Pomiar funkcji oddechowych u myszy za pomocą nieskrępowanej pletyzmografii całego ciała

Podsumowanie

Ocena fizjologii układu oddechowego tradycyjnie opierała się na technikach, które wymagają unieruchomienia lub uspokojenia zwierzęcia. Nieskrępowana pletyzmografia całego ciała zapewnia jednak precyzyjną, nieinwazyjną, ilościową analizę fizjologii układu oddechowego w modelach zwierzęcych. Ponadto technika ta umożliwia wielokrotną ocenę układu oddechowego myszy, co pozwala na badania podłużne.

Streszczenie

Dysfunkcja układu oddechowego jest jedną z głównych przyczyn zachorowalności i śmiertelności na świecie, a wskaźniki śmiertelności nadal rosną. Ilościowa ocena czynności płuc w modelach gryzoni jest ważnym narzędziem w opracowywaniu przyszłych terapii. Powszechnie stosowane techniki oceny funkcji oddechowej, w tym inwazyjna pletyzmografia i wymuszona oscylacja. Chociaż techniki te dostarczają cennych informacji, gromadzenie danych może być obarczone artefaktami i zmiennością eksperymentalną ze względu na potrzebę znieczulenia i/lub inwazyjnego oprzyrządowania zwierzęcia. W przeciwieństwie do tego, nieskrępowana pletyzmografia całego ciała (UWBP) oferuje precyzyjny, nieinwazyjny, ilościowy sposób analizy parametrów oddechowych. Technika ta pozwala uniknąć stosowania znieczulenia i ograniczeń, co jest powszechne w tradycyjnych technikach pletyzmografii. Ten film zademonstruje procedurę UWBP, w tym konfigurację sprzętu, kalibrację i rejestrację czynności płuc. Wyjaśni, jak analizować zebrane dane, a także identyfikować eksperymentalne wartości odstające i artefakty, które wynikają z ruchu zwierząt. Parametry oddechowe uzyskane za pomocą tej techniki obejmują objętość oddechową, objętość minutową, wdechowy cykl pracy, wdechowe natężenie przepływu oraz stosunek czasu wdechu do czasu wydechu. UWBP nie opiera się na specjalistycznych umiejętnościach i jest niedrogi w wykonaniu. Kluczową cechą UWBP, najbardziej atrakcyjną dla potencjalnych użytkowników, jest możliwość wykonywania powtarzających się pomiarów czynności płuc na tym samym zwierzęciu.

Wprowadzenie

Dysfunkcja płuc jest jedną z głównych przyczyn zachorowalności i śmiertelności na świecie. Stan ten charakteryzuje się niedostateczną wymianą tlenu, co jest równoznaczne z kaszlem, bólami w klatce piersiowej i dusznością. Choroby układu oddechowego odpowiadają za ~10% śmiertelności na całym świecie¹. Według Światowej Organizacji Zdrowia śmiertelność wzrośnie z powodu uporczywego palenia, zanieczyszczenia i czynników drażniących w miejscu pracy. UWBP jest użytecznym dodatkiem do badań nad fizjologią płuc, który zdecydowanie uzupełnia tradycyjne analizy biochemiczne i histologiczne². Inne procedury stosowane do oceny płuc nie zapewniają takich samych korzyści jak UWBP. Pletyzmografia inwazyjna jest powszechnie stosowaną techniką, która wymaga znieczulenia zwierzęcia^3,4, a zatem uzyskane pomiary oddechowe niekoniecznie odzwierciedlają stan naturalny. Ponadto wymóg wentylacji mechanicznej i wyzwania chemiczne wykluczają przyszłe pomiary^3,4. Inną metodą zbierania danych oddechowych jest oscylacja wymuszona, która jest bardziej wrażliwa na drobniejsze zmiany parametrów oddechowych w porównaniu z UWBP⁵. Wymuszona oscylacja jest jednak techniką inwazyjną i wymaga terminacji przez zwierzę w celu zebrania danych^5-7.

