Szczur, ze względu na swoje rozmiary, dostępność i raczej łagodne zachowanie, był wykorzystywany jako model badawczy przez wiele lat. Celem tego protokołu jest wykorzystanie szczura jako niedokrwiennego modelu gojenia się ran skóry, aby zapewnić cenny wgląd w patofizjologię ran przewlekłych.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Demonstracja modelu rany na skórze z niedokrwieniem skóry u szczura
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Skłonność do przewlekłych ran u ludzi wzrasta wraz z wiekiem, stanami chorobowymi takimi jak cukrzyca i upośledzone funkcje układu krążenia, oraz nieznośnym ciśnieniem spowodowanym bezruchem. Opracowano modele zwierzęce, które próbują naśladować te warunki w celu pogłębienia naszego zrozumienia złożoności ran przewlekłych. Opisany tutaj model to model płata niedokrwiennego skóry szczura, który pozwala na długotrwałe zmniejszenie przepływu krwi, co skutkuje ranami, które stają się niedokrwienne i przypominają fenotyp rany przewlekłej (zmniejszone unaczynienie, zwiększony stan zapalny i opóźnione zamknięcie rany). Składa się z dwunożnego płata grzbietowego z 2 ranami niedokrwiennymi umieszczonymi centralnie i 2 ranami niedokrwiennymi bocznymi do płata jako kontrolnymi. Nowatorskim dodatkiem do tego niedokrwiennego modelu płata skóry jest umieszczenie pod płatem silikonowego arkusza, który działa jako bariera i szyna, aby zapobiec rewaskularyzacji i zmniejszyć skurcz w miarę gojenia się ran. Pomimo debaty na temat wykorzystania szczurów do badań nad gojeniem się ran ze względu na ich dość wyraźne różnice anatomiczne i fizjologiczne w porównaniu z ludźmi (tj. obecność mięśnia panniculus carnosus, krótka żywotność, zwiększona liczba mieszków włosowych i ich zdolność do gojenia zakażonych ran), modyfikacje zastosowane w tym modelu sprawiają, że jest on cenną alternatywą dla wcześniej opracowanych modeli płatów skóry niedokrwiennej.
Wprowadzenie
Skuteczne opracowywanie leków i innych metod leczenia ran wymaga odpowiednich modeli in vivo, pomimo znanych problemów z przekładaniem wyników z modeli zwierzęcych na terapie ludzkie1. Poniżej znajduje się opis szczegółowego protokołu stosowania szczurzego modelu gojenia się ran niedokrwiennych skóry w celu zbadania mechanizmów, które pogłębiają zrozumienie patologicznego gojenia się ran. Gatunek szczurów, często wykorzystywany ze względu na jego szeroką dostępność, rozmiar i łagodny charakter, jest wykorzystywany do badań nad gojeniem się ran, ponieważ jest wystarczająco duży, aby zapewnić odpowiedni obszar skóry do zranień po nacięciach i wycięci....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
UWAGA: Zatwierdzenie wszystkich procedur na zwierzętach przedstawionych poniżej zostało uzyskanych od Komitetu ds. Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Południowej Florydy (IACUC) i przestrzega wszystkich wymagań Ustawy o Dobrostanie Zwierząt oraz Przewodnika do Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych.
1. Przygotowanie arkuszy silikonowych i narzędzi chirurgicznych
- Wstępnie przycięte paski (10,5 cm x 3,0 cm) o niewzmocnionej grubości 0,01, folia silikonowa klasy medycznej i sterylizacja w autoklawie.
- Wyczyść i wysterylizuj odpowiednie narzędzia chirurgiczne (nożyczki, kleszcze i zasłony lub ręczniki, aby stworzyć ....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Protokół modelu gojenia ran niedokrwiennych u szczurów powinien zająć około 20 min na zwierzę przy sprawnej realizacji. Przed nałożeniem opatrunku model powinien wyglądać tak, jak przedstawiono na Rysunku 1G. Ważne jest zweryfikowanie, czy płat dwupieńkowy oraz znajdujące się w nim rany są niedokrwione. Napięcie tlenu w tkance podskórnej (PscO2) na poziomie ran było mierzone podczas walidacji tego modelu5 poprzez umieszczenie elektrody polarygraficznej w tkance podskórnej pomiędzy d.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Gojenie się ran u szczurów było często przedmiotem debaty ze względu na ich zdolność do gojenia zakażonych ran i wysoki wskaźnik zmienności międzyzwierzęcej5. Jednym z pierwotnych celów modelu podczas jego opracowywania było zmniejszenie tej zmienności. Modyfikacje szerokości płata, zmniejszenie liczby ran o określonym umiejscowieniu (wyśrodkowanie na klapie ze stałym położeniem czaszkowo-ogonowym) oraz wprowadzenie arkusza silikonowego osiągnęły ten cel. Gojenie się ran przez skurcz również zostało zmniejszon.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
Podziękowania
Autorzy chcieliby podziękować za wsparcie finansowe ze strony University of South Florida, Department of Surgery (Mack Wu, MD, PhD).
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Sil-Tec folia klasy medycznej | Produkty techniczne Inc. | 500-3 | niewzmocnione, grubość 0,01 cala |
| Nożyczki Mini Iris, 8 cm, zakrzywione, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Nici nylonowe Ethilon | Ethicon | 1964G | czarne, rozmiar 4.0, PC-3 16 mm igły (3/8 koła) |
| Laserowy obrazownik dopplerowski | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standardowe obrazowanie przepływu krwi: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | do pobrania za darmo | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
Bibliografia
- Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).
- Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
