Zmodyfikowana tablica z otworami - pomiar zachowania, funkcji poznawczych i interakcji społecznych u myszy i szczurów

Podsumowanie

Ten protokół opisuje zmodyfikowaną tablicę do dołków, która jest zestawem testów behawioralnych, który zawiera cechy otwartego pola i tradycyjnej tablicy do dołków. Układ ten umożliwia analizę różnicową nieuwarunkowanych zachowań małych ssaków laboratoryjnych, a także analizę zdolności poznawczych.

Streszczenie

Ten protokół opisuje zmodyfikowaną tablicę z otworami (mHB), która łączy w sobie cechy tradycyjnej tablicy z otworami i otwartego pola i jest przeznaczona do pomiaru wielu wymiarów bezwarunkowego zachowania u małych ssaków laboratoryjnych (np. myszy, szczury, ryjówki drzewne i małe naczelne). Ten paradygmat jest cenną alternatywą dla stosowania baterii testów behawioralnych, ponieważ w jednym teście można zbadać szerokie spektrum behawioralne profilu behawioralnego zwierzęcia.

Urządzenie składa się z pudełka, reprezentującego 'chroniony' obszar, oddzielonego od przedziału grupowego. Płytka, na której małe cylindry są ułożone naprzemiennie w trzech liniach, jest umieszczona na środku pudełka, reprezentując "niechroniony" obszar ustawienia. Zdolności poznawcze zwierząt można zmierzyć, zarzucając kilka cylindrów na deskę i mierząc pamięć roboczą i referencyjną. Inne nieuwarunkowane zachowania, takie jak zachowania związane z aktywnością, lękiem i zachowaniami społecznymi, można zaobserwować przy użyciu tego paradygmatu. Elastyczność behawioralną i zdolność do przyzwyczajenia się do nowego środowiska można dodatkowo zaobserwować, poddając zwierzęta wielu próbom w mHB, ujawniając wgląd w zdolności adaptacyjne zwierząt.

Ze względu na efekty kolejności testowania w baterii testów behawioralnych, do każdego indywidualnego eksperymentu powinny być używane zwierzęta naiwne. Poprzez testowanie wielu wymiarów behawioralnych w jednym paradygmacie, a tym samym obejście tego problemu, liczba wykorzystywanych zwierząt doświadczalnych jest zmniejszona. Ponadto, unikając izolacji społecznej podczas testów i bez konieczności pozbawiania zwierząt pożywienia, mHB reprezentuje behawioralny system testowy, wywołujący, jeśli w ogóle, bardzo niski poziom stresu.

Wprowadzenie

Zmodyfikowana tablica z otworami (mHB) służy do oceny wielu wymiarów nieuwarunkowanego zachowania, głównie u myszy i szczurów¹. Wiele szeroko stosowanych testów mierzy pojedynczy parametr behawioralny, który nie obejmuje w pełni całego fenotypu wymiaru behawioralnego. MHB został opracowany w oparciu o koncepcję, że gryzonie mogą pokazać swój bogaty repertuar behawioralny tylko w bogatym środowisku testowym² , a tym samym pozwala na złożone obserwacje etologiczne.

Konfiguracja zawiera cechy tradycyjnej tablicy z otworami i testu na otwartym polu, co skutkuje pojedynczym złożonym paradygmatem, który przezwycięża wady baterii testowej (np. w zmniejszeniu liczby wykorzystywanych zwierząt^1,3,4, obejściu możliwych skutków kolejności testu⁵ oraz zmniejszeniu efektu czasowego i kosztów⁶). W przeciwieństwie do większości testów behawioralnych (np. Hånell & Marklund, 2014)⁷, zaletą mHB jest to, że zwierzęta nie muszą być pozbawione pożywienia, aby zwiększyć motywację do rozwiązania zadania. Dodatkowo, izolację społeczną można obejść podczas badań, umieszczając członków grupy zwierzęcia doświadczalnego w (grupowym) przedziale oddzielonym od przedziału badawczego przezroczystą perforowaną przegrodą, umożliwiającą kontakt wzrokowy, słuchowy i węchowy^8,9.

