$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Przezczaszkowa stymulacja magnetyczna (TMS) generuje chwilowe zakłócenia normalnej aktywności neuronalnej w docelowych obszarach mózgu. Tworząc tę przejściową interferencję neuronalną i mierząc zmianę behawioralną lub fizjologiczną, możemy narysować związek przyczynowo-skutkowy między obszarem docelowym a mierzonym efektem eksperymentalnym (przegląd patrz Pascual-Leone i wsp. oraz Taylor i wsp.1,2). Takim efektem eksperymentalnym może być np. wykonanie zadania poznawczego lub zmiana aktywności elektrofizjologicznej (EEG). Rzeczywiście, w ostatnich latach naukowcy zaczęli używać TMS w połączeniu z EEG, aby bezpośrednio powiązać obszary korowe z potencjałami związanymi ze zdarzeniami (ERP) lub wzorcami aktywności oscylacyjnej (np. 2-7). W tym artykule metodologicznym opiszemy szczególny i użyteczny framework do łączenia TMS i EEG: TMS sterowany fMRI podczas eksperymentu ERP. Najpierw szczegółowo opiszemy, jak zastosować TMS do obszarów predefiniowanych przez fMRI, jednocześnie rejestrując dane EEG. Następnie opiszemy eksperymentalny projekt, który pozwala na wydobycie niezawodnego ERP. Celem takiego eksperymentu jest przyczynowe powiązanie obszarów mózgu ujawnionych za pomocą funkcjonalnego rezonansu magnetycznego z interesującymi komponentami ERP. Na koniec podamy konkretny przykład badania łączącego selektywne ERP twarzy i ciała z selektywnymi obszarami twarzy i ciała, które ujawniają się za pomocą fMRI.
Jakie są korzyści z połączenia sygnałów EEG z aktywacjami fMRI? EEG i fMRI są powszechnie stosowanymi narzędziami do pomiaru reakcji kory mózgowej na bodźce wzrokowe. Na przykład selektywność kategorii w ścieżce wzrokowej oceniano dla różnych kategorii obiektów wzrokowych, takich jak twarze, części ciała i słowa pisane, zarówno za pomocą ERP wyekstrahowanego z danych EEG8,9, jak i funkcjonalnego MRI10-12. Sygnały mierzone przez te dwa wspólne narzędzia badawcze mają jednak zasadniczo różny charakter. EEG przenosi informacje o neuronalnej aktywności elektrycznej z dużą precyzją czasową, ale bardzo niską rozdzielczością przestrzenną i może odzwierciedlać mieszaninę wielu oddzielnych źródeł leżących u podstaw. fMRI zapewnia pośrednią miarę aktywności neuronalnej polegającą na powolnych zmianach hemodynamicznych zachodzących podczas prezentacji bodźca i/lub wykonywania zadania, ale przedstawia tę aktywność z wyższą rozdzielczością przestrzenną. Ustalenie korelacji między tymi dwoma pomiarami może być zatem bardzo interesujące, ale jest ograniczone, ponieważ nie implikuje związku przyczynowego między zarejestrowaną reakcją elektrofizjologiczną skóry głowy a obszarami ujawnionymi za pomocą funkcjonalnego rezonansu magnetycznego. Nawet przy jednoczesnym pomiarze (np. 13-15) nie można określić kierunkowego związku przyczynowo-skutkowego między EEG a aktywnością w funkcjonalnie zdefiniowanych obszarach kory mózgowej. TMS jest narzędziem, które może pomóc w ustaleniu takiego związku przyczynowego.
