Artykuł metodologiczny

Określanie preferencji wokalizacji ultradźwiękowej u myszy za pomocą testu odtwarzania dwóch wyborów

DOI:

10.3791/53074

⸱

3 września 2015

 ,  ,  , 
1School of Veterinary Medicine, Azabu University, 2Division of Electric and Information Engineering, Tokyo University of Agriculture and Technology, 3Kato Acoustics Consulting Office

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ultradźwiękowe wokalizacje (USV) u myszy różnią się w zależności od wieku, płci, stanu i tła genetycznego. Wykorzystując dwa emitery ultradźwiękowe nadające jednocześnie w różnych lokalizacjach, ten test dwukrotnego wyboru może ocenić rozpoznawanie myszy i reakcje preferencji na różne cechy USV.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Myszy emitują ultradźwiękowe wokalizacje (USV) podczas różnych warunków, takich jak izolacja szczeniąt i interakcje społeczne dorosłych. Te USV różnią się w zależności od wieku, płci, stanu i tła genetycznego emitującego zwierzę. Chociaż wiele badań charakteryzowało te różnice, to, czy myszy odbiorcze mogą rozróżniać obiektywnie różne USV i wykazywać preferencje dotyczące określonych cech dźwiękowych, pozostaje do wyjaśnienia. Aby ustalić, czy myszy mogą rozróżniać różne cechy USV, niedawno opracowano eksperyment z odtwarzaniem, w którym reakcje preferencji myszy na dwa różne USV można ocenić w postaci preferencji miejsca.

Po pierwsze, zarejestrowano USV od myszy. Następnie nagrane USV zostały zredagowane, odpowiednio przycięte i wyeksportowane jako stereofoniczne pliki dźwiękowe. Następnie amplitudy USV generowane przez dwa emitery ultradźwiękowe użyte w eksperymencie dostosowano do tego samego poziomu ciśnienia akustycznego. Do odtworzenia USV użyto nanokrystalicznych krzemowych emiterów termoakustycznych. Wreszcie, aby zbadać preferencje badanych myszy do wybranych USV, pary dwóch różnych sygnałów USV odtwarzano jednocześnie w pudełku testowym z dwoma opcjami. Poprzez wielokrotne wchodzenie do zdefiniowanej strefy w pobliżu emitera ultradźwięków i przeszukiwanie siatki drucianej przed emiterem, mysz ujawnia swoje preferencje dla jednego dźwięku nad drugim. Model ten pozwala na porównanie atrakcyjności różnych cech USV myszy, w różnych kontekstach.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wiele zwierząt używa wokalizacji do komunikacji wewnątrzgatunkowej. W mięśniu myszy Mus musculus jednym z ważnych rodzajów sygnału komunikacyjnego są wokalizacje ultradźwiękowe (USV), które mają częstotliwości wyższe niż 20 kHz. USV emitowane przez myszy są uważane za składnik rozpoznania społecznego w interakcjach mężczyzna-samica1-4, samica-samica1, 5 i mężczyzna-samiec1, 6. USV są również emitowane przez młode, gdy są odizolowane od matki, co zwiększa jej zachowanie związane z aportowaniem szczeniąt, a tym samym przeżywalność młodych 7. Chociaż w wielu raportach przeanalizowano i skategoryzowano USV myszy8,9, reakcje behawioralne i mechanizmy neuronalne zwierzęcia przyjmującego zostały mniej udokumentowane10, 11. To ostatnie jest niezbędne do wyjaśnienia biologicznego znaczenia różnych cech USV. Aby ujawnić te mechanizmy, eksperyment z odtwarzaniem jest skuteczną metodą. Ostatnie badania nad odtwarzaniem wykazały, że samice myszy są przyciągane do USV12 i że wolą USV od samców, które różnią się od ich rodziców13, 14.

