Method Article

Określanie preferencji wokalizacji ultradźwiękowej u myszy za pomocą testu odtwarzania dwóch wyborów

DOI:

10.3791/53074

⸱

September 3rd, 2015

 ,  ,  , 
1School of Veterinary Medicine, Azabu University, 2Division of Electric and Information Engineering, Tokyo University of Agriculture and Technology, 3Kato Acoustics Consulting Office

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ultradźwiękowe wokalizacje (USV) u myszy różnią się w zależności od wieku, płci, stanu i tła genetycznego. Wykorzystując dwa emitery ultradźwiękowe nadające jednocześnie w różnych lokalizacjach, ten test dwukrotnego wyboru może ocenić rozpoznawanie myszy i reakcje preferencji na różne cechy USV.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Myszy emitują ultradźwiękowe wokalizacje (USV) podczas różnych warunków, takich jak izolacja szczeniąt i interakcje społeczne dorosłych. Te USV różnią się w zależności od wieku, płci, stanu i tła genetycznego emitującego zwierzę. Chociaż wiele badań charakteryzowało te różnice, to, czy myszy odbiorcze mogą rozróżniać obiektywnie różne USV i wykazywać preferencje dotyczące określonych cech dźwiękowych, pozostaje do wyjaśnienia. Aby ustalić, czy myszy mogą rozróżniać różne cechy USV, niedawno opracowano eksperyment z odtwarzaniem, w którym reakcje preferencji myszy na dwa różne USV można ocenić w postaci preferencji miejsca.

Po pierwsze, zarejestrowano USV od myszy. Następnie nagrane USV zostały zredagowane, odpowiednio przycięte i wyeksportowane jako stereofoniczne pliki dźwiękowe. Następnie amplitudy USV generowane przez dwa emitery ultradźwiękowe użyte w eksperymencie dostosowano do tego samego poziomu ciśnienia akustycznego. Do odtworzenia USV użyto nanokrystalicznych krzemowych emiterów termoakustycznych. Wreszcie, aby zbadać preferencje badanych myszy do wybranych USV, pary dwóch różnych sygnałów USV odtwarzano jednocześnie w pudełku testowym z dwoma opcjami. Poprzez wielokrotne wchodzenie do zdefiniowanej strefy w pobliżu emitera ultradźwięków i przeszukiwanie siatki drucianej przed emiterem, mysz ujawnia swoje preferencje dla jednego dźwięku nad drugim. Model ten pozwala na porównanie atrakcyjności różnych cech USV myszy, w różnych kontekstach.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wiele zwierząt używa wokalizacji do komunikacji wewnątrzgatunkowej. W mięśniu myszy Mus musculus jednym z ważnych rodzajów sygnału komunikacyjnego są wokalizacje ultradźwiękowe (USV), które mają częstotliwości wyższe niż 20 kHz. USV emitowane przez myszy są uważane za składnik rozpoznania społecznego w interakcjach mężczyzna-samica1-4, samica-samica1, 5 i mężczyzna-samiec1, 6. USV są również emitowane przez młode, gdy są odizolowane od matki, co zwiększa jej zachowanie związane z aportowaniem szczeniąt, a tym samym przeżywalność młodych 7. Chociaż w wielu raportach przeanalizowano i skategoryzowano USV myszy8,9

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Uniwersytetu Azabu. Wszystkie eksperymenty przeprowadzono w dźwiękoszczelnej komorze.

1. Przygotowanie zwierząt

  1. Samce do nagrywania
    1. Uzyskaj dojrzałe płciowo samce myszy doświadczone w kryciu.
  2. Tematy kobiece
    1. Uzyskaj dziewicze samice myszy, które były trzymane z 2 do 5 rodzeństwem z miotu w klatce (zwykle w wieku 8 - 12 tygodni).
    2. Wykonuj wymazy z pochwy codziennie, aby określić fazę cyklu rujowego przed badaniem, zgodnie z McLean21. Należy zachować ostrożność, aby zminimalizować stymulację pochwy, aby ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nagrane przez jednego mężczyznę BALB (161 sylab na 20 sekund), jak również szum tła zostały użyte jako dźwięki odtwarzania w reprezentatywnym eksperymencie pokazanym na rysunku 3. W tym eksperymencie wykorzystano 7 samic myszy B6 w wieku 9 tygodni. Aby określić najlepszy czas trwania testowania reakcji kobiet na odtwarzane dźwięki, parametry behawioralne analizowano oddzielnie dla pierwszych i ostatnich pięciu minut z całkowitego 10-minutowego czasu testu.

Po pierwsze, nie był.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W tym przypadku wyniki reprezentatywnego testu wykazały, że samice myszy potrafią rozróżniać sztuczne męskie USV od szumu tła (ryc. 3). Wniosek, jaki należy wyciągnąć z tych wyników, jest taki, że sygnał dyskryminacji znajduje odzwierciedlenie w czasie przebywania w pomieszczeniu i strefie dźwięku oraz w czasie przeszukiwania siatki w ciągu pierwszych 5 minut badania, ale nie w ciągu drugich 5 minut (ryc. 3C, E i F). Dane te wskazują, że myszy przyzwyczajają się do odtwarzanych dźwięków,.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy oświadczają, że nie mają sprzecznych interesów.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez Grant-in-Aid for JSPS Fellows to A.A.; przez Grants-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas for JSPS Fellows (No. 4501 i No. 25132712) dla T.K.; oraz przez grant na projekt badawczy przyznany przez Azabu University. Rysunek 2 jest przedrukowany z Kihara, T., Harada, T., & Koshida, N. Wytwarzanie kompatybilne z waflami i charakterystyka termicznie indukowanych emiterów ultradźwięków z nanokrystalicznego krzemu. W: Sensors and Actuators A: Physical, tom 125, Elsevier, s. 426, (2006), za zgodą Elsevier.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Komora dźwiękoszczelnaMuromachi Kikai
Mała klatkaCLEA JapanCL-0113-1
Klatka środkowaCLEA JapanCL-0103-1
Ultradźwiękowe mikrofony pojemnościowePrzetwornik Avisoft BioacousticsCM16/CMPA
AvisoftBioacousticsUltraSoundGate116H
Audio oprogramowanieAvisoft BioacousticsRECORDER USGH
Adobe Audition 3.0 / Oprogramowanie do edycji dźwiękuAdobe SystemsAdobe Audition 3.0
Nc-Si emiterOryginałniedostępny na rynku, ale planuje się, że tak będzie w najbliższej przyszłości
Przetwornik cyfrowo-analogowyNational InstrumentsNI USB-6251 BNC
Tłumik Oryginał
WzmacniaczYamatake
PCWindows 7 profesjonalnyprocesor Intel® Core i7-2600K @ 3,4 GHz, 8 GB pamięci RAM, 64-bitowy system operacyjny
Rejestrator zdarzeń Excel-macro / Oprogramowanie do oceniania zdarzeńoryginalneZaprogramowany przez Naoto Akagawa &
Kamera
Płyty gumowe (wykonane z żywicy elastomerowej)Tokyo bouonTI-75BK B4Przytnij je do odpowiedniego rozmiaru http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&ca=6&p=3
Roztwór błękitu metylenowego azur eozyny firmy GiemsaMerck Millipore1.09204.0500
CCD Takeru Yamamoto

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Panksepp, J. B., et al. Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice. PLoS One. 2 (4), e351(2007).
  2. Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Ultrasonic VocalizationMouse BehaviorTwo choice TestSound PlaybackUSV RecordingAudio EditingEmitter CalibrationSound Pressure LevelBehavioral MonitoringPreference Testing

Related Articles