UWBP polega na umieszczeniu zwierzęcia w specjalistycznej komorze. Podczas wdechu powietrze pływowe jest ogrzewane i nawilżane w płucach, zwiększając ciśnienie pary wodnej i powodując rozszerzalność cieplną gazu⁸. Efekt ten powoduje zmianę objętości powietrza netto, powodując wzrost ciśnienia w komorze pletyzmografu⁸. Odwrotna sytuacja ma miejsce podczas wydechu, tworząc falę oddechową zwierzęcia. Analiza kształtu fali jest następnie wykorzystywana do pomiaru na podstawie śladu oddechowego: częstości oddechów (oddechów/min), całkowitego czasu cyklu oddychania (s), czasu wdechu/wydechu (Ti/Te, s) oraz zmian ciśnienia spowodowanych każdą objętością oddechową_(PT). Rysunek 1 ilustruje każdy pomiar rozpoczynający się od śladu oddechowego. Pomiary te są łatwe do obliczenia i na ich podstawie można uzyskać wiele parametrów oddechowych. Parametry te obejmują: objętość oddechową (objętość powietrza przemieszczającego się między normalnym wdechem a wydechem), objętość minutową (objętość gazu wdychanego z płuc na minutę), cykl pracy wdechowej (procent czasu wdechu w stosunku do całkowitego czasu trwania cyklu oddychania) i natężenie przepływu wdechowego (ilość wdychanego powietrza w danym czasie).

UWBP zapewnia precyzyjną, nieinwazyjną, ilościową analizę fizjologii układu oddechowego w modelach zwierzęcych i może być używany do pomiaru postępu choroby układu oddechowego i funkcji płuc^6,9. W przeciwieństwie do innych technik pletyzmografii, UWBP unika stosowania znieczulenia, ograniczeń i inwazyjnych manipulacji, które wytwarzają artefakty i zmienność eksperymentalną^6,9. Znieczulenie może hamować oddychanie, zmieniać tętno i może być trudne do regulacji¹⁰. Ograniczenia wywołują przyspieszenie oddychania z powodu dodatkowego stresu poprzez uwalnianie kortykosteronu i epinefryny^11,13. Kluczową cechą UWBP jest powtarzalna ocena fizjologiczna, dzięki czemu jest on podatny na badania podłużne. UWBP jest zdecydowanie zalecany do podłużnej oceny fizjologii płuc i oferuje cenną umiejętność do przyszłej oceny leków oddechowych.

Bleomycyna, albumina jaja kurzego i niedotlenienie zostały wykorzystane do wywołania problemów oddechowych w kilku badaniach, a UWBP z powodzeniem zmierzyło dokładną ocenę fizjologiczną płuc^7,9,13-16. Opisany protokół jest przeznaczony dla standardowych dorosłych myszy laboratoryjnych. Jednak UWBP został przystosowany do innych zwierząt, takich jak szczury, świnki morskie i naczelne inne niż ludzie^17-20. UWBP nie ogranicza się tylko do oceny dysfunkcji płuc, ale jest również stosowany do oceny dojrzewania płuc³. Wszechstronność, prostota i powtarzalność UWBP pozwoliły na stworzenie doskonałej techniki oceny funkcji płuc u zwierząt. Do wykonania tej procedury wymagane będzie różne programy (patrz tabela materiałów i wyposażenia). Doświadczony naukowiec byłby w stanie wykonać ten protokół za pomocą myszy w ciągu 1 godziny.

Protokół

UWAGA: Poniższa procedura eksperymentalna została zatwierdzona przez Komitet ds. Etyki Zwierząt na Uniwersytecie Monash i przeprowadzona zgodnie z Australijskim Kodeksem Postępowania w zakresie opieki i wykorzystywania zwierząt do celów naukowych (2006). Dorosłe samice myszy C57BL/6 użyte do wygenerowania reprezentatywnych wyników uzyskano z Monash Animal Services. Myszy trzymano w specyficznym, wolnym od patogenów pomieszczeniu o kontrolowanej temperaturze i wilgotności z 12-godzinnym cyklem światło-ciemność. Myszy te miały swobodny dostęp do pożywienia i wody.

1. Wstępna konfiguracja

1. Podłącz laptopa/komputer stacjonarny do urządzenia do akwizycji danych w celu nagrywania za pomocą USB.
2. Podłącz wzmacniacz mostkowy od "wyjścia 1" do "wejścia 1" urządzenia do akwizycji danych za pomocą BNC.
3. Włóż przetwornik ciśnienia do "kanału 1" wzmacniacza ósemkowego. Włącz maszynę do akwizycji danych i otwórz oprogramowanie do analizy. Oprogramowanie powinno automatycznie wykryć konfigurację sprzętu (patrz tabela materiałów i wyposażenia).
4. Otwórz ustawienia kanału znajdujące się na pasku narzędzi konfiguracji oprogramowania. Zmień liczbę nagrywanych kanałów na 1.
5. Ustaw barometr do pomiaru ciśnienia w pomieszczeniu i aparat do słupa wody do kalibracji wzmacniacza mostkowego. Aparat do pomiaru słupa wody składa się z dwóch serologicznych pipet strzykawkowych o pojemności 5 ml połączonych plastikową rurką.
6. Napełnij kolumny wodą i upewnij się, że poziom wody jest zrównoważony za pomocą linijki. Podłącz jeden kawałek plastikowej rurki do górnej części każdej pipety. Rysunek 2 przedstawia ustawienie słupa wody.