Równoczesne badanie EEG-TMS jest metodologicznie trudne, głównie ze względu na artefakt wysokiego napięcia wprowadzany do sygnału EEG przez stymulację magnetyczną (patrz Rysunek 1, przegląd patrz Ilmoniemi et al.16). Ten artefakt składa się z przejściowego zakłócenia związanego z impulsem krótkotrwałym, po którym często następuje wolniejszy artefakt wtórny (lub resztkowy), który może trwać kilkaset milisekund po dostarczeniu impulsu Rysunek 2A, zastępując w ten sposób większość interesujących komponentów ERP. Ten wtórny artefakt może obejmować źródła mechaniczne, takie jak prądy indukowane przez impuls magnetyczny do okablowania i powolny zanik tych prądów w skórze, oraz źródła fizjologiczne, takie jak aktywność mięśni na skórze głowy i słuchowe lub somatosensoryczne potencjały wywołane wywołane przez działanie cewki17-20. Chociaż mechaniczne źródła zakłóceń prawdopodobnie wytwarzają artefakty o większej amplitudzie niż fizjologiczne, tych różnych artefaktów nie można rozdzielić, a istnienie któregokolwiek z nich w sygnale może zakłócić wyniki. Jednym z możliwych rozwiązań jest zastosowanie powtarzających się impulsów TMS przed zapisem EEG ("offline TMS"), w przeciwieństwie do jednoczesnego EEG-TMS. Hamujący wpływ takiego protokołu na aktywność kory mózgowej utrzymuje się przez kilka minut (i do pół godziny) po stymulacji, a EEG można zmierzyć w tym efektywnym oknie czasowym i porównać z danymi wyjściowymi, pre-TMS, EEG. Stymulacja powtarzalna jest jednak z definicji pozbawiona wysokiej rozdzielczości czasowej, którą może oferować TMS online, gdzie impulsy mogą być podawane w precyzyjnym czasie w stosunku do początku próby w rozdzielczości milisekundowej. Efekt powtarzającej się stymulacji może również rozprzestrzeniać się za pośrednictwem połączeń korowych na szerszym obszarze niż pożądany, a zatem znacznie zmniejszać rozdzielczość przestrzenną.
Aby skorzystać zarówno z rozdzielczości przestrzennej, jak i czasowej, którą może zapewnić TMS, można zastosować jednoczesną kombinację EEG-TMS. Wymaga to jednak metod usuwania artefaktów generowanych przez stymulację magnetyczną sygnału EEG. Zaproponowano bardzo niewiele rozwiązań matematycznych offline do usuwania artefaktów TMS16,21,22, chociaż żadna metoda nie została uzgodniona i żadna metoda nie może być optymalna dla wszystkich projektów eksperymentalnych. Opracowano również system "obcinania", składający się z obwodu pobierania próbki i zatrzymania, aby chwilowo zatrzymać akwizycję EEG podczas dostarczania impulsu TMS 20. Ta technika nie tylko wymaga specjalistycznego sprzętu, ale może nie usunąć całkowicie pozostałego artefaktu TMS. W tym artykule opiszemy adaptację metodologii EEG-TMS opracowanej przez Thut i współpracowników19, szczególnie przydatnej w badaniach ERP. Technika ta pozwala na niezawodną ekstrakcję ERP przy jednoczesnej eliminacji wszystkich szczątkowych składników szumu powodowanych przez impuls TMS Rysunek 2. Będziemy dalej udzielać ogólnych wskazówek dotyczących udanej konfiguracji eksperymentalnej EEG-TMS.
Kolejnym wyzwaniem w badaniach TMS omówionym w tym artykule metodologicznym jest znalezienie najlepszej pozycji i kąta cewki dla dokładnego wycelowania w pożądany obszar kory. Opiszemy zastosowanie systemu nawigacji stereotaktycznej do jednoczesnej rejestracji głowy pacjenta z wcześniej uzyskanymi funkcjonalnymi obrazami MRI. Chociaż system nawigacji może być używany do lokalizacji anatomicznie zdefiniowanych struktur mózgu, celowanie pod kontrolą fMRI jest szczególnie przydatne, ponieważ w przypadku wielu funkcji i efektów eksperymentalnych dokładnej lokalizacji aktywacji nie można wywnioskować na podstawie samych markerów anatomicznych. Dla takich funkcjonalnych obszarów zainteresowania (ROI) definicja obszaru jest dokonywana indywidualnie dla każdego uczestnika.
Aby zilustrować wszystko powyżej, podamy przykład badania, które przeprowadziliśmy wcześniej, w którym EEG było rejestrowane równolegle z TMS prowadzonym przez aktywacje fMRI7. W tym badaniu dokonano podwójnej dysocjacji między selektywnymi ERP twarzy i ciała: chociaż ERP twarzy i ciała osiągają szczyt wokół tych samych miejsc opóźnienia i elektrod, celowanie w indywidualnie zdefiniowane obszary selektywne dla twarzy i ciała w bocznym płacie potylicznym umożliwiło nam dysocjację sieci neuronowych leżących u podstaw każdej odpowiedzi ERP. Na koniec postaramy się udzielić bardziej ogólnych porad dotyczących optymalizacji zapisu EEG podczas aplikacji TMS.