Oto kilka najważniejszych doniesień z październikowego wydania z 2012 roku czasopisma Journal of Visualized Experiments (JoVE).
Grønlund i wsp. demonstrują, jak izolować i analizować konkretne typy komórek w liściach roślin wykazujących ekspresję zielonego białka fluorescencyjnego (GFP) przy użyciu sortowania komórek aktywowanego fluorescencją (FACS). Metoda ta pozwala przezwyciężyć interferencję fluorescencji chlorofilu występującego w liściach oraz odróżnić protoplasty wykazujące ekspresję GFP od protoplastów niewykazujących ekspresji GFP. W JoVE Neuroscience, Babona-Pilipos i wsp. demonstrują sposób konstrukcji komory do pomiaru galwanotaksji, czyli migracji komórek w polu elektrycznym. Dzięki obrazowaniu poklatkowemu i analizie obrazu autorzy mogą badać zachowania migracyjne komórek prekursorowych neuronów w polu elektrycznym, co może doprowadzić do wykorzystania stymulacji elektrycznej w celu kierowania prekursorów neuronów do miejsc urazów lub zmian chorobowych. Artykuły dotyczące platform mikroprzepływowych mają bogatą historię publikacji w JoVE. Harris i wsp. opublikowali trzy artykuły dotyczące urządzenia mikroprzepływowego służącego do oddzielania aksonów od ciał komórek neuronów. W tym miesiącu w JoVE Neuroscience Higashimori i wsp. wykorzystują tę platformę mikroprzepływową do badania interakcji między aksonami neuronów a komórkami glejowymi, które są kluczowe dla fizjologicznej funkcji układu nerwowego. W JoVE Bioengineering dwie grupy badawcze demonstrują nowatorskie właściwości bioadhezyjne chitosan – polimeru pochodzącego z chityny, która znajduje się w ścianach komórkowych grzybów lub w egzoszkieletach skorupiaków i owadów. Chitosan jest wykorzystywany w wielu zastosowaniach przemysłowych i rolniczych, a inżynierowie biomedyczni znajdują dla niego również zastosowania w chirurgii. Foster i wsp. opracowali aktywowaną laserem folię chirurgiczną o nazwie Surgilux, która łączy chitosan z indocyjaniną zielenią (ICG), barwnikiem światłoczułym. Folia chirurgiczna ta po naświetlaniu laserem silnie wiąże się z tkankami, np. z mięśniami. Lauto i wsp. opracowali folię chirurgiczną łączącą chitosan z fotoaktywnym barwnikiem, błękitem różowym. Ta nowatorska folia również silnie wiąże się z tkankami, np. z jelitami, po naświetleniu. Folie adhezyjne te są biokompatybilne i potencjalnie mogą być stosowane w różnych procedurach chirurgicznych zamiast szwów. W JoVE Clinical and Translational Medicine Fiema i wsp. prezentują wysokoprzepustową technikę walidacji biomarkerów w chorobie przeszczep przeciw gospodarzowi, częstym i zagrażającym życiu powikłaniu transplantacji komórek lub tkanek. Autorzy wykorzystują dostępne komercyjnie testy ELISA do sekwencyjnej analizy wielu białek. W JoVE Immunology and Infection Keyel i wsp. demonstrują, jak mierzyć kinetykę odpowiedzi komórek odpornościowych na toksyny bakteryjne w czasie rzeczywistym przy użyciu wysokoprzepływowej mikroskopii żywych komórek. Metoda ta może być wykorzystana do wykazania, w jaki sposób komórki odpornościowe reagują na toksyny bakteryjne. W połączeniu z wysokoprzepływową konfokalną mikroskopią 3D technika ta pozwala również na wizualizację odpowiedzi naprawczej komórek. W JoVE Applied Physics Borisenko i wsp. określają strukturę elektronową złożonych materiałów przy użyciu spektroskopii fotoemisji z rozdzielczością kątową w ośrodku promieniowania synchrotronowego. Dzięki połączeniu ostatnich osiągnięć w dziedzinie promieniowania synchrotronowego, nauki o powierzchniach i kriogeniki, metoda ta pozwala na uzyskanie precyzyjnego obrazu energii i pędu elektronów wewnątrz ciała stałego oraz odpowiedź na kluczowe pytania z zakresu fizyki materii skondensowanej. Niniejszy przegląd podsumowuje tylko kilka z najważniejszych artykułów wideo dostępnych w październikowym wydaniu JoVE. Aby zapoznać się z pozostałymi filmami, zapraszamy na stronę www.jove.com.ønlund i wsp. demonstrują, jak izolować i analizować konkretne typy komórek w liściach roślin wykazujących ekspresję zielonego białka fluorescencyjnego (GFP) przy użyciu fluorescencyjnego sortowania komórek (FACS). Metoda ta pozwala pokonać zakłócenia wywoływane przez fluorescencję chlorofilu obecnego w liściach oraz odróżnić protoplasty wykazujące ekspresję GFP od protoplastów pozbawionych GFP.