2. Kalibracja wzmacniacza mostka

Uwaga: Aby skalibrować wzmacniacz mostkowy, wymagane jest wstrzyknięcie powietrza do słupa wody, aby uzyskać odchylenie o 1 cm H_2O. Nastąpi to w jednym zestawie warunków i zależy od aparatury użytkownika. Dla wyjaśnienia, poniższe kroki pokazują, w jaki sposób to laboratorium wykona kalibrację.

1. Wyjąć strzykawkę o pojemności 1 ml do 300 μl; przymocować strzykawkę do kranu na końcu rurki po prawej stronie słupa wody. UWAGA: Upewnij się, że zawór odcinający jest otwarty na strzykawkę i słup wody i zamknięty na powietrze w pomieszczeniu. Jeśli w tym momencie poziom wody nie jest zrównoważony, przekręć kran tak, aby był otwarty na powietrze w pomieszczeniu i słup wody, co spowoduje zrównoważenie wody. Rurka po lewej stronie słupa wody powinna być podłączona do przetwornika ciśnienia w celu zmierzenia zmiany ciśnienia wywołanej zanurzeniem strzykawki.
2. Podłącz rurkę ze słupa wody po lewej stronie do złącza na przetworniku ciśnienia (górny pierścień przetwornika).
3. Wybierz przewijane menu znajdujące się obok kanału 1 na ekranie głównym po prawej stronie oprogramowania i wybierz "Bridge amp" (patrz tabela materiałów i sprzętu).
4. Wprowadź ustawienia na 5 mV, 20 Hz dolnoprzepustowe, zaznacz pole "odwróć" i kliknij "zero". Kliknij "zero", aby ustawić ślad na ~0 mV. Zmniejsz rozmiar okna do 4:1, aby ułatwić przeglądanie.
5. Gdy wszystko jest już gotowe, wciśnij strzykawkę o pojemności 1 ml, pozostawiając ją na 3 sekundy. Spowoduje to nagły skok w oprogramowaniu, ponieważ zmieniło się ciśnienie. Gdy 300 μl zostanie obniżone, ciśnienie przesunie wodę w słupie wody o 1 cm. Ta znana wartość pomoże skalibrować mostek Amplifier.
   UWAGA: Wzrost ciśnienia w komorze spowodowany wgłębieniem 300 μl odpowiada wartości P_K użytej do późniejszych obliczeń.
6. Wybierz "jednostki wejściowe" znajdujące się w lewym dolnym rogu okna Bridge Amp.
7. Podświetl "ślad tła" przed skokiem, znany również jako "obszar zerowy".
   1. Kliknij strzałkę obok "punktu 1", a spowoduje to wytworzenie sygnału tła w zakresie -0,002 mV-0,002 mV (wartość nigdy nie będzie dokładnie równa 0 mV).
   2. Wpisz "0" w oknie obok okna sygnału tła.
8. Podkreślić " obszar zwiększonego ciśnienia na wykresie" od momentu wciśnięcia strzykawki. Kliknij strzałkę obok punktu 2, a wartość powinna mieścić się w zakresie 0,9-1,2 mV.
   1. Wpisz "1" w oknie obok okna "podwyższone ciśnienie". Wizualne wyjaśnienie kroków 2.7 i 2.8 znajduje się na rysunku 3. Wartości znalezione poza określonymi zakresami mogą wskazywać na uszkodzenie wzmacniacza ósemkowego.
9. Przejdź do opcji "zdefiniuj jednostki" znajdującej się w prawym górnym rogu okna i wybierz "cmH₂O". Jeśli ta opcja nie jest dostępna, można ją wprowadzić ręcznie. Kliknij przycisk OK.
10. Wróć do menu "Bridge Amp" (patrz 2.1). Wybierz 1 mV i ustaw amplifier na "zero". Spowoduje to zakończenie kalibracji, a słup wody będzie można bezpiecznie usunąć.

