Method Article

Mysi model uszkodzenia rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym do badania neuroplastyczności układu oddechowego po zmianie chorobowej

DOI:

10.3791/51235

⸱

May 28th, 2014

 ,  ,  ,  ,  , 
1UFR des sciences de la santé - Simone Veil, Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines, 2Service de Physiologie - Explorations fonctionnelles, Hôpital Ambroise Paré, 3Services de Physiologie, Explorations Fonctionnelles, Réanimation Médicale et Centre d'Investigation Clinique et d'Innovation Technologique (Unité Inserm 805), Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Niewydolność oddechowa jest główną przyczyną zgonów po urazie rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym. Posiadanie powtarzalnego, mierzalnego i wiarygodnego przedklinicznego modelu zwierzęcego niewydolności oddechowej wywołanej częściowym uszkodzeniem szyjki macicy pomoże zrozumieć późniejszą neuroplastyczność układu oddechowego i nieoddechowego oraz umożliwi przetestowanie przypuszczalnych strategii naprawczych.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uraz rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym powoduje trwały paraliż i często prowadzi do niewydolności oddechowej. Do tej pory nie opracowano skutecznych metod terapeutycznych w celu poprawy/złagodzenia niewydolności oddechowej po wysokim urazie rdzenia kręgowego w odcinku szyjnym (SCI). W tym miejscu proponujemy mysi przedkliniczny model wysokiego SCI na poziomie metamerycznym szyjki macicy 2 (C2) w celu zbadania zróżnicowanej neuroplastyczności oddechowej po zmianach chorobowych. Technika polega na chirurgicznym częściowym urazie na poziomie C2, który wywoła porażenie przepony z powodu deaferentacji przeponowych neuronów ruchowych z ośrodków oddechowych znajdujących się w pniu mózgu. Przeciwległa strona urazu pozostaje nienaruszona i umożliwia zwierzęciu powrót do zdrowia. W przeciwieństwie do innych SCI, które wpływają na funkcję lokomotoryczną (na poziomie klatki piersiowej i odcinka lędźwiowego), funkcja oddechowa nie wymaga motywacji zwierząt, a kwantyfikacja deficytu/powrotu do zdrowia może być łatwo przeprowadzona (zapisy przepony i nerwu przeponowego, wentylacja całego ciała). Ten przedkliniczny model C2 SCI jest potężnym, użytecznym i niezawodnym modelem przedklinicznym do badania różnych zdarzeń neuroplastyczności oddechowej i nieoddechowej na różnych poziomach (molekularnym i fizjologicznym) oraz do testowania różnych przypuszczalnych strategii terapeutycznych, które mogą poprawić oddychanie u pacjentów z SCI.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Uraz rdzenia kręgowego jest częstym urazem obserwowanym w populacji ludzkiej z dramatycznymi zdarzeniami, takimi jak trwały paraliż. Jednak ciężkość urazu zależy od poziomu i rozległości początkowego urazu. Niewydolność oddechowa jest główną przyczyną śmiertelności po urazie rdzenia kręgowego w górnej części odcinka szyjnego (SCI)1. Obecnie jedynym sposobem leczenia jest umieszczenie pacjenta pod respiratorem. Ze względu na to, że niewielu pacjentów można odłączyć od wspomagania wentylacji2 ze względu na spontaniczną rekonwalescencję, która następuje z opóźnieniem po zmianie chorobowej, pilna jest potrzeba opracowania nowych innowacyjnych nieinwa....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten protokół został zatwierdzony przez komisję etyki przewodniczącego RBUCE-UP ds. Doskonałości (Uniwersytet Paris Sud, umowa o grant nr 246556) oraz Université de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines.

1. Przygotowanie wysterylizowanych narzędzi chirurgicznych

  1. Wyczyść narzędzia chirurgiczne detergentem laboratoryjnym.
  2. Autoklaw narzędzi przed zabiegiem.
  3. Podczas sesji chirurgicznej wysterylizuj narzędzia, umieszczając końcówki w gorącym sterylizatorze kulkowym na 10 minut w temperaturze 180 °C między 2 operacjami.