mHB został (farmakologicznie) potwierdzony zarówno dla myszy, jak i szczurów^1,6. Można mierzyć szeroki zakres zachowań, takich jak zachowania unikające, ocena ryzyka, pobudzenie, eksploracja, aktywność lokomotoryczna, przyzwyczajenie, powinowactwo społeczne i poznanie^2,8-10. Dodatkowo mHB można połączyć z testem zahamowania przyjmowania pokarmu, a także testem rozpoznawania nowych obiektów^10,11. Wreszcie, mHB może być również wykorzystany do przeprowadzania eksperymentów stresu społecznego poprzez testowanie zwierząt społecznie pokonanych podczas umieszczania dominującego osobnika w przedziale grupowym^12,13. Ten protokół dla myszy i szczurów zawiera przegląd wielu zastosowań mHB.

Protokół

UWAGA: Eksperymenty zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersyteckiego Centrum Medycznego w Utrechcie i Uniwersytetu w Utrechcie w Holandii. Ponadto doświadczenia na zwierzętach były prowadzone zgodnie z zasadami opieki nad zwierzętami laboratoryjnymi i odnoszą się do Wytycznych dotyczących opieki i wykorzystania ssaków w neuronauce i badaniach behawioralnych. ²⁵

1. Konfiguracja eksperymentalna

UWAGA: Standardowy aparat mHB składa się z szarego pudełka doświadczalnego z PVC (100 x 50 x 50 cm) oddzielonego od dodatkowej komory (50 x 50 x 50 cm), w której członkowie grupy zwierzęcia doświadczalnego mogą być umieszczeni podczas okresu testowania przezroczystą, perforowaną przegrodą¹. Jeśli obecność członków grupy jest niepożądana lub jeśli badane są zwierzęta trzymane indywidualnie, zastąp przezroczystą przegrodę przegrodą wykonaną z szarego PVC (Rysunek 1; patrz także Ohl i wsp. (2001)¹). MHB (z różnymi pomiarami) stosowany do testów poznawczych jest opisany w sekcji 5 protokołu.

1. Umieść tablicę (60 x 20 x 0,5 cm; wykonaną z szarego PVC) na środku pudełka.
   UWAGA: Tablica może zawierać 20 cylindrów (ᴓ 1,5 cm)¹⁴ rozmieszczonych naprzemiennie w dwóch liniach lub 23 cylindry (ᴓ 3 cm)⁸ rozmieszczonych w trzech wierszach.
2. Podziel obszar wokół planszy czarnymi liniami na 10 prostokątów (20 x 15 cm) i 2 kwadraty (20 x 20 cm).
3. Umieść światło sceniczne nad tablicą, aby stworzyć większy kontrast w natężeniu światła między tablicą (reprezentującą obszar niechroniony porównywalny ze środkiem otwartego pola lub jasnym przedziałem w teście przejścia między światłem a ciemnością) a ramką (obszarem chronionym) w celu zwiększenia awersyjnego charakteru tablicy^4,8.
4. Trzymaj zwierzęta w 12-godzinnym odwróconym cyklu dnia i nocy (np. światła wyłączają się o 7:00 i włączają o 19:00).
   UWAGA: Jednak mHB może być również stosowany w konwencjonalnym harmonogramie światła (patrz dyskusja na temat potencjalnych niedociągnięć)^1,6.
5. Wykonaj testy behawioralne w najbardziej aktywnej fazie zwierząt (np. między 10:00 a 14:00)^4,15.
6. Utrzymuj okres przyzwyczajenia wynoszący 2 tygodnie po przybyciu zwierząt do obiektów. W tym okresie ta sama osoba przeprowadzająca eksperyment behawioralny powinna zajmować się zwierzętami cztery razy w tygodniu i uwzględnić wszystkie procedury obchodzenia się ze zwierzętami, które należy wykonać podczas rzeczywistych testów. Ze zwierzętami należy obchodzić się wyłącznie w porze dnia, w której zwierzęta będą później poddawane badaniom.
7. Nagraj eksperymenty w celu przechowywania danych na wideo, a w celu optymalizacji wyników i zmniejszenia zmienności między obserwatorami, przećwicz ocenę behawioralną, korzystając z nagrania wideo z poprzednich eksperymentów². Upewnij się, że wszystkie działania i procedury wykonywane przez obserwatora są ustandaryzowane.