Ten artykuł wyjaśnia test odtwarzania używany do oceny preferencji USV u myszy. Opracowano zestaw testowy do wyboru dwóch opcji, w którym dwa różne USV mogą być odtwarzane jednocześnie w dwóch komorach obudowy testowej, jak pokazano na rysunku 1. Ten typ skrzynki testowej zapobiega zanieczyszczeniu akustycznemu poprzez podzielenie obszaru testowego na trzy podkomory, za pomocą ołowianych ścianek. Emitery ultradźwięków znajdują się na zewnątrz każdego pomieszczenia. W ścianie między pomieszczeniami i emiterami ultradźwięków znajdują się otwory zasłonięte siatką drucianą. Myszy mogą swobodnie poruszać się w trzech pomieszczeniach i wykazywać zachowanie "przeszukiwania siatki", jakby reagowały na USV odtwarzane przez emitery ultradźwięków. W tym teście myszy przebywają przez różne okresy w pobliżu jednego lub drugiego emitera dźwięku. Parametry te można rejestrować w celu uzyskania czułej miary preferencji dźwiękowych.

Aby odtworzyć USV, użyto nanokrystalicznych krzemowych emiterów termoakustycznych (np. "emiter nc-Si"), tak jak w poprzednich badaniach15-17. Urządzenia te składają się z cienkowarstwowej elektrody grzejnej, nanoporowatej warstwy krzemu i monokrystalicznej płytki krzemowej. Cyfrowy plik dźwiękowy jest konwertowany na sygnał analogowy, a następnie przepuszczany przez elektrodę grzałki. Urządzenie przekształca powstałe w ten sposób zależne od napięcia sygnały termiczne na znaczne ciśnienie akustyczne o niewielkich zniekształceniach. Wyjątkowość tego urządzenia polega na tym, że w przeciwieństwie do zwykłych generatorów dźwięku, które opierają się na wibracjach mechanicznych, może odtwarzać dźwięk bez potrzeby stosowania membrany. Emiter wykazuje płaski poziom ciśnienia akustycznego na częstotliwościach od 20 do 160 kHz (ilustracja 2) i może bardzo dokładnie odtwarzać cyfrowo zarejestrowane mysie USV pod względem czasu trwania, częstotliwości i poziomu ciśnienia akustycznego15, 18, 19.

W reprezentatywnym eksperymencie pokazanym na rysunku 3, samice C57BL/6 (B6) mogły wybierać między samcami USV BALB/c (BALB) a hałasem w tle. Ponadto Rysunek 4 przedstawia wybór samic B6 i BALB między jednoczesnym odtwarzaniem USV przez BALB i samca B6, jak podano w poprzednim badaniu14. Charakterystyka męskich USV różni się między szczepami B6 i BALB20. Jak pokazują te wyniki, atrakcyjność USV można ocenić za pomocą obecnego protokołu, w którym dźwięki są nagrywane od żywej osoby, analizowane akustycznie i odtwarzane innym osobom.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Uniwersytetu Azabu. Wszystkie eksperymenty przeprowadzono w dźwiękoszczelnej komorze.

1. Przygotowanie zwierząt

  1. Samce do nagrywania
    1. Uzyskaj dojrzałe płciowo samce myszy doświadczone w kryciu.
  2. Tematy kobiece
    1. Uzyskaj dziewicze samice myszy, które były trzymane z 2 do 5 rodzeństwem z miotu w klatce (zwykle w wieku 8 - 12 tygodni).
    2. Wykonuj wymazy z pochwy codziennie, aby określić fazę cyklu rujowego przed badaniem, zgodnie z McLean21. Należy zachować ostrożność, aby zminimalizować stymulację pochwy, aby uniknąć ciąży rzekomej.
    3. Wybarwić rozmazy za pomocą Giemsy i określić fazę cyklu rujowego na podstawie obecności lub braku leukocytów, zrogowaciałych komórek nabłonka i jądrzastych komórek nabłonkowych, zgodnie z Nelsonem22.

2. Urządzenia (Rysunek 1)

figure-protocol-1
Rysunek 1. Schemat skrzynki testowej i urządzeń do wyboru dwuwyboru. Myszy mogą dostać się do pomieszczeń A i B przez małe bramki znajdujące się między nimi a strefą neutralną. Skrzynka dwufunkcyjna i dwa emitery ultradźwięków umieszczone są na podłodze dźwiękoszczelnej studzienki. Mikrofon jest zawieszony wewnątrz dźwiękoszczelnej komory. Skrót: PC, komputer osobisty. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

  1. Do nagrywania
    1. Podłącz ultradźwiękowy mikrofon pojemnościowy do komputera za pomocą konwertera A/C USB.
    2. Ustaw poziom wzmocnienia przetwornika A/C na "7".
    3. Nagrywaj dane akustyczne w plikach w formacie 16-bitowym z częstotliwością próbkowania 400 kHz za pomocą oprogramowania do przechwytywania dźwięku.
  2. Do odtwarzania
    1. Podłącz konwerter cyfrowo-analogowy do komputera za pomocą interfejsu USB.
    2. Podłącz dwa wzmacniacze do przetwornika cyfrowo-analogowego za pomocą tłumika. (To ostatnie urządzenie służy do zapobiegania przeciążeniu.)
    3. Podłącz emiter ultradźwięków do każdego amplifier.

