Ocena uczulenia behawioralnego wywołanego kokainą i uwarunkowanej preferencji miejsca u myszy

Podsumowanie

Ten protokół ma na celu umożliwienie badaczom przeprowadzania eksperymentów mających na celu przetestowanie tych aspektów uzależnienia za pomocą testów warunkowej preferencji miejsca i uwrażliwienia lokomotorycznego.

Streszczenie

Uważa się, że satysfakcjonujące doświadczenia z narkotykami tworzą silne skojarzenia kontekstowe i zachęcają do wielokrotnego zażywania. Z kolei powtarzające się narażenie na narkotyki powoduje trwałe zmiany w funkcjonowaniu mózgu osób wrażliwych, a te trwałe zmiany prawdopodobnie służą utrzymaniu nieprzystosowawczych zachowań związanych z poszukiwaniem i zażywaniem narkotyków charakterystycznych dla uzależnienia^/uzależnienia. U gryzoni doświadczenie nagrody i powiązania kontekstowe są często mierzone za pomocą testu preferencji miejsca uwarunkowanego (CPP), w którym mierzy się preferencję dla kontekstu wcześniej sparowanego z lekiem. Z drugiej strony uczulenie behawioralne to wzrost zachowania wywołanego przez leki, które rozwija się stopniowo w miarę powtarzających się ekspozycji. Ponieważ zachowania uczulone mogą być często mierzone po kilku miesiącach abstynencji od narkotyków, w zależności od dawki i długości początkowej ekspozycji, są one uważane za obserwowalne korelaty trwałej plastyczności wywołanej przez lek. Naukowcy odkryli, że testy te są przydatne w określaniu substratów neurobiologicznych pośredniczących w aspektach uzależnienia, a także w ocenie potencjału różnych interwencji w zakłócaniu tych zachowań. Manuskrypt ten opisuje podstawowe, skuteczne protokoły CPP myszy i uwrażliwienia lokomotorycznego na kokainę.

Wprowadzenie

Badania mające na celu zrozumienie uzależnienia od narkotyków za pomocą modeli zwierzęcych muszą przyjmować różne podejścia, aby zająć się każdym z różnych elementów, które utrudniają sukces leczenia, w tym nagrodą/wzmocnieniem/motywacją oraz wycofaniem i nawrotem, a także ogólną uporczywością, która jeszcze bardziej komplikuje te problemy w uzależnieniu. Ponieważ uważa się, że satysfakcjonujące doświadczenia związane z zażywaniem narkotyków lub nadużywaniem motywują do ich późniejszego stosowania, badania koncentrujące się na powiązaniach z kontekstem narkotykowym mogą być szczególnie przydatne do zrozumienia mechanizmów mózgowych, które przyczyniają się do zażywania....

Protokół

Wszystkie procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt w Szpitalu McLean. UWAGA: Poniższy protokół opisuje pojedyncze podejście do CPP i uczulenia lokomotorycznego, którego wiele szczegółów różni się od innych skutecznych protokołów (np. testy fazy jasnej i ciemnej, dawkowanie sekwencyjne i przerywane itp.). Nowicjusze mogą chcieć zacząć od tych protokołów lub po prostu użyć ich jako przewodników, dostosowując zmiany z literatury w oparciu o pytania eksperymentalne. Opisano zautomatyzowane metody pomiaru; Możliwe jest jednak użycie środków niezautomatyzowanych do każdego testu (tj. nagrywania wideo, r....

Wyniki

Reprezentatywne wyniki testu CPP przedstawiono na Rysunku 6 z wykorzystaniem myszy szczepu C57BL/6N typu dzikiego w wieku około dziewięciu tygodni. Projekt badania oparto na mieszanym modelu factorialnym 2 x 3, gdzie zmienną wewnątrzobiektową był Test (przed i po), a zmienną międzyobiektową Leczenie (solanka oraz kokaina w dawkach 5 i 10 mg/kg). Analiza RM ANOVA wykazała istotną interakcję między Testem a Leczeniem (F_2,20=3.68, p<0.05), co zinterpretowano in lieu istotnych efektów .......

Dyskusja

Protokół ten demonstruje metody warunkowej preferencji miejsca i uwrażliwienia lokomotorycznego, z których każda może być wykorzystana przez przeciętne laboratorium do oceny aspektów plastyczności behawioralnej wywołanej przez leki. Podobnie jak w przypadku większości testów behawioralnych, istnieją dodatkowe warte rozważenia kwestie wykraczające poza podstawowy protokół. Po pierwsze, każdą z tych technik można wyobrazić sobie jako mającą dwie fazy, indukcję i ekspresję. "Indukcja" obejmuje rozwój zachowania – w przypadk.......

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule

Nazwa	Firma	Numer katalogowy	Komentarze
Chlorowodorek kokainy USP	Mallinckrodt Pharmaceuticals	0406-1520	Zakup i stosowanie (substancja kontrolowana Schedule II) do celów badawczych wymaga zgodności i licencji zgodnie z prawem stanowym i federalnym.
Preferencja warunkowego miejsca,  Aparat trzykomorowy z ręcznymi drzwiami i światłami do myszy	Med-Associates Inc.	MED-CPP-MS & MED-CPP-3013	Nasze laboratorium używało tych pudełek, jednak dostępnych i akceptowalnych jest wiele alternatywnych pudełek.
PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays	San Diego Instruments	2325-0223 i 7500-0221	Nasze laboratorium mieści te tablice w specjalnie zbudowanych komorach, jak opisano w tekście. Dostępne są alternatywy.
Jednorazowe chusteczki dezynfekujące Sani-Cloth	PDI	13872