2. Testy behawioralne – bez obecności kolegów z grupy

1. Przeprowadzaj testy behawioralne w pomieszczeniu, w którym zwierzęta są regularnie trzymane (aby uniknąć możliwych skutków transportu do miejsca testów) i zainstaluj cały sprzęt testowy przed przybyciem zwierząt do obiektów (aby przyzwyczaić zwierzęta do obecności sprzętu).
2. Podnieś zwierzę za podstawę ogona z jego domowej klatki i umieść je bezpośrednio w mHB.
3. Umieść każde zwierzę w aparacie w tym samym rogu zwróconym przodem do ściany (jak pokazano na rysunku 1).
4. Pozwól zwierzęciu swobodnie eksplorować mHB przez pewien czas (często 5 minut^1,6,16-18).
5. Poproś doświadczonego obserwatora o ocenę parametrów behawioralnych na żywo za pomocą oprogramowania do oceny behawioralnej. Należy użyć parametrów podanych w tabeli 1.
   UWAGA: Niektóre parametry behawioralne (np. zachowanie motoryczne i eksploracyjne) mogą być oceniane automatycznie, jak np. omówione przez Henry'ego i in. (2010)¹⁹ po niezbędnym dostosowaniu mHB.
6. Po każdej próbie należy czyścić aparaturę wodą z kranu i ręcznikiem papierowym, aby uniknąć błędu systematycznego opartego na sygnałach węchowych.
   UWAGA: Należy pamiętać o możliwych skutkach kolejności przeprowadzania badań w przypadku badania zwierząt trzymanych społecznie^17,20.

3. Testy behawioralne - w obecności kolegów z grupy

1. W przypadku trzymania grupowego należy zmierzyć interakcję ze zwierzęciem doświadczalnym i jego współlokatorami podczas badania.
   1. Umieścić członków grupy w przedziale grupowym przed badaniem zwierzęcia doświadczalnego, aby umożliwić przyzwyczajenie się (głównie 10-30 min^1,12).
      UWAGA: Testowanie w warunkach stresu społecznego jest możliwe poprzez umieszczenie dominującego współwięźnia w klatce w przedziale grupowym podczas testowania społecznie pokonanego osobnika¹³.
   2. Umieścić zwierzę doświadczalne w komorze badawczej i pozwolić mu swobodnie badać mHB, jak opisano w sekcji 2.
      UWAGA: Należy pamiętać o możliwych skutkach kolejności przeprowadzania badań w przypadku badania zwierząt trzymanych społecznie^17,20.
   3. Poproś doświadczonego obserwatora o ocenę parametrów behawioralnych na żywo za pomocą oprogramowania do oceny behawioralnej. Należy użyć parametrów wymienionych w tabeli 1.
   4. Po każdej próbie należy czyścić aparaturę wodą z kranu i ręcznikiem papierowym, aby uniknąć uprzedzeń opartych na sygnałach węchowych.

4. Rozpoznawanie nowych obiektów i hamowanie przyjmowania pokarmu

1. Zapoznaj zwierzęta z przedmiotem (na przykład kostką do gry lub granulką jedzenia) w ich domowej klatce na 2 dni przed eksperymentem.
2. Umieść zaznajomiony przedmiot w aparacie w odległości 2 cm od nowego przedmiotu (na przykład bełtu lub nieznanego jedzenia) w rogu naprzeciwko punktu początkowego.
3. Zmierz czas, w którym zwierzę zbliża się do nowego i znajomego przedmiotu/jedzenia. Należy użyć parametrów podanych w tabeli 1.
4. Po każdej próbie należy czyścić aparaturę wodą z kranu i ręcznikiem papierowym, aby uniknąć uprzedzeń opartych na sygnałach węchowych.

