinę), ponieważ stosunek 1 mączlika na roślinę często skutkuje niedopuszczalnie niskimi wskaźnikami transmisji^3,4. Potrzebna liczba zależy od wirusa i gatunku roślin do pobrania i testowania.
4. Zmontuj urządzenia do aspiracji i fiolki do pobierania. (Rysunek 3)
5. Jedną ręką trzymaj żółtą plastikową kartę wewnątrz klatki kolonijnej, w której znajdują się mączliki do zebrania. Delikatnie postukaj w rośliny, aby zachęcić dorosłe mączliki do latania. Mączliki zostaną przyciągnięte do żółtej kartki i przelecą z rośliny na kartę, gdzie można je zebrać za pomocą aspiratora i bardzo delikatnego oddechu. Nigdy nie zasysaj mączlików, które żerują na roślinach. Ich styliki są osadzane w roślinie podczas żerowania, więc zerwanie ich z roślin złamie ich styliki i uniemożliwi im nabycie lub przeniesienie wirusa (ryc. 4).
6. Zbierz około 20 dorosłych mączlików do jednej fiolki zbiorczej, aby zminimalizować fizyczne uszkodzenia owadów spowodowane powtarzającymi się aspiracjami (ryc. 5).
7. Aby zmienić fiolkę do pobrania, delikatnie postukaj fiolką o twardą powierzchnię i nakryj ją Parafilmem, podczas gdy mączliki są zdezorientowane od stukania.
8. Umieść nową fiolkę zbiorczą na aspiratorze i powtarzaj, aż zostanie zebrana potrzebna liczba mączlików. Mączliki mogą pozostawać w fiolkach do pobierania w temperaturze pokojowej przez kilka godzin.
9. nabycie. Mączliki umieszcza się na roślinie zakażonej wirusem i pozostawia się na zainfekowanych roślinach przez 48-72 godziny. Okresy akwizycji dłuższe niż 72 godziny na ogół nie zwiększają szybkości transmisji. W przypadku wirusów przenoszonych w sposób nietrwały lub półtrwały wystarczające są odpowiednio 1 godzina i kilka godzin, czyli okresy dostępu do ich nabycia (tabela 1). Najlepsze wyniki uzyskuje się, gdy mączliki mają swobodny dostęp do roślin w klatkach, które ograniczają owady do jednej rośliny lub do wielu roślin. Jednak niektóre eksperymenty wymagają pozyskiwania z określonych liści, w takim przypadku można użyć klatek klipsowych. Podczas korzystania z klatek klipsowych ważne jest, aby dostosować się do preferencji żywieniowych mączlików na spodniej stronie liści. Również stłoczenie mączlików w klatkach klipsowych może zmniejszyć szybkość transmisji - akceptowalne prędkości transmisji osiągnięto przy użyciu 10 samic mączlików na klatkę o średnicy 2,5 cm.
10. szczepienie. Przygotować klatkę odpowiednią do wielkości inokulacji i umieścić w niej badane rośliny. Jeśli szczepiona ma być tylko jedna roślina, należy rozważyć klatkę z pojedynczą rośliną. Jeśli ma zostać zaszczepiona więcej niż jedna roślina, należy rozważyć małą ramę z PVC/klatkę z organzy lub klatkę aluminiową (Rysunek 6). Wielkość klatki używanej do inokulacji powinna być nieco większa niż wielkość rośliny (roślin), która ma być zaszczepiona. Wyższe szybkości transmisji uzyskuje się, gdy mączliki są trzymane blisko baldachimu rośliny i nie mają dużo wolnej przestrzeni.
11. Pobieranie mączlików od gospodarzy akwizycji zależy od potrzeb eksperymentu. Jeśli potrzebne są małe liczby, zasysaj mączliki, jak opisano powyżej. Umieść fiolki z mączlikami w klatce w pobliżu roślin i zdejmij pokrywkę (Rysunek 7). Otwórz fiolkę i uwolnij mączliki lub odwróć i delikatnie postukaj w fiolkę, aby uwolnić mączliki. Jeśli potrzebna jest duża liczba, po prostu przenieś rośliny akwizycyjne z mączlikami do klatek, w których znajdują się rośliny testowe i delikatnie strząśnij mączliki z rośliny żywicielskiej akwizycji. W przypadku obu rodzajów introdukcji należy rozprowadzić mączliki po roślinach, aby zminimalizować agregację i zapewnić równomierne zaszczepienie.
12. Pozwól mączlikom badać lub żerować przez odpowiedni czas, ponownie w zależności od wirusa i do pewnego stopnia rośliny żywicielskiej (Tabela 1).
13. Sprawdź mączliki co najmniej raz w okresie dostępu do szczepienia, aby upewnić się, że mączliki sondują lub żerują, otwierając klatkę i przewracając kilka liści na każdej roślinie.
14. W przypadku dłuższych okresów dostępu do inokulacji, delikatnie przeszkadzaj roślinom (za pomocą bambusowego patyczka lub jego odpowiednika), aby wyszczotkować wierzchołki roślin i zachęcić mączliki do redystrybucji na roślinach. Redystrybucja mączlików pomaga zapewnić wyższą szybkość transmisji, przeciwdziałając naturalnej tendencji mączlików do agregacji.
15. wypowiedzenie. Okres dostępu do szczepienia kończy się poprzez zabicie mączlików zatwierdzonymi chemikaliami. Zastosuj dwa insektycydy jeden po drugim: insektycyd kontaktowy, aby szybko zakończyć dorosłe mączliki i insektycyd ogólnoustrojowy, aby zakończyć wszelkie mączliki, które rozwijają się w kolejnych tygodniach i te, które zostały pominięte przez kontaktowy środek owadobójczy (ryc. 8). Z dobrym powodzeniem stosowano insektycydy kontaktowe, takie jak mydło owadobójcze i insektycydy ogólnoustrojowe, takie jak imidachlopryd lub pimetrozyna.

