Celem tego protokołu jest zademonstrowanie wiarygodnego i powtarzalnego modelu uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego obserwowanego podczas swobodnego transferu tkanek, aby umożliwić zbadanie strategii interwencyjnych.
Wolny transfer tkankowy jest zdefiniowany jako odwarstwienie naczyniowe izolowanego bloku tkanki, po którym następuje autologiczny przeszczep tej tkanki z zespoleniem przeciętych naczyń płata do naczyń natywnych w miejscu odbiorczym. Procedura jest znana jako FTT, a przenoszona tkanka nazywana jest wolnym płatem.
Swobodny transfer tkanek jest złotym standardem w korekcji złożonych, złożonych defektów, gdzie opcje lokalne są nieodpowiednie lub niedostępne. 1-4 Uszkodzenie reperfuzyjne niedokrwienne (IRI) jest nieuniknione w swobodnym transferze tkanek, przyczynia się do niewydolności płata5,6 i nie ma skutecznego leczenia. Fakultatywny charakter operacji bezpłatnych płatów pozwala na podawanie środków farmakologicznych w celu przygotowania do IRI.
IRI powoduje upośledzenie przepływu przez mikrokrążenie poprzez aktywację śródbłonka i dysfunkcję metaboliczną,7 zwiększoną przepuszczalność naczyń włosowatych i późniejszy obrzęk śródmiąższowy7, napływ komórek zapalnych,8 uwalnianie mediatorów zapalnych, reaktywneformy tlenu9 i odkładanie się dopełniacza. 10 Ten złożony proces niedotlenienia i następującego po nim uszkodzenia reperfuzyjnego ostatecznie prowadzi do śmierci komórki. Model mięśniowo-skórnego IRI umożliwia ocenę skuteczności strategii warunkowania wstępnego w odniesieniu do wyników klinicznych. Niedawne prace potwierdziły możliwość wykorzystania modeli zwierzęcych w badaniach IRI jako substytutu IRI u ludzi, porównując zmiany molekularne zaobserwowane u ludzi z istniejącymi danymi na zwierzętach. 10,11
Płat mięśniowo-skórny szczura poprzecznego prostego brzucha (TRAM) został po raz pierwszy opisany w 1987 roku w języku niemieckim12 i w 1993 roku13 w języku angielskim. Model ten zyskał dużą popularność13-25 jako tani, solidny model do badania różnych strategii zmniejszania IRI związanych ze swobodnym transferem tkanek. 14,17-22 Większość tych badań została zaprojektowana jako nieuszypułkowane płaty TRAM oparte na głębokiej, dolnej szypułce naczyniowej nadbrzusza. 15-18,20-22 Porównanie danych z tych badań jest skomplikowane ze względu na zastosowanie różnej wielkości wysp skórnych (10,5 - 30cm2) oraz różną długość obserwacji pooperacyjnej (2 - 10 dni). Średnia procentowa martwica płatów powierzchniowych w grupie kontrolnej tych badań wynosi 69 ± 6,2% (średnia ± SEM). Należy zauważyć, że wszystkie te sześć prac wykorzystuje mięsień prosty brzucha jako nośnik szypułki naczyniowej, ale nie odsłaniają, nie dzielą i nie mikrozespoleją ani nie zaciskają naczyń. Zhang i wsp.23 opisało prawdziwy, wolny płat TRAM szczura oparty na górnych naczyniach nadbrzusza, w których płaty były podniesione, naczynia podzielone, a płat mięśniowo-skórny przeniesiony i mikrozespoleny do naczyń pachwinowych. Ta trudna technika wymagała wykonania mikrozespoleń naczyń o kalibrze 0,45 - 0,5 mm. Wykonano tylko piętnaście z nich, z czego 67% przeżyło. 23 Model opisany przez Zhanga i wsp.23 jest doskonałym modelem klapy TRAM bez człowieka, ponieważ naprawdę odzwierciedla obrażenia odniesione podczas FTT. Inne opublikowane modele płata TRAM szczura dokładniej odzwierciedlają urazy odniesione podczas ludzkiego uszypułowanego TRAM, ale nie odzwierciedlają dokładnie IRI, ponieważ te płaty nie przechodzą okresu niedokrwienia, po którym następuje reperfuzja, ponieważ szypułka naczyniowa nigdy nie jest zaciśnięta ani podzielona i wykonuje się mikrozespolenia. Ten protokół i film opisują nowy model swobodnego transferu tkanek za pomocą szczurzego TRAM, w którym IRI jest replikowany za pomocą mikroklamerów. Jest to wierniejsze odwzorowanie IRI niż poprzednicy TRAM szypułki, ale jest technicznie łatwiejsze niż wykonanie mikrozespolenia. Mikroklamry są szeroko stosowane przez badaczy transplantologii do odtwarzania IRI związanego z przeszczepem narządów litych; 26-33jednak po raz pierwszy został opisany w klapie szczurzego TRAM.