5. Testy kognitywne

1. Umieść mniejszą tablicę (35 x 22 x 1 cm) z 10 cylindrami na środku pudełka (Rysunek 1) do testowania szczurów^3,22. Zmniejsz rozmiar pudełka do 50 x 50 cm do testowania myszy²¹, wkładając przegrodę wykonaną z szarego PVC.
2. Powąchaj wszystkie cylindry o smaku, do którego przyciągane są zwierzęta (np. wanilia) i przynętę z nagrodą (np. kawałkiem migdała, bardzo smaczną nagrodą dla myszy i szczurów) pod siatką, aby zwierzęta nie mogły jej usunąć.
3. Obudź cylindry (często trzy) z kolorowym pierścieniem (kontrastującym z szarym PCV) i zanęć je wyjmowaną nagrodą (np. 0,05 g kawałka migdała).
4. Zapoznawaj zwierzęta z nagrodą codziennie przez 2 dni przed eksperymentem w ich domowej klatce, oferując ją pęsetą i upewniając się, że zwierzęta ją zjedzą.
5. Poproś doświadczonego obserwatora o ocenę parametrów behawioralnych na żywo za pomocą oprogramowania do oceny behawioralnej. Zmierz parametry wymienione w Tabeli 2 oprócz parametrów behawioralnych wymienionych w sekcji 2 (Tabela 1), z wyjątkiem parametrów związanych z rozpoznawaniem obiektów lub hamowaniem przyjmowania pokarmu.
6. Etap 1: Z każdym zwierzęciem wykonuj cztery próby dziennie ze stałymi odstępami między próbami (np. 30-60 min), aż do osiągnięcia stałego czasu na zakończenie próby (tj. gdy wszystkie trzy kawałki migdałów zostaną zebrane).
7. Etap 2: Zbierz i zwab trzy różne cylindry i umieść zwierzęta w zestawie na cztery próby, aby przetestować zdolność uczenia się w odwrotnym kierunku.
8. Po każdej próbie należy czyścić aparaturę wodą z kranu i ręcznikiem papierowym, aby uniknąć uprzedzeń opartych na sygnałach węchowych.

Wyniki

Duża liczba parametrów, które można zmierzyć w mHB, sprawia, że układ ten jest szczególnie odpowiedni do pomiaru licznych wymiarów behawioralnych. Przykładem jest identyfikacja adaptacji behawioralnej do nowego środowiska poprzez wielokrotną ekspozycję na test. Salomons et al. (2010) badali habituację dwóch linii myszy inbredalnych (BALB/cJ i 129P3/J) w mHB w dwóch różnych warunkach oświetlenia (światło czerwone: kontrast między pudełkiem a platformą: 45 lux vs. światło białe: kontrast między pudełkiem a platformą: 115 lux (patrz również sekcja protokołu 1.3))⁴. Myszy BALC/cJ wykazują zmniejszającą się (habituacyjną) latencję do pierwszego wejścia na platformę (patrz Tabela 1) w warunkach światła czerwonego, co przedstawiono na Rysunku 2A. W przeciwieństwie do nich, myszy 129P3/J nie wykazują oznak habituacji w kolejnych próbach. Rysunek 2B przedstawia eksperyment w warunkach światła białego. Myszy BALB/cJ ponownie wykazują zmniejszającą się latencję do pierwszego wejścia na platformę w kolejnych próbach, choć zwierzęta te wykazują wolniejszy wzorzec habituacji w porównaniu z warunkami światła czerwonego. Myszy 129P3/J wykazują nie tylko ponownie upośledzoną habituację, ale także tendencję do sensytyzacji w warunkach światła białego. Podobnie, w badaniu Salomons (2012) myszy 129P2/OlaHsd wykazały upośledzoną elastyczność behawioralną w odpowiedzi na nowość w porównaniu z myszami BALB/cOlaHsd²³. Różnica w zdolności do habituacji staje się zatem wyraźna między dwiema liniami myszy inbredalnych podczas testowania w mHB⁴.