3. Rejestrowanie funkcji płuc

1. Zważ mysz (g). UWAGA: Na tydzień przed oceną fizjologiczną wprowadzić mysz do środowiska komory pletyzmografii. Pomoże to w aklimatyzacji i zmniejszy stres podczas przeprowadzania tej procedury w późniejszym terminie. Ogólny schemat przedstawiający konfigurację UWBP znajduje się na rysunku 4.
2. Zmierz temperaturę ciała za pomocą termometru doodbytniczego. Nasmaruj termometr wazeliną przed włożeniem. Zapisz odczyt temperatury i oczyść smar 80% (v/v) etanolem. W przypadku wykorzystywania bardzo małych zwierząt, takich jak nowonarodzone młode myszy, średnią wartość temperatury ciała można zamiast tego określić za pomocą termometru na podczerwień.
3. Umieść sondę temperatury/wilgotności względnej na jednootworowym końcu komory pletyzmografii. Zapisz temperaturę, wilgotność i ciśnienie atmosferyczne wewnątrz komory pletyzmografii przed umieszczeniem w niej myszy.
4. Umieść mysz w komorze pletyzmografii, lekko zakryj otwarty koniec. Dzięki temu mysz może się zaaklimatyzować. Zamknij komorę.
5. Po włożeniu sondy temperatury/wilgotności z boku komory pletyzmograficznej z jednym otworem, teraz włóż przetwornik i strzykawkę po drugiej stronie z dwoma otworami.
6. Naciśnij "Start" w oprogramowaniu i nagrywaj przez około 15-45 sekund. Zapisz 5-10 sekund danych, w których zwierzę się nie porusza. Ruch zmieni podstawową fizjologię układu oddechowego zwierzęcia i zapewni słabe wyniki. Oddychanie powinno oscylować po liniowej ścieżce w programie. Są to dane użyteczne. Uwaga: Oddawanie moczu lub kału może prowadzić do wzrostu temperatury i wilgotności wewnątrz komory pletyzmografii. Spowoduje to zaciemnienie wyników podczas analizy. W przypadku oddawania moczu lub kału należy natychmiast przerwać nagrywanie i wyczyścić komorę pletyzmograficzną 80% (v/v) etanolem. Patrz rysunek 6, aby zapoznać się z wizualną reprezentacją nieoptymalnych wyników, w których dane powinny zostać odrzucone.
7. Po nagraniu przez 45 sekund naciśnij przycisk "Stop" w oprogramowaniu (patrz tabela materiałów i sprzętu). Wyjmij mysz z komory pletyzmografii i natychmiast zapisz temperaturę i wilgotność w komorze. Nie nagrywaj w sposób ciągły dłużej niż 45 sekund, ponieważ może to stresować zwierzę.
8. Włóż mysz z powrotem do klatki, spryskaj i wytrzyj komorę 80% (v/v) etanolem.
9. Poczekaj, aż komora wyschnie i powróci do podstawowej temperatury i wilgotności przed przejściem do następnej myszy. Powtórzyć kroki od 3.1 do 3.9 dla kolejnych zwierząt. Uwaga: Jeśli badanych jest wiele zwierząt, upewnij się, że temperatura i wilgotność w komorze powrócą do wartości bliskich wartości wyjściowych przed umieszczeniem każdego nowego zwierzęcia w komorze.

4. Analiza pletyzmograficzna

Uwaga: Aby obliczyć parametry oddechowe, takie jak objętość oddechowa (V_T) i objętość minutowa, należy zmierzyć następujące zmienne: częstość oddechów (oddechy/min), całkowity czas cyklu oddechowego (s), czas wdechu/wydechu (Ti/ Te, sekundy) oraz zmiana ciśnienia spowodowana każdą objętością oddechową (P_T). Rysunek 1 ilustruje zmienne, które można zmierzyć na podstawie śladu. W poniższych krokach wykorzystuje się oprogramowanie (patrz tabela materiałów i sprzętu) do pomiaru tych zmiennych. Podczas analizy należy unikać obszarów śladu, w których występuje podsłuchiwanie lub ruch. Aby uzyskać powtarzalne wyniki, wymagane jest co najmniej 5 sekund dobrego śladu oddechowego. Przykład różnych śladów oddychania znajduje się na rysunkach 5 i 6.

