Erratum: Miareczkowanie ludzkich koronawirusów z wykorzystaniem testu immunoperoksydazy

Podsumowanie

Wprowadzono poprawkę do publikacji: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Ze względu na błąd wydawniczy ponownie opublikowano poprawione streszczenie.

Streszczenie

Wprowadzono poprawkę do publikacji: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Z powodu błędu wydawcy ponownie opublikowano poprawione streszczenie.

Poprawione streszczenie:

Oznaczanie mian zakaźnego wirusa jest podstawowym i niezbędnym podejściem eksperymentalnym w wirusologii. Klasyczne testy plakowe nie mogą być stosowane w przypadku wirusów, które nie wywołują znaczących efektów cytopatycznych, co ma miejsce w przypadku szczepów prototypowych 229E i OC43 ludzkiego koronawirusa (HCoV). W związku z tym opracowano alternatywny pośredni test immunoperoksydazowy (IPA) do wykrywania i miareczkowania tych wirusów, który został tutaj opisany. Podatne komórki są inokulowane seryjnymi rozcieńczeniami logarytmicznymi próbek zawierających wirusa w formacie płytki 96-dołkowej. Po namnożeniu wirusa, detekcja za pomocą metody IPA pozwala wyznaczyć miano zakaźnego wirusa, wyrażone jako „Tissue Culture Infectious Dose 50 percent” (TCID50). Reprezentuje ono rozcieńczenie próbki zawierającej wirusa, przy którym w połowie serii dołków laboratoryjnych znajduje się zakaźny, replikujący się wirus. Technika ta stanowi niezawodną metodę miareczkowania HCoV-229E i HCoV-OC43 w próbkach biologicznych, takich jak komórki, tkanki i płyny. Artykuł ten opiera się na pracy pierwotnie opisanej w Methods in Molecular Biology (2008) tom 454, strony 93-102.

Oryginalne streszczenie:

Obliczanie mian zakaźnych wirusa stanowi podstawowe i niezbędne podejście eksperymentalne dla wirusologów. Klasyczne testy plakowe nie mogą być stosowane w przypadku wirusów, które nie wywołują istotnych efektów cytopatycznych, co ma miejsce w przypadku szczepów 229E i OC43 ludzkiego koronawirusa (HCoV). W niniejszym opracowaniu opisano alternatywny pośredni test immunoperoksydazy (IPA) służący do wykrywania i miareczkowania tych wirusów. Podatne komórki inokuluje się seryjnymi rozcieńczeniami logarytmicznymi próbek w płytce 96-dołkowej. Po namnożeniu wirusa detekcja za pomocą IPA pozwala na wyznaczenie miana zakaźnego wirusa, wyrażonego jako „średnia dawka zakaźna w hodowli tkankowej” (TCID50). Reprezentuje ona rozcieńczenie próbki zawierającej wirusa, przy którym w połowie serii dołków laboratoryjnych znajduje się replikujący się wirus. Technika ta jest niezawodną metodą miareczkowania HCoV w próbkach biologicznych (komórkach, tkankach lub płynach).

Protokół

Wprowadzono poprawkę do publikacji: Titration of Human Coronaviruses Using an Immunoperoxidase Assay. Ze względu na błąd wydawcy ponownie opublikowano poprawione streszczenie.

Zaktualizowane streszczenie:

Oznaczanie mian zakaźnych wirusów jest podstawowym i niezbędnym podejściem eksperymentalnym w wirusologii. Klasyczne testy plackowe nie mogą być stosowane w przypadku wirusów, które nie wywołują znaczących efektów cytopatycznych, co ma miejsce w przypadku szczepów prototypowych 229E i OC43 ludzkiego koronawirusa (HCoV). W związku z tym opracowano alternatywny pośredni test immunoperoksydazowy (IPA) do detekcji i miareczkowania tych wirusów, który został opisany w niniejszym opracowaniu. Podatne komórki są inokulowane seryjnymi rozcieńczeniami logarytmicznymi próbek zawierających wirusa w formacie płytki 96-dołkowej. Po namnożeniu wirusa detekcja za pomocą IPA pozwala na wyznaczenie miana wirusa zakaźnego, wyrażonego jako „50% zakaźna dawka dla hodowli tkankowej” (TCID50). Reprezentuje ona rozcieńczenie próbki zawierającej wirusa, przy którym w połowie serii dołków laboratoryjnych znajduje się zakaźny, replikujący się wirus. Technika ta zapewnia wiarygodną metodę miareczkowania HCoV-229E i HCoV-OC43 w próbkach biologicznych, takich jak komórki, tkanki i płyny. Artykuł ten opiera się na pracy po raz pierwszy opisanej w Methods in Molecular Biology (2008), tom 454, strony 93-102.

Oryginalne streszczenie:

Obliczanie mian wirusa zakaźnego stanowi podstawowe i niezbędne podejście eksperymentalne w wirusologii. Klasyczne testy płytek nie mogą być stosowane w przypadku wirusów, które nie wywołują znaczących efektów cytopatycznych, co ma miejsce w przypadku szczepów 229E i OC43 ludzkiego koronawirusa (HCoV). W niniejszym tekście opisano alternatywną pośrednią metodę immunoperoksydazową (IPA) służącą do detekcji i mianowania tych wirusów. Podatne komórki inokuluje się seryjnymi rozcieńczeniami logarytmicznymi próbek na płytce 96-dołkowej. Po namnożeniu wirusa detekcja metodą IPA pozwala wyznaczyć miano wirusa zakaźnego, wyrażone jako „średnia zakaźna dawka dla kultur tkankowych” (TCID50). Reprezentuje ona rozcieńczenie próbki zawierającej wirusa, przy którym w połowie serii dołków laboratoryjnych znajduje się replikujący się wirus. Technika ta jest niezawodną metodą mianowania HCoV w próbkach biologicznych (komórkach, tkankach lub płynach).