Wyniki

Te metody zakładania i utrzymywania kolonii mączlików, jak również manipulacji w celu przenoszenia wirusów roślinnych, były z powodzeniem stosowane w wielu badaniach^4,11,12,14, jak również w wielu innych, które nie zostały przytoczone. Stosując te metody z uporczywie przenoszonymi wirusami, rutynowo uzyskaliśmy pożądane szybkości transmisji wynoszące 100% dla selekcji pod kątem odporności, badania przesiewowe insektycydów pod kątem ich zdolności do zakłócania transmisji (i oceny związków indukujących oporność)^13,14,17,18 (Figura 9). Opisane tu procedury mogą być i były dostosowywane do wielu lokalizacji zarówno w publicznych, jak i prywatnych placówkach badawczych.

Rodzaj skrzyni biegów Okres dostępu do akwizycji (godzina) Okres dostępu do szczepienia (godzina) Ref. Nietrwałe 1 2-24 Rozdział 10 Półtrwałe 6-24 Rozdział 8-24 Rozdział 10, 16 uporczywy Rozdział 48-72 Rozdział 48-72 3, 6, 8, 9

Tabela 1. Szacowany czas, który może być wykorzystany do wytworzenia wysokich wskaźników transmisji wirusów o różnych typach relacji z ich wektorem kompleksu gatunków Bemisia tabaci. Szacowane czasy opierają się na opublikowanych minimalnych czasach wymaganych do transmisji 80-100% i są modyfikowane w niektórych przypadkach w celu uwzględnienia okresów utajonych i różnic między populacjami mączlików, wirusami i roślinami żywicielskimi.

Rysunek 1. Przykład zjadliwej kolonii mączlików. W tym pomieszczeniu wzrostu znajdują się klatki roślin zakażonych begomowirusem i zaatakowanych przez mączliki zjadliwe.

Rysunek 2. Po lewej: Niedojrzałe stadia mączlika, Bemisia tabaci MEAM clade sensu De Barro⁶ około 1 tygodnia po wschodach i po prawej: dorosły mączlik, skuteczny wektor wielu wirusów roślinnych.

Rysunek 3. Rodzaje urządzeń zbierających, które mogą być używane do zbierania mączlików w celu przenoszenia wirusa roślinnego.

Rysunek 4. Po lewej: Żółta plastikowa karta służąca do zbierania dorosłych mączlików przedstawiająca mączliki gotowe do zbioru. Po prawej: Zbieranie mączlików z żółtej plastikowej karty. Mączliki można zobaczyć na karcie jako małe biało-szare plamki.

Rysunek 5. Mączliki zebrane przez aspirację (20 sztuk w fiolce) z kolonii gotowe do nabycia lub zaszczepienia.

Rysunek 6. U góry po lewej: Klatki z pojedynczymi roślinami używane do pozyskiwania lub zaszczepiania. U góry po prawej: Większe klatki wykonane z fajki pcv i organzy. Dolne: Klatki aluminiowe/ekranowe i organdy w szklarni zawierającej rośliny przeznaczone dla kolonii mączlików.

Rysunek 7. Mączliki przenoszone do jednej rośliny w celu zaszczepienia (lub nabycia).

Rysunek 8. Dodanie ogólnoustrojowego środka owadobójczego w celu zakończenia okresu dostępu do inokulacji mączlika.

Rysunek 9. Rośliny polowe oceniane pod kątem odporności na wirusa żółtej kędzierzawości liści pomidora. Wszystkie rośliny zostały zaszczepione jako 5-tygodniowe siewki, a następnie przesadzone na pole w celu oceny. Rośliny na pierwszym planie to odporna linia plazmy zarodkowej, rośliny w tle to podatna linia plazmy zarodkowej.

