Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Biopsja mięśni szkieletowych mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya

17.1K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/53075

⸱

4 marca 2016

 ,  ,  ,  ,  , 
1Academic Geriatric Medicine, University of Southampton, University Hospital Southampton, 2National Institute for Health Research Southampton Biomedical Research Center, University of Southampton and University Hospital Southampton NHS Foundation Trust, 3MRC Lifecourse Epidemiology Unit, University of Southampton, 4National Institute for Health Research Musculoskeletal Biomedical Research Unit, University of Oxford, 5National Institute for Health Research Collaboration for Leadership in Applied Health Research and Care, 6Newcastle University Institute of Ageing and Institute of Health and Society, Newcastle University

W tym artykule

Podsumowanie

Ten film demonstruje technikę przezskórnej biopsji mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya.

Streszczenie

Przezskórna biopsja mięśni przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya jest dobrze znana zarówno w praktyce klinicznej, jak i naukowej. Jest to bezpieczna, skuteczna i dobrze tolerowana technika. Konchotomizm Weila-Blakesleya ma ostrą, gryzącą końcówkę z wgłębieniem o szerokości 4 - 6 mm. Jest wprowadzany przez nacięcie skóry o średnicy 5 - 10 mm i może być manewrowany w celu kontrolowanej penetracji tkanki. Końcówka jest otwierana i zamykana w tkance, a następnie obracana o 90 -180°, aby przeciąć mięsień. Ilość mięśni uzyskanych po wielokrotnym pobraniu próbek może wahać się od 20 mg do 290 mg, które mogą być przetwarzane zarówno do badań histologicznych, jak i molekularnych. Rana musi być sucha, a intensywna aktywność fizyczna ograniczona do minimum przez około 72 godziny, chociaż normalny poziom aktywności może zostać wznowiony natychmiast po zabiegu. Procedura ta jest bezpieczna i skuteczna, gdy zwraca się szczególną uwagę na dobór badanych, pełną aseptykę i opiekę pozabiegową. Zarówno prawy, jak i lewy obszerny boczny nadaje się do biopsji w zależności od preferencji uczestnika.

Wprowadzenie

Uzyskanie mięśni szkieletowych do diagnozy miopatii i innych chorób zwyrodnieniowych nerwowo-mięśniowych opiera się na bezpiecznych i skutecznych metodach, które są akceptowalne i nie obezwładniają pacjentów 1. Dawniej metody pozyskiwania tkanki mięśniowej do analizy obejmowały otwarte biopsje wykonywane w znieczuleniu ogólnym lub pośmiertnie. Techniki te pozwoliły na bezpośrednią wizualizację mięśnia i pozwoliły na biopsję większego fragmentu mięśnia. Biorąc pod uwagę potencjalne niedogodności, jakie techniki te mają dla pacjenta pod względem pobytu w szpitalu i rekonwalescencji, jako alternatywę wprowadzono metody przezskórnej "półotwartej" biopsji mięśni. Technika ta została po raz pierwszy zastosowana przez Duchenne'a (1806-1875), który użył samodzielnie skonstruowanej igły z trokarem i był w stanie uzyskać próbkę mięśni od żywego osobnika bez znieczulenia ogólnego 2. Od tego czasu stosuje się różne formy igieł do biopsji 3,4,5 . Jednak igła do biopsji opracowana przez Bergstrom w 1962 roku jest najczęściej stosowana w praktyce klinicznej; zarówno u dzieci, jak i dorosłych, a także w badaniach 6,7,8,9,10. Posiada ostry trokar, kaniulę tnącą i pręt popychający do wydalania tkanki po biopsji. Stwierdzono, że wydajność mięśni uzyskana w wyniku tej procedury waha się od 25 do 293 mg po wielokrotnym pobraniu próbek 11,9.