3. Nagrywanie USV

  1. Umieść samca myszy w małej (17 x 10 x 11 cm) lub średniej wielkości (21 x 14 x 13 cm) klatce z otworem o średnicy 6 cm w ścianie bocznej i otworem pokrytym siatką drucianą o grubości 0,5 cm. Używając średniej wielkości klatki, zbuduj przegrodę w poprzek środka klatki, aby zmniejszyć obszar.
  2. Nie używaj ściółki w klatce, aby uniknąć szeleszczących dźwięków, które mogłyby zanieczyścić nagrania.
  3. Umieść mikrofon obok siatki.
  4. Rozpocznij ultradźwiękowe monitorowanie wokalizacji za pomocą konfiguracji nagrywania pokazanej w kroku 2.1.
  5. Umieść dojrzałą płciowo samicę myszy w metestrus lub diestrus w klatce z samcem myszy.
  6. Nagrywaj USV przez 3 – 5 minut.

4. Skrzynka testowa

  1. Zbuduj pudełko testowe za pomocą płyty akrylowej (Rysunek 1).
    Uwaga: Pudełko testowe (35 x 20 i x 20 cm wysokości) jest podzielone na trzy komory: strefę neutralną (15 x 20 cm) oraz pomieszczenia A i B (20 x 10 cm każde). Pokoje A i B mają otwór o średnicy 4 cm, który jest pokryty siatką drucianą o średnicy 0,5 cm. Otwory i siatka znajdują się na każdym końcu pomieszczeń A i B. Wykonaj bramy (5 x 5 cm każda) między strefą neutralną a pomieszczeniami A i B.
  2. Aby zapobiec wyciekom dźwięku, zaizoluj każdy emiter ultradźwięków, z wyjątkiem strony skierowanej w stronę siatki, za pomocą gumowych płytek, uszczelniając je do pudełka na obwodzie każdej siatki.
  3. Umieść uszczelki ołowiane po obu stronach ściany między pomieszczeniami A i B, aby zapewnić izolację akustyczną.

5. Przygotowanie do odtwarzania dźwięku

  1. Tworzenie dźwięków z odtwarzania
    1. Przechwyć 20-sekundowy fragment USV z nagranego pliku za pomocą oprogramowania do cyfrowej edycji dźwięku.
    2. Wybierz i przechwyć szum tła (0,35 s) z pliku segmentu USV 20 s. Utwórz plik szumu tła z 20 sekund, powtarzając segment szumu.
    3. Aby odtwarzać oba pliki dźwiękowe jednocześnie, wyeksportuj je jako pojedynczy plik dźwiękowy stereo, z jednym plikiem dla "lewego ucha", a drugim dla "prawego ucha".
    4. Filtruj pliki dźwiękowe za pomocą filtra górnoprzepustowego z odcięciem 40 kHz.
    5. Zmniejsz szumy za pomocą narzędzia do redukcji szumów w oprogramowaniu do przetwarzania końcowego. Wybierz i przechwyć segment pliku, który nie zawiera USV jako profilu redukcji szumów, a następnie uruchom redukcję szumów z poziomem 40.
  2. Kalibracja odtwarzanych dźwięków
    1. Upewnij się, że odstęp między emiterami ultradźwięków a mikrofonem wynosi 10 cm.
    2. Aby skalibrować poziomy ciśnienia akustycznego z emiterów ultradźwięków, należy przeprowadzić monitorowanie ultradźwiękowe przy użyciu konfiguracji opisanej w kroku 2.1. Zmierz poziom ciśnienia akustycznego za pomocą mikrofonu w decybelach (dB).
    3. Za pomocą tłumika i wzmacniaczy dostosuj głośność USV generowanych przez emitery ultradźwięków do tego samego poziomu ciśnienia akustycznego, co męskie USV zarejestrowane w kroku 3.
    4. W przypadku korzystania z dwóch emiterów ultradźwięków i pliku dźwiękowego składającego się z USV i szumu tła, przed wykonaniem testu behawioralnego upewnij się, że oba emitery ultradźwięków wykazują ten sam poziom ciśnienia akustycznego za pomocą dźwięku kalibracyjnego (np. czystego tonu o częstotliwości 75 kHz).
    5. Podczas odtwarzania pliku dźwiękowego składającego się z dwóch strumieni USV, przed testowaniem dostosuj dwa wygenerowane poziomy ciśnienia akustycznego do tego samego poziomu.