Kognitywną wersję mHB można wykorzystać na przykład do pomiaru zaburzeń poznawczych u myszy. Van der Kooij et al. (2010) zastosowali ten układ do oceny funkcjonowania poznawczego myszy C57BL/6J z łagodną niedotlenieniem i niedokrwieniem mózgu (45 min niedotlenienia; HI-45), ciężkim HI (75 min niedotlenienia; HI-75) oraz myszy z grupy kontrolnej (sham)⁹. Zdolność do ukończenia prób (t.j. znalezienie otworów z przynętą w ciągu 5 min) przedstawiono na Rysunku 3A. Liczbę błędów pamięci krótkotrwałej (powrotne odwiedziny otworu z przynętą), błędów pamięci długotrwałej (odwiedziny otworu bez przynęty) oraz błędów pominięcia (brak odwiedzin otworu z przynętą) przedstawiono odpowiednio na Rysunkach 3B-D.

Aby potwierdzić, że grupa HI-45 nie wykazywała zaburzeń poznawczych, grupę tę przetestowano w zadaniu odwrócenia (reversal task) w porównaniu z grupą kontrolną (sham-controls). Trzy otwory z przynętą przypisano do trzech różnych cylindrów, a zwierzęta poddano testom w ciągu 4 prób. Efekt odwrócenia staje się widoczny przy porównaniu ostatniej próby pierwszego etapu z pierwszą próbą etapu odwrócenia. Czas potrzebny na ukończenie czterech prób odwrócenia daje wskazówkę co do ogólnych wyników. Rysunek 4 przedstawia latencję ukończenia próby dla obu grup, co wykazuje wyraźny ogólny efekt zastosowanego zabiegu. Oznacza to, że w zadaniu odwrócenia w grupie HI-45 rzeczywiście występuje upośledzenie elastyczności poznawczej (ponownego uczenia się), które stało się wykrywalne przy użyciu mHB⁹.

Rycina 1. Schematyczny przegląd zmodyfikowanej tablicy z otworami. (A) Układ składa się z przedziału testowego (pudełka), w którego środku znajduje się (nieosłonięta) tablica oznaczona liniami zygzakowatymi, oraz przedziału grupowego. = nowy obiekt, = znany obiekt, = punkt startowy. (B) Schematyczny przegląd wersji poznawczej zmodyfikowanej tablicy z otworami dla myszy. (C) Widok z boku cylindra używanego w wersji poznawczej zmodyfikowanej tablicy z otworami. Kawałek migdała umieszcza się pod kratą wszystkich cylindrów. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.

Rycina 2. Warunki światła czerwonego lub białego. (A) Latencja do pierwszego wejścia na platformę (średnia + SEM) myszy BALB/cJ i 123P3/J mierzona w warunkach światła czerwonego (klatka 0-5 lux i platforma 45 lux). Analiza ANOVA z powtarzanymi pomiarami z korektą Huyna-Feldta wykazała efekt szczepu (P = 0,025), próby (P <0,001) oraz interakcji próba x szczep (P <0,001). Analizy post hoc: pomiędzy szczepami: * = P <0,0026, pomiędzy dwiema kolejnymi próbami: $ = P <0,0026 (BALB/cJ). (B) Latencja pierwszego wejścia na platformę (średnia + SEM) w warunkach światła białego (klatka 0-5 lux i platforma 120 lux). Analiza ANOVA z powtarzanymi pomiarami z korektą Huyna-Feldta wykazała efekt szczepu (P = 0,031), próby (P <0,001) oraz interakcji próba x szczep (P <0,001). Analizy post hoc: pomiędzy szczepami: * = P <0,0026, pomiędzy dwiema kolejnymi próbami: $ = P <0,0026 (BALB/cJ) i T = P <0,0026 (123P3/J). Rycina została zmodyfikowana na podstawie pracy Salomons et al. 2010⁴. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.