Henriksson wprowadził konchotomię Weila-Blakesleya w 1979 roku jako alternatywną metodę półotwartej biopsji mięśni (Ryc. 1) 12. Instrument jest pojedynczą konstrukcją, w przeciwieństwie do konstrukcji Bergstrom i jest zaprojektowany jak kleszcz z ostrą końcówką do gryzienia. Rozmiar końcówki może wynosić od 4 mm do 6 mm szerokości. Kiedy dwie krawędzie końcówki gryzącej przeciwstawiają się, tworzy się wgłębienie, które zapewnia uchwycenie mięśnia. Konchotomia jest wprowadzana przez nacięcie skóry o średnicy 5 - 10 mm i pozwala uniknąć konieczności penetracji mięśnia i powięzi leżącej nad nim, ponieważ skalpel może być użyty do wykonania ścieżki w dół do mięśnia.

Ta metoda pozwala na kontrolowaną penetrację tkanek z wysokim stopniem manewrowości 13,14 . Jest to szczególnie przydatne w miejscach, w których nadmierny nacisk mógłby potencjalnie uszkodzić struktury nerwowo-naczyniowe lub leżące pod nimi struktury kostne, np. w miejscu kości piszczelowej przedniej 15,14. Wydajność mięśni przy użyciu konchotomu może być zmienna i w naszej praktyce po wielokrotnym pobraniu próbek uzyskano 20 - 200 mg mięśni. Jedną z potencjalnych zalet konchotomu w porównaniu z igłą Bergstrom, oprócz wysokiego stopnia zwrotności, jaki oferuje, jest to, że końcówka do gryzienia nie musi być ostrzona ani wymieniana tak często, jak trokar konstrukcji Bergstrom 16 .

Ogólnym celem biopsji mięśni przy użyciu konchotomu Weila Blakesleya jest uzyskanie wystarczającej ilości tkanki mięśniowej, aby umożliwić histochemię i analizę molekularną zarówno do diagnostyki, jak i badań naukowych. Jest to prosta i bezpieczna procedura, której można się łatwo nauczyć. Dzięki tej technice mięśnie odpowiednie do biopsji obejmują biceps, triceps, naramiennik, mięsień łydny, piszczel przedni, płaszczkowaty i krzyżowo-rdzeniowe 17,15,7,18,14 . Najbardziej zewnętrzna część mięśnia obszernego bocznego jest najczęstszym miejscem wykorzystywanym do biopsji, ponieważ omija główne struktury nerwowo-naczyniowe w obrębie uda. Identyfikuje się go około dwóch trzecich wyimaginowanej linii łączącej przedni górny kręgosłup biodrowy i rzepkę. Dane dotyczące morfologii mięśni, na przykład obszar włókien mięśniowych, proporcje włókien mięśniowych, gęstość naczyń włosowatych uzyskana z pobrania próbek obszernych bocznych są szeroko dostępne w literaturze umożliwiającej porównanie między badaniami 11,19 .

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Oświadczenie etyczne: Poniżej znajduje się opis procedury biopsji mięśni, którą stosujemy w naszej instytucji. Procedura biopsji mięśni jest stosowana w badaniu Hertfordshire Sarcopenia, które zostało zatwierdzone przez Hertfordshire Research Committee o numerze 07/Q0204/68. Wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę 20.
UWAGA: Zabieg może wykonać jeden operator, wspomagany przez asystenta, który może zaangażować uczestnika w rozmowę, aby zmniejszyć niepokój i upewnić się, że przez cały czas czuje się komfortowo. Sala zabiegowa powinna być wyposażona w zlewozmywak, leżankę z regulacją wysokości, czyste powierzchnie oraz wózek zabiegowy.

1. Przygotuj uczestnika (Rysunek 2)

  1. Poproś uczestnika, aby położył się wygodnie na wznak na kanapie. Odsłoń preferowane udo od załamania pachwiny. Rozłóż jednorazowy arkusz chłonny pod odsłoniętym udem. Upewnij się, że noga pozostaje wyprostowana i zrelaksowana przez cały zabieg, ale udo jest chwilowo napięte, aby zarysować obszerny boczny.
  2. Zaznacz miejsce zabiegu około dwóch trzecich w dół wyimaginowanej linii od przedniego górnego kręgosłupa biodrowego do rzepki.