6. Test dwukrotnego wyboru

  1. Umieść emitery ultradźwięków za oczkami pudełka testowego.
  2. Zamknij bramy do pomieszczeń A i B akrylową tablicą i przyzwyczaj samicę do strefy neutralnej na 30 minut. Przykryj pudełko akrylową tablicą, aby mysz nie mogła uciec.
  3. Rozpocznij nagrywanie wideo za pomocą kamery CCD zamontowanej nad obudową. Kamera (niepokazana na rysunku 1) obejmuje obszar wszystkich trzech komór.
  4. Zdejmij bramkę i pokrywę i pozwól kobiecie swobodnie eksplorować pudełko testowe, w tym strefy dźwięku.
  5. Gdy samica zbada obie siatki i wróci do strefy neutralnej, zacznij odtwarzać 20-sekundowy plik dźwiękowy wielokrotnie przez 5 lub 10 minut.
  6. Prowadź monitoring behawioralny przez 5 lub 10 minut.
  7. Aby zredukować niepożądane sygnały węchowe zdeponowane przez poprzedniego badanego, wyczyść klatki testowe między testami 70% etanolem.
  8. Losowo zmieniaj miejsce emiterów ultradźwięków A i B, aby uniknąć nieodłącznego efektu stronniczości bocznej w kierunku pomieszczeń A lub B.

7. Analizy statystyczne

  1. Korzystając z oprogramowania do oceny zdarzeń behawioralnych, przeanalizuj następujące parametry: całkowitą liczbę wejść w każdym pomieszczeniu, całkowity czas pobytu w każdej środkowej strefie, całkowity czas przebywania w każdej strefie dźwięku oraz całkowity czas przeszukiwania każdej siatki przed emiterem ultradźwięków. Rysunek 1 ilustruje, co należy rozumieć pod pojęciami "strefa środkowa" i "strefa dźwięku".
    Uwaga: W przypadkach, gdy mysz pozostaje na linii podziału między dwiema strefami (Rysunek 1, linia przerywana), zdecyduj o położeniu według kierunku głowy. Gdy głowa jest skierowana w stronę siatki, jest ona nacinana jako podtrzymanie w strefie dźwięku.
  2. Dla każdego parametru behawioralnego porównaj odpowiedzi dla pokoi A i B za pomocą testu rangi ze znakiem Wilcoxona lub sparowanych testów t o poziomie istotności 0,05.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Nagrane przez jednego mężczyznę BALB (161 sylab na 20 sekund), jak również szum tła zostały użyte jako dźwięki odtwarzania w reprezentatywnym eksperymencie pokazanym na rysunku 3. W tym eksperymencie wykorzystano 7 samic myszy B6 w wieku 9 tygodni. Aby określić najlepszy czas trwania testowania reakcji kobiet na odtwarzane dźwięki, parametry behawioralne analizowano oddzielnie dla pierwszych i ostatnich pięciu minut z całkowitego 10-minutowego czasu testu.