2. Przygotowanie leków

  1. Przygotuj 2 strzykawki o poj....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zakres obrażeń

Sukces i powtarzalność tego konkretnego modelu eksperymentalnego zależą od doświadczenia każdego manipulatora/chirurga. Późniejsza regeneracja oddechowa (aktywność nerwu przeponowego i aktywność przepony) po urazie C2 jest skorelowana z pozostałą brzuszno-boczną oszczędzoną istotą białą21. Ponieważ uraz jest "wykonywany ręcznie" i wymaga pewnej praktyki ze strony chirurga, zakres każdego urazu musi być sprawdzony za pomocą technik histologicznych (utr.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Trudności techniczne związane z wykonaniem modelu szkody C2

Mysi model urazu C2 jest interesującym narzędziem do badania neuroplastyczności pourazowej układu oddechowego. Jednak etapy potrzebne do stworzenia powtarzalnego i wiarygodnego modelu są liczne, a każdy z nich może mieć wpływ na wynik badania. Na przykład podczas procesu intubacji należy zachować szczególną ostrożność, ponieważ rurka ustno-tchawicza może wywołać zapalenie tchawicy, co może prowadzić do różnych powikła.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca jest wspierana przez fundusze z Siódmego Programu Ramowego Unii Europejskiej (FP7/2007-2013) na podstawie umowy o grant nr 246556 (projekt europejski RBUCE-UP), HandiMedEx przyznany przez Francuską Radę Inwestycji Publicznych. Marcel Bonay był wspierany przez Chancellerie des Universités de Paris (Legs Poix), Fonds de Dotation Recherche en Santé Respiratoire, oraz Centre d'Assistance Respiratoire à Domicile d'Île de France (CARDIF)

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Zwierzę
Samiec Sprague Dawley RatJanvier225-250 g
Narzędzia chirurgiczne
Student Dumont #5 kleszczeFine Science Tool91150-20
Kleszcze studenckie Standard PatternFine Science Tool91100-12
Mayo-Stille NożyczkiFine Science Tool14013-15Zakrzywione
nożyczki sprężynowe Student VannasNarzędzie do nauki o nauce91500-09Proste
nożyczki sprężynowe - ostrza 8 mmNarzędzie do nauki15025-10Proste/
Friedman Pearson RongeurFine Science Tool16121-14Zakrzywiony
nóż preparacyjny - narzędziedo nauki z cienką końcówką10055-12Prosty
uchwyt igły Olsen-HegarFine Science Tool12002-14Ząbkowany
retraktor Weitlaner-LocktiteFine Science Tool17012-112x3
wchłanialne szwy chirurgiczneCentravetBYO001Rozmiar szwu 4-0
Equipment
Hot Bead SterylizatorFine Science Cewnik narzędziowy18000-45
 CentravetCAT18816 G
Laryngoskop
Przewód
Lustro krtanioweCentravetMIR011
Dzwonki z mleczanamiCentravetRIN020
StrzykawkaCentravet
Igła Centravet
O2Air LiquidI1001M20R2A001
683 RodentT Wentylator 115/230VHarvard Apparatus55-0000
Samodzielny waporyzatorWPIEZ-155
Cienka linia podgrzewanego łóżkaWPIEZ-211
Kanister z powietrzemWPIEZ-258
Narkotyki
CarprofenCentravet
RimadylCentravetRIM011
BuprenorphineCentravetBUP001
BaytrilCentravetBAY001
DexmedetomidineCentravetDEX010
AtipamezoleCentravetANT201
RoztwórBetadineCentravetVET002
IzofluranCentravetVET066
doprowadzający

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Frankel, H. L., et al. Long-term survival in spinal cord injury: a fifty year investigation. Spinal Cord. 36, 266-274 (1998).
  2. Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. Progress in spinal cord research - a refined strategy for the Internatio....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Cervical Spinal Cord InjuryRespiratory NeuroplasticityPhrenic Nerve ActivityDiaphragm HemiparalysisC2 Vertebra InjurySurgical HemilaminectomyRodent Ventilator UseHistological TechniquesNerve Muscle RecordingsCrossed Phrenic Pathway

Related Articles