2. Przygotuj skórę (Rysunek 2)

  1. Ogolić skórę do średnicy około 4 cm otaczającą proponowane miejsce biopsji za pomocą sterylnego ostrza do golenia i oczyść skórę wacikiem nasączonym alkoholem.
    UWAGA: Ma to na celu zapobieżenie późniejszemu uwięzieniu włosów w ranie podczas procesu gojenia. Ten krok jest opcjonalny zgodnie z preferencjami operatora.
  2. Naciekać skórę i przylegającą powięź w znieczuleniu miejscowym. Użyj igły 25 G, aby podnieść podskórny pęcherzyk 2% lidokainy, a następnie wniknij głębiej w tkankę podskórną za pomocą igły 23 G. Staraj się wniknąć do co najmniej pół do jednego cala w zależności od zawartości tkanki podskórnej w miejscu biopsji. Ta głębokość powinna być wystarczająca, aby zapewnić znieczulenie leżącej nad nią powięzi. Odczekaj 2 - 5 minut, aby środek znieczulający zaczął działać. Potwierdź znieczulenie, delikatnie badając skórę końcówką igły lub ostrza skalpela.

3. Przygotowanie sterylnego pola (Rysunek 2)

  1. Umyj ręce mydłem i utrzymuj ręce w czystości do momentu założenia sterylnego fartuchu. Przykryj ręce sterylnymi rękawiczkami przed utworzeniem sterylnego pola na wózku zabiegowym.
  2. Wysterylizuj miejsce biopsji 2% roztworem chlorheksydyny/alkoholu izopropylowego lub środkiem do dezynfekcji skóry na bazie jodu. Zastosuj sterylną serwetę z otworem samoprzylepnym, aby odsłonić miejsce biopsji, ale także utrzymać sterylne pole.

4. Wykonaj procedurę (Rysunek 2)

  1. Za pomocą skalpela w rozmiarze 11 wykonaj nacięcie o średnicy 5 - 10 mm na skórze i w dół oraz przez leżącą nad nią powięź. Włóż zamkniętą końcówkę gryzącą konchotomu przez nacięcie pod kątem prostym do długiej osi kości udowej, na głębokość średnio od pół do jednego cala. W razie potrzeby wolną ręką przytrzymaj i podeprzyj udo otaczające miejsce biopsji, podczas gdy końcówka konchotomu jest otwierana i zamykana w mięśniu.
  2. Obróć konchotomię o 90 - 180°, aby przeciąć mięsień. Wyjmij konchotomizm i otwórz końcówkę na sterylnej gazie zwilżonej sterylną solą fizjologiczną. W razie potrzeby powtórz procedurę w obrębie pojedynczego miejsca rany, aby uzyskać wystarczającą ilość tkanki mięśniowej. Przenieś gazę do pojemnika umieszczonego na lodzie. Przenieś pojemnik do laboratorium przygotowawczego w celu przetworzenia mięśnia zgodnie z lokalnym protokołem instytucjonalnym.

5. Procedura po (Rysunek 2)

  1. Wywieraj bezpośredni nacisk na ranę przez maksymalnie 5 minut. Zamknij ranę paskami steri, umieszczając je równolegle do rany, a nie pod kątem prostym, aby uniknąć potencjalnego usunięcia tkanki bliznowatej i ponownego otwarcia rany, jeśli paski steri-strips zostaną przypadkowo usunięte. Umieść sterylny opatrunek chłonny na paskach steri-strips i zawiąż dwuwarstwowy bandaż do ucisku i zabezpiecz taśmą.
  2. Wyjaśnij uczestnikowi metodę opatrunku, ponieważ będzie on musiał wykonać zmianę opatrunku 3 - 4 dni po zabiegu. Upewnij się, że uczestnik zdejmie bandaż uciskowy przed pójściem spać późnym wieczorem.