1. Otwórz ekran na pełny ekran, ustaw widok na 1:1 i wybierz 5 sekund użytecznych danych. Reprezentatywny obraz tego zjawiska przedstawiono na rysunku 5.
2. Otwórz mini okno datapad znajdujące się w górnej części programu w zakładce DataPad. Wybierz kanał 1 i wybierz "pomiary cykliczne" w lewej kolumnie i "średnia wysokość cykliczna" w prawej kolumnie.
   1. Wybierz "Opcja" i ustaw skalę minimalnego wykrywania piku na 1 (ms). Umożliwi to wykrycie każdej wartości szczytowej i staje się niezwykle ważne w przypadku korzystania z małych zwierząt, które wytwarzają małe oscylacje.
   2. Kliknij "OK". Spowoduje to pomiar "Odchylenia ciśnienia spowodowanego każdą objętością oddechową" (PT).
3. W mini konsoli danych wybierz "pomiary cyklu", a następnie "liczba zdarzeń" i kliknij "OK". W ten sposób zostanie przedstawiony pomiar "częstotliwości" (f).
   1. Częstotliwość musi być przeliczona na oddechy/min. Odbywa się to poprzez pomnożenie wartości przez 60 sekund i podzielenie odpowiedzi przez całkowity czas nagrywania (min).
4. W mini klawiaturze wybierz "pomiary cyklu", a następnie "okres" i kliknij "OK". Spowoduje to wyświetlenie pomiaru "całkowitego czasu cyklu oddychania" (T_tot, s).
5. Kolejne kroki służą do tworzenia makroinstrukcji w celu wygenerowania szczytowych wartości inspiracji i czasu wygaśnięcia. Upewnij się, że kursor znajduje się bezpośrednio nad maksimum szczytu/dołka i dodaj komentarz do 9 sekwencyjnych szczytów i dołków. Zacznij od szczytu oscylacji, jak pokazano na rysunku 5.
6. Następnie wybierz okno: konsola danych i kolumna 1. W wyświetlonym oknie kliknij "informacje o zaznaczeniu" w lewej kolumnie, "czas trwania" w prawej kolumnie i kliknij "OK".
7. Wybierz makro znajdujące się w górnej części programu, a następnie rozpocznij nagrywanie. Teraz wybierz polecenia: 'Znajdź', 'Idź', 'Początek pliku' i kliknij 'Znajdź'.
8. Wybierz polecenia: 'Znajdź' i 'Znajdź komentarze'. Wpisz tę samą frazę, która została wpisana w polu komentarza w odpowiednim polu "zawierające". Wybierz zakładkę "Wybierz do poprzedniego punktu" i "Znajdź".
9. Wybierz polecenia: 'Dodaj do konsoli danych'. Następnie wybierz makro: makropolecenia i rozpocznij powtarzanie. Okno liczby powtórzeń, które się pojawi, powinno być ustawione na 9.
10. Wybierz polecenie: 'Znajdź następny'. Wybierz polecenie: 'Dodaj do konsoli danych'. Na koniec wybierz polecenia makr i zakończ powtarzanie.
    1. Teraz wybierz makro i zatrzymaj nagrywanie. Zapisz makro i nazwij je po numerze zwierzęcia. UWAGA: Ustawienie makra dla każdego zwierzęcia pozwala na użycie makra do badań podłużnych i oszczędza czas.
11. Makro można teraz uruchomić, aby uzyskać czas inspiracji (T_i) i wygaśnięcia (T_e) między każdym komentarzem. Dane pojawią się w kanale 1 tabletu danych. Wygaśnięcie i inspiracja następują po sobie, a dane pojawią się w tej kolejności.
    1. Dane należy ręcznie podzielić na wartości inspiracji i wygaśnięcia. Uśrednić cztery wartości danych każdego parametru, aby uzyskać średnią T_{i i T e}.
12. Po wyprowadzeniu wartości podstawowych można obliczyć objętość oddechową (V,_T, ml). Aby uzyskać objętość oddechową, stosuje się równanie Drorbaugha i Fenna⁸:
    V_T (ml)₌ (P_T / P_K) x (V_K) x ((_{T CORE(}P_B -_{P C})) / (_{T CORE}(P_B - P_C) - T_C(P_{B -} P_CORE))))
    
    Gdzie
    V_T: Objętość oddechowa
    P_k: Odchylenie ciśnienia spowodowane każdym wstrzyknięciem 1 ml (patrz krok 2.5)
    _Rdzeń T: Temperatura rdzenia każdego zwierzęcia
    P_C: Ciśnienie pary wodnej w temperaturze komory X Wilgotność względna w komorze
    T_C: temperatura w komorze dla zwierząt
    _Rdzeń P: Ciśnienie w temperaturze ciała (ciśnienie pary wodnej w temperaturze ciała x 1,0)
    PT: Odchylenie ciśnienia spowodowane każdą objętością oddechową
    V_k: Wtrysk objętościowy do kalibracji
    P_B: Ciśnienie barometryczne
     