Rysunek 3. Testy poznawcze w mHB (etap 1). Wszystkie wykresy przedstawiają średnią + SEM. (A) Latencja do zakończenia próby (sec) u myszy z grupy sham-control, HI-45 oraz HI-75. (B) Liczba błędów pominięcia, (C) wizyty w nienęconych otworach oraz (D) ponowne wizyty w nęconych otworach. * = P <0.05, ** = P <0.01, *** = P <0.001 sham vs. HI-75, # = P <0.05, ## = P <0.01, ### = P <0.001 HI-45 vs. HI-75. Rysunek zmodyfikowano na podstawie pracy Van der Kooij et al. 2010⁹. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Rysunek 4. Zadanie z nauką odwracania (etap 2). Czas do zakończenia próby (sec) w zadaniu z nauką odwracania (średnia + SEM). Efekty prób: # = P <0.05, ## = P <0.01 (pierwsza próba w zadaniu odwracania vs. próba poprzednia). Efekt leczenia: * = P <0.05, ** = P <0.01 (HI-45 vs. sham). Rysunek został zmodyfikowany na podstawie pracy Van der Kooij et al. 2010⁹.

System	Aktywność	Mierzony parametr
Unikanie	Wpis do rejestru	Częstotliwość, latencja (s), czas trwania (%) i średni czas trwania (s) na platformie
Ocena ryzyka	Rozciągnięte przydzielenia	Częstość i opóźnienie (s) występowania wyciągniętych postaw ciała (w tym kończyn tylnych)
Pobudzenie	Pielęgnacja i przygotowanie zwierząt	Częstość, latencja (s), czas trwania (%) i średni czas trwania (s) autopielęgnacji
	Defekacja	Częstotliwość i latencja (s) wygenerowanych bolusów
	Mikcja	Częstość i latencja (s) mikcji
Kierowana eksploracja	Wizyty w otworach	Częstość i latencja (s) wizyt w cylindrze
	Eksploracja nowego obiektu	Częstość, latencja (s), czas trwania (%) i średni czas trwania (s) eksploracji nowego obiektu
Eksploracja nienakierowana	Pudełko hodowlane	Częstość i latencja (s) wstawania na tylne łapy w klatce (przednie łapy nie dotykają ścianki)
	Karta hodowlana	Częstotliwość i czas utajenia (s) rearingów na platformie
	Badanie otworów	Częstotliwość i latencja (s) eksploracji cylindra
Pamięć	Eksploracja znanych obiektów	Częstotliwość, latencja (s), czas trwania (%) i średni czas trwania (s) eksploracji znanego obiektu
Powinowactwo społeczne	Interakcja grupowa	Częstość, latencja (s), czas trwania (%) oraz średni czas trwania (s) interakcji z przedziałem grupowym
Aktywność lokomotoryczna	Przecięcie linii	Częstość i latencja (s) przekroczeń linii

Tabela 1: Lista parametrów behawioralnych

System pamięci	Parametr	Opis
Pamięć długotrwała	Błędny wybór	Wizyta przy nieprzynębianym cylindrze; nos poniżej krawędzi
Błąd pominięcia	Pominięcie cylindra z przynętą	Brak wizyt w cylindrze z przynętą
Pamięć krótkotrwała	Wielokrotny wybór	Powrót do cylindera z przynętą; nos poniżej krawędzi
Ogólna wydajność	Całkowity czas próby	Czas do momentu odwiedzenia wszystkich cylinderów z przynętą

