Dostrajanie kolumny przepływu z równoległymi segmentami i włączanie detekcji multipleksowej

Summary

Tutaj prezentujemy protokół działania i dostrajania kolumn chromatografii przepływowej z równoległymi segmentami, aby umożliwić detekcję multipleksowaną.

Abstract

Technologia aktywnego przepływu (AFT) to nowa forma technologii kolumnowej, która została zaprojektowana w celu przezwyciężenia niejednorodności przepływu w celu zwiększenia wydajności separacji pod względem wydajności i czułości oraz umożliwienia multipleksowanej detekcji. Ta forma AFT wykorzystuje kolumnę o przepływie równoległym (PSF). Końcówka wylotu kolumny PSF składa się z 2 lub 4 portów, które można multipleksować w celu podłączenia do 4 detektorów. Kolumna PSF umożliwia nie tylko platformę do detekcji multipleksowej, ale także na jednoczesne połączenie detektorów niszczących i nieniszczących, bez dodatkowych przewodów o martwej objętości. Wielkość przepływu przez każdy port można również dostosować za pomocą zarządzania ciśnieniem, aby dopasować ją do wymagań konkretnego detektora (detektorów). Aby osiągnąć detekcję multipleksową za pomocą kolumny PSF, istnieje szereg parametrów, które można kontrolować, aby zapewnić optymalną wydajność separacji i jakość wyników; To są wymiary rurki dla każdego portu, wybór portu dla każdego typu detektora i regulacja przepływu. Protokół ten ma na celu pokazanie, jak używać i dostrajać kolumnę PSF działającą w multipleksowanym trybie wykrywania.

Introduction

Kolumny technologii Active Flow

Kolumny chromatograficzne z technologią aktywnego przepływu (AFT) zostały niedawno opracowane w celu przezwyciężenia nieefektywności separacji związanej z niejednorodnością przepływu^1-6, a także w celu umożliwienia detekcji multipleksowej. W tej konkretnej komunikacji szczegółowo opisujemy proces operacyjny kolumny z równoległym przepływem segmentowym (PSF) z detekcją multipleksową. Kluczowymi zaletami funkcjonalnymi kolumny PSF są: (1) przepływ z promieniowego obszaru centralnego łoża kolumny jest odizolowany od obwodowego lub ściennego obszaru przepływu, (2) objętość fazy ruchome....

Protocol

Uwaga: Ten protokół zawiera instrukcje, jak używać kolumny PSF w systemie HPLC sprzężonym z wieloma detektorami do detekcji multipleksowej. Protokół został napisany przy założeniu, że czytelnik posiada podstawową wiedzę i doświadczenie w zakresie chromatografii i różnych metod detekcji HPLC.

Uwaga: Proszę zapoznać się z kartami charakterystyki substancji niebezpiecznych (MSDS) dla wszystkich materiałów i odczynników przed użyciem (np. MSDS dla metanolu). Należy zapewnić stosowanie wszystkich odpowiednich praktyk bezpieczeństwa podczas obchodzenia się z rozpuszczalnikami i eluentem z wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC). N....

Results

Przeprowadzono multipleksowaną analizę HPLC przy użyciu kolumny AFT w trybie PSF (Rysunek 1) i skonfigurowano tak, jak pokazano na Rysunku 2. Tego typu konfiguracja pozwoliła na jednoczesną analizę próbki kawy przy użyciu UV-Vis, ^DPPH• i MS w trybie całkowitej liczby jonów (TIC). Związki w próbce kawy, które zareagowały na ^DPPH•, można było następnie łatwo dopasować do odpowiedzi UV-Vis i MS-TIC w oparciu o wyrównanie czasu retencji, jak pokazano na rysunku .......

Discussion

Badanie to obejmuje charakterystykę i profilowanie kawy przy użyciu HPLC z detekcją multipleksową z wykorzystaniem kolumny o równoległym przepływie segmentowym (PSF). Multipleksowana HPLC z wykorzystaniem kolumn PSF umożliwia charakterystykę i identyfikację kluczowych jednostek chemicznych poprzez zmniejszenie złożoności danych próbki przy jednoczesnym uzyskaniu większego stopnia informacji specyficznych dla cząsteczki w ułamku czasu potrzebnego przy użyciu konwencjonalnych procesów wielokrotnej detekcji. Kolumna PSF umo.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Przyrząd			Wiele detektorów do wyboru do wykrywania multipleksowego. Wybrane detektory mogą wymagać dodatkowego oprzyrządowania, np. , pompy.
Kolumna HPLC z przepływem równoległym	Thermo Fisher Scientific	Nie zdefiniowano	Wkrótce zostanie skomercjalizowany
Metanol	Dowolna marka		Rurki HPLC Grade
PEEK	Dowolna marka		Różne długości i średnica wewnętrzna
Ograniczniki kolumn	Dowolna marka		Do blokowania nieużywanych portów peryferyjnych.
Obcinak do rur PEEK	Dowolna marka
Waga analityczna	Dowolna marka
Stoper	Dowolna marka
Naczynia do zbierania eluentów	Fiolki na próbki dowolnej marki		1-2 ml mogą być używane jako naczynia do zbierania eluentu