13. Po obliczeniu objętości oddechowej można również określić następujące parametry:
    • Objętość minutowa (ml/min) = V_T x f
    • Objętość minutowa (ml/min/kg) = (V_T x f) / Masa ciała (kg)
    • V_T (ml/kg) = V_T (ml) / Masa ciała (kg)
    • Wdechowy cykl pracy (%) = T_i / T_tot
    • Natężenie przepływu wdechowego (ml/s) = V_{T / T i}
    • Stosunek czasu wdechu do czasu wydechu = T_i / T_e
    • Całkowity czas cyklu (s) = czas wdechu (s) + czas wydechu (s)

Wyniki

Gdy ta procedura zostanie wykonana poprawnie, w oprogramowaniu do analizy danych tworzony jest spójny ślad oscylacyjny. Procedura zapewnia ślad oddechowy w ciągu kilku minut po konfiguracji z prostymi obliczeniami w celu określenia wymienionych parametrów oddechowych. Rysunek 5 przedstawia odpowiedni ślad oddechowy myszy kontrolnej (zdrowej). Odpowiednie dane oscylacyjne są generowane, gdy zwierzę nie jest aktywnie w ruchu.

UWBP jest niezwykle przydatną i wiarygodną oceną funk...

Dyskusja

Opisana tutaj technika jest nieinwazyjną metodą oceny parametrów oddechowych myszy nieskrępowanych i nieznieczulonych. Mocne strony tego protokołu to jego prostota i precyzja w pomiarze wzdłużnym funkcji płuc przy minimalnej ilości artefaktów. Istnieją jednak pewne ograniczenia i krytyczne kroki, na które należy zwrócić uwagę w związku z procedurą. Po pierwsze i najważniejsze, mysz musi zachować spokój w komorze przez co najmniej pięć sekund. Dodatkowy stres zakłóci wzorzec oddychania myszy, a tym samym zapewni zmienne w...

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Oprogramowanie LabChart 7 (dla komputerów Macintosh)	ADINSTRUMENTS	MLU60/7	używane w kroku 4 protokołu
PowerLab 8/30 (model ML870)	ADINSTRUMENTS	PL3508
Ósemkowy wzmacniacz mostkowy (model ML228)	ADINSTRUMENTS	FE228
BNC do BNC (1 m)	ADINSTRUMENTS	MLAC01
Macintosh OS	Apple Inc.		Mac OS X 10.4 lub nowszy
Cyfrowy termometr doodbytniczy Surgipack	Vega Technologies	MT-918
Przetwornik ciśnienia woluterycznego do trawy PT5A	Grass Instruments Co.	Numer modelu PT5A; nr seryjny L302P4.
Strzykawka 1 ml	Becton Dickinson (BD)	309628
5 ml Serologiczne pipety strzykawkowe	Greiner Bio One	606160	Podłączane za pomocą plastikowej rurki
Wagi	VWR International, Pty Ltd	SHIMAUW220D	Dowolna waga o rozdzielczości 0,1 grama
HM40 Miernik wilgotności i temperatury	Vaisala	HM40A1AB
Barometr	Barometr World	1586
Rurki laboratoryjne	Dow Corning	508-101	Służy do podłączenia kolumny wody do strzykawki i przetwornika ciśnienia
Cylindryczna komora perspex	Dynalab Corp.		Specjalnie zbudowana cylindryczna komora o wymiarach wewnętrznych: 50 mm (szer.) x 1 500 mm (dł.). Z każdej strony znajdują się dwie pokrywy o wymiarach 80 mm (dł.) x 80 mm (szer.). Każda pokrywka ma okrągły otwór o szerokości 60 mm wycięty na powierzchni pokrywy o głębokości 50 mm. Dzięki temu komora mieści się w pokrywie. Gumowy pierścień jest zamontowany wokół każdego otworu pokrywy, w którym zmieści się komora. Do zamocowania strzykawki i przetwornika ciśnienia otwory mają średnicę 5 mm. Do zamocowania sondy wilgotności otwory mają średnicę 25 mm.
80% etanol (4 l)	VWR International, Pty Ltd	BDH1162-4LP