Tabela 2: Lista parametrów poznawczych

Dyskusja

Paradygmat mHB może być używany do pomiaru wielu wymiarów nieuwarunkowanego zachowania. Protokół może być nieznacznie zmieniony w zależności od celu eksperymentu. W tym protokole omawiamy ustawienia, czasy i pomiary zwykle używane w naszym laboratorium. Jednak w przeszłości stosowano niewielkie odchylenia od wymiarów aparatu, a także ilość cylindrów na płytce może się różnić³. Często w badaniach stosuje się czas testowania wynoszący 5 minut na próbę, ale inne czasy testowania mogą być również odpowiednie, np. zakończenie testu zaraz po pomyślnym zakończeniu próby poznawczej lub wydłużenie czasu testu, jeśli zwierzęta są skrajnie niespokojne lub upośledzone fizycznie. Pora dnia testowania została wybrana tak, aby znajdowała się w warunkach czerwonego światła, ponieważ gryzonie są zwierzętami nocnymi i są najbardziej aktywne we wczesnej fazie ciemności. Roedel i in. (2006) pokazują wpływ testowania fazy jasnej lub ciemnej na wydajność behawioralną i poznawczą u myszy DBA w mHB¹⁶. W innych badaniach przeprowadzono eksperymenty mHB w warunkach białego światła^1,6, jednak należy zauważyć, że testowanie w warunkach białego światła może wywołać hamowanie behawioralne i zakłócenia poznawcze (jak wykazano u myszy DBA)¹⁶.

Tabele 1 i 2 zawierają dużą ilość parametrów behawioralnych, które należy zmierzyć. Podczas analizy danych może to prowadzić do tego, że niektóre parametry wskazują na znaczny wzrost, na przykład "opóźnienia do pierwszego wejścia na pokład", ale nie w innych parametrach tego samego systemu motywacyjnego (w tym przypadku "unikanie"). W niektórych przypadkach może to prowadzić do niejednoznacznych wyników. Guilloux i in. (2011) wprowadzili zintegrowane behawioralne z-score do fenotypowania behawioralnego u myszy²⁴. Za pomocą zintegrowanych behawioralnych z-scores, wiele parametrów może być połączonych w jeden z-score opisujący konkretny system motywacyjny. Kolejne z-score można z kolei łatwiej porównywać w testach behawioralnych i eksperymentach.

Oprócz opisanych cech tego paradygmatu, głębsze zastosowanie stało się widoczne w badaniu Salomons i in. (2012). Porównano przyzwyczajenie do nowości dwóch szczepów myszy (BALC/cJ i 129P3/J) w mHB, wykazując różnicę w elastyczności behawioralnej, wskazującą na nieadaptacyjny profil behawioralny myszy 129P3/J⁴, odzwierciedlający upośledzone zdolności adaptacyjne, a prawdopodobnie nawet patologiczny lęk.

Podsumowując, mHB umożliwia pomiar wielu wymiarów behawioralnych w jednym eksperymencie. Łącząc cechy tradycyjnej tablicy z otworami i testu na otwartym polu, można badać nieuwarunkowane zachowanie, interakcje społeczne, funkcje poznawcze i zdolności adaptacyjne, tj . dobrostan. Test ten może być na przykład wykorzystany do oceny zmian behawioralnych spowodowanych manipulacjami farmakologicznymi i/lub genetycznymi, selektywną hodowlą i zdolnościami adaptacyjnymi. W porównaniu z klasycznymi bateriami testowymi, liczba potrzebnych zwierząt jest wyraźnie zmniejszona, a stres odczuwany przez zwierzęta podczas badania jest wyjątkowo niski.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
		kognitywny mHB	Pudełko do badań poznawczych ma wymiary 50x50 cm poprzez włożenie do standardowego mHB przegrody wykonanej z szarego PVC. Na środku pudełka umieszczona jest mniejsza plansza (35x22x1 cm) z 10 cylindrami. Wszystkie cylindry są pachnące smakiem, który przyciąga zwierzęta (np. wanilia) i wszystkie są przynętą z nagrodą (np. kawałkiem migdała) pod kratką, aby zwierzęta nie mogły jej usunąć. Cylindry (często trzy) są oznaczone kolorowym pierścieniem (kontrastującym z szarym PCV) i są przynętą z wyjmowaną nagrodą (np. 0,05 g kawałka migdała).
		waniliowy	Smak waniliowy rozpuszczony w wodzie (0,02%)
Kamera			Kamera, która generuje wystarczającą jakość wyjściową, aby odtworzyć zachowanie z wideo.
Światło			Światło teatralne, które pozwala na regulację natężenia światła i wymiarów oświetlonej powierzchni.
		do oceny behawioralnej	Oprogramowanie do oceny behawioralnej.