izolacja i wycięcie aorty mysiej; Wszechstronna technika w badaniu chorób sercowo-naczyniowych

Summary

Patologia aorty może prowadzić do ciężkiej zachorowalności i śmiertelności, dlatego uzasadnione są badania nad progresją choroby i potencjalnymi terapiami. W tym miejscu przedstawiamy protokół izolacji i wycięcia mysiej aorty, aby pomóc naukowcom w badaniu chorób sercowo-naczyniowych.

Abstract

Choroba sercowo-naczyniowa to szeroki termin opisujący chorobę serca i/lub naczyń krwionośnych. Głównym naczyniem krwionośnym zaopatrującym organizm w natlenioną krew jest aorta. Aorta może ulec uszkodzeniu w chorobach takich jak miażdżyca i tętniak. Naukowcy badający te choroby skorzystaliby na bezpośredniej obserwacji aorty w celu scharakteryzowania postępu choroby, a także oceny skuteczności potencjalnych środków terapeutycznych. Celem tego protokołu jest opisanie prawidłowej izolacji i wycięcia aorty, aby pomóc badaczom badającym choroby sercowo-naczyniowe. Izolacja i wycięcie aorty pozwala badaczom przyjrzeć się ogólnym zmianom morfometrycznym, a także pozwala im zachować i wybarwić tkankę, aby w razie potrzeby przyjrzeć się zmianom histologicznym. Aorta może być wykorzystana do badań molekularnych w celu oceny ekspresji białek i genów w celu odkrycia celów zainteresowania i mechanizmów działania. Technika ta jest lepsza od metod obrazowania, ponieważ mają one nieodłączne ograniczenia technologiczne i kosztowe. Dodatkowo, pierwotne wyizolowane komórki ze świeżo wyizolowanej i wyciętej aorty mogą pozwolić naukowcom na przeprowadzenie dalszych testów in situ i in vitro. Izolacja i wycięcie aorty ma to do siebie, że konieczne jest poświęcenie zwierzęcia, jednak w tym przypadku korzyści przewyższają szkody, ponieważ jest to najbardziej wszechstronna technika w badaniu chorób aorty.

Introduction

Aorta odgrywa kluczową rolę w funkcjonowaniu układu sercowo-naczyniowego, zaopatrując organizm w natlenioną krew i podobnie jak inne części ciała, jest podatna na choroby. Do powszechnych chorób aorty należą miażdżyca i tętniak, które są wynikiem czynników genetycznych i środowiskowych, w tym diety, palenia tytoniu i siedzącego trybu życia¹. Miażdżyca to odkładanie się płytki nazębnej na bazie wapnia i lipidów na ścianie aorty, zwykle występującej u pacjentów z przewlekłą hiperlipidemią². Tętniaki charakteryzują się degradacją elementów strukturalnych aorty i ścieńczeniem ściany naczynia, a następnie zwiększoną średnicą, co ostatecznie może prowa....

Protocol

Wszystkie procedury na zwierzętach zostały przeprowadzone za zgodą Instytucjonalnego Komitetu ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt Uniwersytetu w Cincinnati oraz zgodnie z Przewodnikiem po opiece i użytkowaniu zwierząt laboratoryjnych z National Institutes of Health (Publikacja NIH nr 85-23, poprawiona w 1996 roku).

1. Przygotowanie myszy

1. Eutanazja polega na wystawieniu zwierzęcia na działanie supraterapeutycznej dawki środka znieczulającego, izofluranu wdychanego w celu uzyskania efektu. Zweryfikuj pierwotną eutanazję poprzez szczypanie palca u nogi jako szkodliwy bodziec. Wtórna metoda eutanazji, przecięcie przepony, nastąpi w na....

Results

Po zakończeniu procedury, pojawi się nienaruszona aorta wychodząca z serca, schodząca do klatki piersiowej i jamy brzusznej z nadal przyczepionymi tętnicami nerkowymi (Rysunek 1A). Stąd aortę można obrazować in situ w celu ilościowego określenia zmian morfometrycznych, które są diagnostyczne w badaniu tętniaków aorty brzusznej (ryc. 1B i 1C). Następnie aortę można usunąć, naprawić i wybarwić, aby przyjrzeć się zmianom histologicznym. Ogólnym i powszechnym zabarw.......

Discussion

Choroba aorty może prowadzić do znacznej patologii ogólnoustrojowej i możliwej śmierci w ciężkich przypadkach. Możliwości leczenia są obecnie ograniczone, dlatego konieczne jest kontynuowanie badań w tej dziedzinie¹⁰. Modele mysie są idealne do dalszego badania progresji choroby i potencjalnych opcji terapeutycznych⁴. W związku z tym pomyślne zakończenie metody opisanej w tym manuskrypcie zapewni badaczom narzędzia do pomiaru progresji choroby i skuteczności leków.

Techn.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Isoflurane	Med-Vet International	#RXISO-250
70% etanol	Fisher	07-678-001
Sól fizjologiczna buforowana fosforanami	Sigma Aldrich	P5368-10PAK
Taśma chirurgiczna	3M	1527-1
Sterylna gaza	Dukal Corporations	1312
Igła 25 gauge	BD
strzykawka 10 ml	BD	309604