Po pierwsze, nie był...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

W tym przypadku wyniki reprezentatywnego testu wykazały, że samice myszy potrafią rozróżniać sztuczne męskie USV od szumu tła (ryc. 3). Wniosek, jaki należy wyciągnąć z tych wyników, jest taki, że sygnał dyskryminacji znajduje odzwierciedlenie w czasie przebywania w pomieszczeniu i strefie dźwięku oraz w czasie przeszukiwania siatki w ciągu pierwszych 5 minut badania, ale nie w ciągu drugich 5 minut (ryc. 3C, E i F). Dane te wskazują, że myszy przyzwyczajają się do odtwarzanych dźwięków,...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy oświadczają, że nie mają sprzecznych interesów.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez Grant-in-Aid for JSPS Fellows to A.A.; przez Grants-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas for JSPS Fellows (No. 4501 i No. 25132712) dla T.K.; oraz przez grant na projekt badawczy przyznany przez Azabu University. Rysunek 2 jest przedrukowany z Kihara, T., Harada, T., & Koshida, N. Wytwarzanie kompatybilne z waflami i charakterystyka termicznie indukowanych emiterów ultradźwięków z nanokrystalicznego krzemu. W: Sensors and Actuators A: Physical, tom 125, Elsevier, s. 426, (2006), za zgodą Elsevier.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Komora dźwiękoszczelnaMuromachi Kikai
Mała klatkaCLEA JapanCL-0113-1
Klatka środkowaCLEA JapanCL-0103-1
Ultradźwiękowe mikrofony pojemnościowePrzetwornik Avisoft BioacousticsCM16/CMPA
AvisoftBioacousticsUltraSoundGate116H
Audio oprogramowanieAvisoft BioacousticsRECORDER USGH
Adobe Audition 3.0 / Oprogramowanie do edycji dźwiękuAdobe SystemsAdobe Audition 3.0
Nc-Si emiterOryginałniedostępny na rynku, ale planuje się, że tak będzie w najbliższej przyszłości
Przetwornik cyfrowo-analogowyNational InstrumentsNI USB-6251 BNC
Tłumik Oryginał
WzmacniaczYamatake
PCWindows 7 profesjonalnyprocesor Intel® Core i7-2600K @ 3,4 GHz, 8 GB pamięci RAM, 64-bitowy system operacyjny
Rejestrator zdarzeń Excel-macro / Oprogramowanie do oceniania zdarzeńoryginalneZaprogramowany przez Naoto Akagawa &
Kamera
Płyty gumowe (wykonane z żywicy elastomerowej)Tokyo bouonTI-75BK B4Przytnij je do odpowiedniego rozmiaru http://www.piano-bouon.jp/shopping/?pid=1329272401-447630&ca=6&p=3
Roztwór błękitu metylenowego azur eozyny firmy GiemsaMerck Millipore1.09204.0500
CCD Takeru Yamamoto