6. Porady dotyczące biopsji

  1. Poinformuj uczestnika, że często występuje pewna sztywność ud, która może być złagodzona przez delikatne ćwiczenia (np. chodzenie). Stosuj proste środki przeciwbólowe, takie jak paracetamol. Ostrzeż uczestnika o przejściowym drętwieniu wokół miejsca biopsji, które może utrzymywać się do dwóch tygodni, a także o potencjalnym powikłaniu zakażenia rany.

7. Instrukcje dotyczące procedury postu tematu

  1. Poproś uczestnika, aby przez 72 godziny unikał intensywnych aktywności (takich jak wspinaczka, bieganie, podnoszenie ciężarów). Poproś uczestnika, aby unikał zanurzania się w wodzie przez 48 - 72 godziny. Należy jednak poinstruować uczestnika, aby podczas kąpieli pod prysznicem owinął miejsce biopsji folią spożywczą lub podobnym materiałem, aby opatrunek był suchy.
  2. Poproś uczestnika o zmianę opatrunku po 3-4 dniach i usunięcie pasków steri-strips po tygodniu.
    UWAGA: Uczestnik powinien otrzymać pisemne instrukcje dotyczące opieki po biopsji, zapasowe opatrunki oraz dane kontaktowe zespołu odpowiedzialnego za wykonanie zabiegu w nagłych wypadkach.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Opisana powyżej procedura jest bezpieczna i dopuszczalna zarówno w warunkach klinicznych, jak i badawczych. Gdy biopsja jest wykonywana w ramach procesu diagnostycznego, mięsień należy dobrać zgodnie z objawami i oznakami osłabienia mięśni u pacjenta. Miejsce biopsji powinno być wolne od wcześniejszych urazów, przykurczów lub instrumentacji 21,1. W badaniach mogą być wymagane ustandaryzowane warunki, takie jak bycie na czczo lub wykluczenie pacjentów z cukrzycą 19. P...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Aby zapewnić bezpieczeństwo uczestnikom i skutecznie przeprowadzić biopsję mięśni, należy zwrócić uwagę na kluczowe kroki w protokole.

Uczestnicy muszą zostać wybrani po dokładnym rozważeniu kryteriów wykluczenia, aby uniknąć powikłań, takich jak krwawienie i słabe gojenie się ran. Niezbędna jest ścisła aseptyka podczas całej procedury. Zastosowanie prawidłowej techniki zapewni komfort uczestnika, zminimalizuje niepożądane urazy tkanek uczestnika i pozwoli na uzyskanie wystarczającej ilości pr...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Żaden nie zadeklarował.

Podziękowania

Pragniemy podziękować uczestnikom badania za umożliwienie tej pracy oraz personelowi NIHR Southampton Biomedical Research Centre i Wellcome Trust Clinical Research Facility, University Hospital Southampton za pomoc w pomiarach badania.