W JoVE Neuroscience, Babona-Pilipos i wsp. demonstrują, jak skonstruować komorę do pomiaru galwanotaksji, czyli migracji komórek w polu elektrycznym. Dzięki obrazowaniu poklatkowemu i analizie obrazu autorzy mogą badać zachowanie migracyjne komórek prekursorowych neuronów w polu elektrycznym, co może prowadzić do zastosowania stymulacji elektrycznej w celu kierowania prekursorów neuronalnych do miejsc urazów lub zmian chorobowych.
Artykuły dotyczące platform mikrofluidycznych mają znaczącą historię publikacji w JoVE. Harris i współpracownicy opublikowali trzy artykuły, w których wykorzystano urządzenie mikrofluidyczne do oddzielania aksonów od ciał neuronów. W tym miesiącu w JoVE Neuroscience, Higashimori i współpracownicy wykorzystują tę platformę mikrofluidyczną do badania interakcji między aksonami neuronów a komórkami glejowymi, które mają krytyczne znaczenie dla funkcji fizjologicznej układu nerwowego.
W JoVE Bioengineering dwie grupy badawcze prezentują nowatorskie właściwości bioadhezyjne chitosanu – polimeru pochodzącego z chityny, która występuje w ścianach komórkowych grzybów lub w egzoszkieletach skorupiaków i owadów. Chitosan jest wykorzystywany w wielu zastosowaniach przemysłowych i rolniczych, a bioinżynierowie znajdują dla niego zastosowania również w chirurgii. Foster i wsp. opracowali aktywowaną laserowo folię chirurgiczną o nazwie Surgilux, która łączy chitosan z zielenią indocyjaninową (ICG), barwnikiem światłoczułym. Ta folia chirurgiczna silnie wiąże się z tkankami, takimi jak mięśnie, po naświetlaniu laserem. Lauto i wsp. opracowali folię chirurgiczną łączącą chitosan z fotoaktywnym barwnikiem, różem bengalskim. Ta nowatorska folia również silnie wiąże się z tkankami, np. z jelitami, po naświetleniu. Te adhezyjne folie są biokompatybilne i potencjalnie mogą być stosowane w różnych procedurach chirurgicznych zamiast szwów.
W JoVE Clinical and Translational Medicine, Fiema i wsp. prezentują wysokoprzepustową technikę walidacji biomarkerów w chorobie przeszczep przeciw gospodarzowi, powszechnym i zagrażającym życiu powikłaniu transplantacji komórek lub tkanek. Autorzy wykorzystują dostępne komercyjnie testy ELISA do sekwencyjnej analizy wielu białek.
W JoVE Immunology and Infection, Keyel i wsp. demonstrują, jak mierzyć kinetykę odpowiedzi komórek odpornościowych na toksyny bakteryjne w czasie rzeczywistym przy użyciu wysokoprzepływowej mikroskopii żywych komórek. Metoda ta może być wykorzystana do wykazania, w jaki sposób komórki odpornościowe reagują na toksyny bakteryjne. W połączeniu z wysokoprzepływową konfokalną mikroskopią 3D technika ta pozwala również na wizualizację odpowiedzi naprawczej komórek.
W JoVE Applied Physics Borisenko i wsp. określają strukturę elektronową złożonych materiałów przy użyciu spektroskopii fotoemisji z rozdzielczością kątową w ośrodku promieniowania synchrotronowego. Dzięki połączeniu ostatnich osiągnięć w dziedzinie promieniowania synchrotronowego, nauki o powierzchniach i kriogeniki, metoda ta pozwala uzyskać precyzyjny obraz energii i pędu elektronów wewnątrz ciała stałego oraz odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu fizyki materii skondensowanej.
Niniejszy podgląd podsumowuje zaledwie kilka wybranych artykułów wideo dostępnych w wydaniu JoVE z października 2012 roku. Aby zapoznać się z pozostałymi filmami, prosimy odwiedzić stronę www.jove.com.