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Panksepp, J. B., et al. Affiliative behavior, ultrasonic communication and social reward are influenced by genetic variation in adolescent mice. PLoS One. 2 (4), e351(2007).
  2. Scattoni, M. L., Ricceri, L., Crawley, J. N. Unusual repertoire of vocalizations in adult BTBR T+tf/J mice during three types of social encounters. Genes Brain Behav. 10 (1), 44-56 (2010).
  3. Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. The structure and usage of female and male mouse ultrasonic vocalizations reveal only minor differences. PLoS One. 7 (7), e41133(2012).
  4. Merten, S., Hoier, S., Pfeifle, C., Tautz, D. A role for ultrasonic vocalisation in social communication and divergence of natural populations of the house mouse (Mus musculus domesticus). PLoS One. 9 (5), e97244(2014).
  5. Amato, F. R., Moles, A. Ultrasonic vocalizations as an index of social memory in female mice. Behav. Neurosci. 115 (4), 834-840 (2001).
  6. Chabout, J., et al. Adult male mice emit context-specific ultrasonic vocalizations that are modulated by prior isolation or group rearing environment. PLoS One. 7 (1), e29401(2012).
  7. Ehret, G. Infant rodent ultrasounds–a gate to the understanding of sound communication. Behav. Genet. 35 (1), 19-29 (2005).
  8. Holy, T. E., Guo, Z. Ultrasonic songs of male mice. PLoS Biol. 3 (1), e386(2005).
  9. Portfors, C. V. Types and functions of ultrasonic vocalizations in laboratory rats and mice. J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci. 46 (1), 28-34 (2007).
  10. Holfoth, D. P., Neilans, E. G., Dent, M. L. Discrimination of partial from whole ultrasonic vocalizations using a go/no-go task in mice. J. Acoust. Soc. Am. 136 (6), 3401(2014).
  11. Neilans, E. G., Holfoth, D. P., Radziwon, K. E., Portfors, C. V., Dent, M. L. Discrimination of ultrasonic vocalizations by CBA/CaJ mice (Mus musculus) is related to spectrotemporal dissimilarity of vocalizations. PLoS One. 9 (1), e85405(2014).
  12. Hammerschmidt, K., Radyushkin, K., Ehrenreich, H., Fischer, J. Female mice respond to male ultrasonic ‘songs’ with approach behaviour. Biol. Lett. 5 (5), 589-592 (2009).
  13. Musolf, K., Hoffmann, F., Penn, D. J. Ultrasonic courtship vocalizations in wild house mice, Mus musculus musculus. Anim. Behav. 79 (3), 757-764 (2010).
  14. Asaba, A., et al. Developmental social environment imprints female preference for male song in iice. PloS one. 9 (2), e87186(2014).
  15. Uematsu, A., et al. Maternal approaches to pup ultrasonic vocalizations produced by a nanocrystalline silicon thermo-acoustic emitter. Brain Res. 1163, 91-99 (2007).
  16. Okabe, S., et al. The effects of social experience and gonadal hormones on retrieving behavior of mice and their responses to pup ultrasonic vocalizations. Zoolog. Sci. 27 (10), 790-795 (2010).
  17. Okabe, S., et al. Pup odor and ultrasonic vocalizations synergistically stimulate maternal attention in mice. Behav. Neurosci. 127 (3), 432-438 (2013).
  18. Shinoda, H., Nakajima, T., Ueno, K., Koshida, N. Thermally induced ultrasonic emission from porous silicon. Nature. 400 (6747), 853-855 (1999).
  19. Kihara, T., Harada, T., Koshida, N. Wafer-compatible fabrication and characteristics of nanocrystalline silicon thermally induced ultrasound emitters. Sensor. Actuat. A-Phys. 125 (2), 422-428 (2006).
  20. Kikusui, T., et al. Cross fostering experiments suggest that mice songs are innate. PloS One. 6 (3), e17721(2011).
  21. McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification. J. Vis. Exp. (67), e4389(2012).
  22. Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology. Biol. Reprod. 27 (2), 327-339 (1982).
  23. Tomihara, K., et al. Effect of ER-beta gene disruption on estrogenic regulation of anxiety in female mice. Physiol. Behav. 96 (2), 300-306 (2009).
  24. Zheng, Q. Y., Johnson, K. R. Hearing loss associated with the modifier of deaf waddler (mdfw) locus corresponds with age-related hearing loss in 12 inbred strains of mice. Hear. Res. 154 (1-2), 45-53 (2001).
  25. Haga, S., et al. The male mouse pheromone ESP1 enhances female sexual receptive behaviour through a specific vomeronasal receptor. Nature. 466 (7302), 118-122 (2010).
  26. Grimsley, J. M., Monaghan, J. J., Wenstrup, J. J. Development of social vocalizations in mice. PLoS One. 6 (3), e17460(2011).
  27. Sugimoto, H., et al. A role for strain differences in waveforms of ultrasonic vocalizations during male-female interaction. PLoS ONE. 6 (7), (2011).
  28. Hanson, J. L., Hurley, L. M. Female presence and estrous state influence mouse ultrasonic courtship vocalizations. PLoS One. 7 (7), e40782(2012).
  29. Wang, H., Liang, S., Burgdorf, J., Wess, J., Yeomans, J. Ultrasonic vocalizations induced by sex and amphetamine in M2, M4, M5 muscarinic and D2 dopamine receptor knockout mice. PLoS One. 3 (4), (2008).
  30. Moles, A., Kieffer, B. L., D'Amato, F. R. Deficit in attachment behavior in mice lacking the mu-opioid receptor gene. Science. 304 (5679), 1983-1986 (2004).
  31. Hiramoto, T., et al. Tbx1: identification of a 22q11.2 gene as a risk factor for autism spectrum disorder in a mouse. Hum. Mol. Genet. 20 (24), 4775-4785 (2011).
  32. Ey, E., et al. Absence of deficits in social behaviors and ultrasonic vocalizations in later generations of mice lacking neuroligin4. Genes Brain Behav. , (2012).
  33. Roy, S., Watkins, N., Heck, D. Comprehensive analysis of ultrasonic vocalizations in a mouse model of fragile X syndrome reveals limited, call type specific deficits. PLoS One. 7 (9), e44816(2012).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Zachowanie myszytest dwukierunkowego wyboruodtwarzanie d wi k wrejestracja USVedycja audiokalibracja emiterapoziom ci nienia akustycznegomonitorowanie behawioralnetesty preferencji

Powiązane artykuły