Ta praca była wspierana przez NIHR Southampton Biomedical Research Centre, Nutrition, MRC Lifecourse Epidemiology Unit oraz University of Southampton. Niniejszy raport jest niezależnym badaniem przeprowadzonym przez NIHR BRC Funding Scheme. Poglądy wyrażone w tej publikacji są poglądami autorów, a niekoniecznie poglądami NHS, NIHR lub Departamentu Zdrowia. AMB jest wspierany przez NIHR Clinical Research Fellowship, HPP jest wspierany przez NIHR Southampton Biomedical Research Centre.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Weil-Blakesley conchotomeGebrü der Zepf Medizintechnik, Dü rbheim, NiemcyBrakKońcówka do gryzienia 6 mm
5 ml 2% lidokainyZastosowanie ogólneBrakJedna fiolka o pojemności 5 ml powinna wystarczyć do odpowiedniego znieczulenia
Wacik nasączony alkoholemZastosowanie ogólneBrak
Strzykawka 5 mlZastosowanie ogólneBrak
Igły sterylne 25 G i 23 GZastosowanie ogólneBrak
Sterylny skalpel rozmiar 11Zastosowanie ogólneBrak
Kątowniki z gazy sterylnejZastosowanie ogólneBrak
Chlorek sodu 0,9% 10 mlFannin1122/002/001
Steri-Drape™ Mała serweta z otworem samoprzylepnym3M1020
ChloraPrep 2% w/v /70% v/v roztwór skórny CareFusion270400Dwa
paski Steri-Strip™ 1/4 cala x 3 cale Wzmocnione samoprzylepne zamknięcia skóry3MR1541
PRIMAPORE Sterylny opatrunek 15 cm x 8 cmSmith &  
Nephew 66000318
Bandaż z krepy bawełnianej Hospicrepe 233 7,5 cm x 4,5 mHartmann915562
Elastyczny bandaż kohezyjny Co-Plus LFBSN medyczny2904565
Jednorazowy arkusz chłonnyZastosowanie ogólneBrak
Taśma mikroporowa lub transporowaZastosowanie ogólneBrak
Sterylny fartuch ze sterylnym papierem ręczniki Zastosowanie ogólneBrak
Rękawiczki sterylneZastosowanie ogólneBrak