Dyskusja

Opisane tutaj metody zostały opracowane na przestrzeni dwóch dekad i opierają się na podstawowych informacjach dostarczonych przez wiele badań nad przenoszeniem, zachowaniem i biologią mączlików. Ze względu na to, że istnieje wiele publikacji, niniejszy manuskrypt odnosi się przede wszystkim do recenzji oraz do kilku wybranych publikacji szczegółowych ilustrujących rodzaj danych wykorzystanych do opracowania tej techniki. W tej procedurze bardzo ważne jest, aby mączliki były traktowane delikatnie, ponieważ łamanie nóg i anten może prowadzić do nieprawidłowych zachowań i niższych wskaźników transmisji. Zbieranie za pomocą odkurzaczy i innych mechanicznych urządzeń ssących nigdy nie przyniosło dobrych rezultatów. Innym czynnikiem decydującym o sukcesie jest to, że liczba mączlików użytych do uzyskania 100% transmisji do badanych roślin musi być określona dla każdej kombinacji gospodarza rośliny i wirusa. Ten optymalny stosunek należy ustalić tylko raz. Najlepsze wyniki uzyskano przy użyciu młodych dorosłych mączlików (1-3 dni po wzejściu), ponieważ dają one najwyższe wskaźniki przenoszenia. Można wykorzystać osoby starsze, ale potrzebna będzie większa liczba mączlików, aby zrekompensować ich zmniejszone tempo przenoszenia. Wiadomo, że samice przenoszą się szybciej niż samce, ponieważ żerują częściej niż samce. Jednak zwykle nie warto poświęcać czasu na rozdzielanie płci w celu transmisji. Procedura ta może być modyfikowana na wiele sposobów, w zależności od zasobów i potrzeb badacza.

Podczas pracy z wieloma wirusami najlepiej jest trzymać pojedynczą kolonię mączlików hodowanych na roślinach niebędących żywicielami wirusa. Mączliki te można zbierać, umieszczać na roślinach zakażonych wirusem w celu ich nabycia, a następnie po nabyciu mączliki można ponownie przenieść do roślin testowych. Rośliny przeznaczone do kolonii powinny być uprawiane w szklarniach w klatkach, aby zapobiec wprowadzeniu mączlików, które mogłyby zarazić je innym wirusem. Porażenie tych roślin roztoczami, wciornastkami i innymi szkodnikami roślin może zagrozić zdrowiu kolonii i spowodować jej zapadnięcie się. Wreszcie, podlewanie roślin kolonii musi być wykonywane ostrożnie. Rośliny te są narażone na ekstremalny stres z powodu żerowania tak wielu mączlików i niższych niż normalnie warunków oświetleniowych. Grzyby gnijące korzenie, które są wprowadzane na torf w mieszankach bezglebowych, mogą stać się problemem, jeśli rośliny zostaną nawet raz nadmiernie podlane. Wstępne traktowanie roślin zraszaczem fungicydowym może wyeliminować niektóre problemy.

Podczas gdy przenoszenie wirusów roślinnych przez mączliki może być czasochłonne i wymagać cennych zasobów (takich jak pomieszczenia do wzrostu), jest niezbędne do przenoszenia niektórych wirusów, dla których nie mamy innych środków transmisji. Jest to również cenny sposób badania roślin pod kątem odporności na wirusy, ponieważ wykorzystuje ten sam rodzaj transmisji, na który oczekuje się, że rośliny na polu będą się opierać. Stosowanie bardziej sztucznych środków przenoszenia nie zawsze daje najlepsze wyniki w ocenie plazmy zarodkowej pod kątem odporności na wirusy.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Nazwa przedmiotu	Firma	Nr katalogowy	Komentarze (opcjonalnie)
mączlik	Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Izrael	---	Siatka BioNet 50 Antywirusowa siatka przeciw owadom
Ekran odporny na mączliki	Hummert International (www.hummert.com)	27-4050-1 - 27-4062-1	Siatka BioNet 50 Antywirusowa siatka przeciw owadom
Urządzenia do zbierania mączlików	BioQuip	1135A	Może być również wykonana przy użyciu zakraplaczy do oczu, elastycznych plastikowych rurek, plastikowych adapterów próżniowych i
gazy Fiolki do zbierania	BioQuip	8909	fiolki zależą od używanego aspiratora.
Żółte karty plastikowe	każda firma	---	Każda jasnożółta karta plastikowa będzie działać, można ją kupić w wielu miejscach.
Klatki dla mączlików	---	---	Nie są one dostępne na rynku i muszą być skonstruowane. Dobrze sprawdzają się u nas klatki o wymiarach 60 cm x 60 cm x 60 cm. Preferujemy te zbudowane z aluminiowych osłon okiennych, nylonowej organdy, plastiku winylowego, z konstrukcją utworzoną przy użyciu aluminiowych ram okiennych. Drzwi mocowane są za pomocą zawiasów fortepianowych i uszczelniane listwą uszczelniającą; Wierzchołki klatek są wykonane z tworzywa winylowego. Klatki mogą być również wykonane z: 1) pleksi sklejonej ze sobą na krawędziach z wentylacją zapewnioną przez ekranowane otwory wycięte na bokach; 2) duże worki z nylonowej organdy, organzy lub siatek mączlika o siatce 50 z wewnętrznymi podporami zapewnionymi przez rury i kształtki PCV przycięte na żądane długości i zamontowane wewnątrz worków, 3) drewniane ramy i nylonowe przesiewacze z organdy, organzy lub 50 siatek mączlika.