Bibliografia

  1. Dubowitz, V., Sewry, C. A., Oldfords, A. Muscle Biopsy: A Practical Approach. , 4th ed, Saunders Elsevier. China. (2013).
  2. Parent, A. Duchenne De Boulogne: a pioneer in neurology and medical photography. Can J Neurol Sci. 32 (3), 369-377 (2005).
  3. Hayot, M., Michaud, A., Koechlin, C., Caron, M. A., Leblanc, P., Prefaut, C., Maltais, F. Skeletal muscle microbiopsy: a validation study of a minimally invasive technique. Eur Respir J. 25 (3), 431-440 (2005).
  4. O'Rourke, K. S., Blaivas, M., Ike, R. W. Utility of needle muscle biopsy in a university rheumatology practice. J Rheumatol. 21 (3), 413-424 (1994).
  5. O'Rourke, K. S., Ike, R. W. Muscle biopsy. Curr Opin Rheumatol. 7 (6), 462-468 (1995).
  6. Bergstrom, J. Muscle electrolytes in man. Scand J Clin Lab Invest. 14, Suppl 68. (1962).
  7. Edwards, R., Young, A., Wiles, M. Needle biopsy of skeletal muscle in the diagnosis of myopathy and the clinical study of muscle function and repair. N Engl J Med. 302 (5), 261-271 (1980).
  8. Edwards, R. H. Percutaneous needle-biopsy of skeletal muscle in diagnosis and research. Lancet. 2 (7724), 593-595 (1971).
  9. Edwards, R. H., Round, J. M., Jones, D. A. Needle biopsy of skeletal muscle: a review of 10 years experience. Muscle Nerve. 6 (9), 676-683 (1983).
  10. Shanely, R. A., Zwetsloot, K. A., Triplett, N. T., Meaney, M. P., Farris, G. E., Nieman, D. C. Human skeletal muscle biopsy procedures using the modified Bergstrom technique. J Vis Exp. (91), e51812(2014).
  11. Coggan, A. R. Muscle biopsy as a tool in the study of aging. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 50, 30-34 (1995).
  12. Henriksson, K. G. 'Semi-open' muscle biopsy technique. A simple outpatient procedure. Acta Neurol Scand. 59 (6), 317-323 (1979).
  13. Dorph, C., Nennesmo, I., Lundberg, I. E. Percutaneous conchotome muscle biopsy. A useful diagnostic and assessment tool. J Rheumatol. 28 (7), 1591-1599 (2001).
  14. Poulsen, M. B., Bojsen-Moller, M., Jakobsen, J., Andersen, H. Percutaneous conchotome biopsy of the deltoid and quadricep muscles in the diagnosis of neuromuscular disorders. J Clin Neuromuscul Dis. 7 (1), 36-41 (2005).
  15. Dietrichson, P., Mellgren, S. I., Skre, H. Muscle biopsy with the percutaneous conchotome technique. J Oslo City Hosp. 30 (5), 73-79 (1980).
  16. Dietrichson, P., Coakley, J., Smith, P. E., Griffiths, R. D., Helliwell, T. R., Edwards, R. H. Conchotome and needle percutaneous biopsy of skeletal muscle. J Neurol Neurosurg Psychiatry. 50 (11), 1461-1467 (1987).
  17. Andonopoulos, A. P., Papadimitriou, C., Melachrinou, M., Meimaris, N., Vlahanastasi, C., Bounas, A., Georgiou, P. Asymptomatic gastrocnemius muscle biopsy: an extremely sensitive and specific test in the pathologic confirmation of sarcoidosis presenting with hilar adenopathy. Clin Exp Rheumatol. 19 (5), 569-572 (2001).
  18. Helliwell, T. R., Coakley, J., Smith, P. E., Edwards, R. H. The morphology and morphometry of the normal human tibialis anterior muscle. Neuropathol Appl Neurobiol. 13 (4), 297-307 (1987).
  19. Patel, H. P., Jameson, K. A., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. Developmental influences, muscle morphology, and sarcopenia in community-dwelling older men. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 67 (1), 82-87 (2012).
  20. Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. Hertfordshire Sarcopenia Study: design and methods. BMC Geriatrics. 10 (1), 43(2010).
  21. Anderson, J. R. Recommendations for the biopsy procedure and assessment of skeletal muscle biopsies. Virchows Arch. 431 (4), 227-233 (1997).
  22. Patel, H. P., Syddall, H. E., Martin, H. J., Cooper, C., Stewart, C., Sayer, A. A. The Feasibility and Acceptability of Muscle Biopsy in Epidemiological Studies: Findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS). J Nutr Health Aging. 15 (1), 10-15 (2011).
  23. Charifi, N., Kadi, F., Feasson, L., Costes, F., Geyssant, A., Denis, C. Enhancement of microvessel tortuosity in the vastus lateralis muscle of old men in response to endurance training. J Physiol. 554 (Pt 2), 559-569 (2004).
  24. Frontera, W. R., Suh, D., Krivickas, L. S., Hughes, V. A., Goldstein, R., Roubenoff, R. Skeletal muscle fiber quality in older men and women. Am J Physiol Cell Physiol. 279 (3), C611-C618 (2000).
  25. He, J., Watkins, S., Kelley, D. E. Skeletal muscle lipid content and oxidative enzyme activity in relation to muscle fiber type in type 2 diabetes and obesity. Diabetes. 50 (4), 817-823 (2001).
  26. Patel, H. P., Al-Shanti, N., Davies, L. C., Barton, S. J., Grounds, M. D., Tellam, R. L., Stewart, C. E., Cooper, C., Sayer, A. A. Lean mass, muscle strength and gene expression in community dwelling older men: findings from the Hertfordshire Sarcopenia Study (HSS). Calcif Tissue Int. 95 (4), 308-316 (2014).
  27. Peterson, C. M., Johannsen, D. L., Ravussin, E. Skeletal muscle mitochondria and aging: a review. J Aging Res. 2012, 194821(2012).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Biopsja mięśnia obszerny bocznytechnika biopsji mięśniaprzezskórna biopsja mięśniaprzygotowanie pola jałowegoinfiltracja znieczuleniem miejscowympobieranie próbek tkanekmetoda zamykania ranyanaliza histochemicznaanaliza molekularna
Biopsja mięśni szkieletowych mięśnia obszernego bocznego człowieka przy użyciu konchotomu Weila-Blakesleya
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.