Method Article

Badania kompleksu Ga(III) EOB-DTPA i jego analogu znakowanego radioizotopowo o masie 68Ga

DOI:

10.3791/54334

⸱

August 17th, 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przedstawiono tu procedurę izolacji EOB-DTPA i późniejszej kompleksacji z naturalnym Ga(III) i 68Ga, a także dokładną analizę wszystkich związków i badania nad skutecznością znakowania, stabilnością in vitro i współczynnikiem dystrybucji n-oktanol/woda w radioznakowanym kompleksie.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pokazujemy metodę izolacji EOB-DTPA (kwas 3,6,9-triaza-3,6,9-tris(karboksymetylo)-4-(etoksybenzylo)-undekanodioinowy) z jego kompleksu Gd(III) oraz protokoły przygotowania jego nowego nieradioaktywnego, tj. naturalnego kompleksu Ga(III) oraz radioaktywnego kompleksu 68Ga. Zarówno ligand, jak i kompleks Ga(III) scharakteryzowano za pomocą spektroskopii magnetycznego rezonansu jądrowego (NMR), spektrometrii mas i analizy pierwiastkowej. 68 RozdziałGa otrzymano standardową metodą elucji z generatora 68Ge/68Ga. Przeprowadzono eksperymenty mające na celu ocenę skuteczności znakowania 68Ga EOB-DTPA przy pH 3,8–4,0. Do określenia czystości radiochemicznej znacznika wykorzystano sprawdzone techniki analityczne radiowe TLC (chromatografia cienkowarstwowa) i radiowe HPLC (wysokosprawna chromatografia cieczowa). W pierwszym badaniu lipofilowości znaczników 68Ga określono współczynnik dystrybucji n-oktanol/woda 68gatunków Ga obecnych w roztworze o pH 7,4 metodą ekstrakcji. Przeprowadzono pomiary stabilności znacznika in vitro w różnych pożywkach przy fizjologicznym pH, ujawniając różne tempo rozkładu.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Kwas gadoksetowy, potoczna nazwa kompleksu Gd(III) liganda EOB-DTPA1, jest często stosowanym środkiem kontrastowym w rezonansie magnetycznym wątroby i dróg żółciowych (MRI). 2,3 Ze względu na specyficzny wychwyt przez hepatocyty wątroby i wysoki procent wydalania przez wątrobę i drogi żółciowe, umożliwia lokalizację zmian ogniskowych i guzów wątroby. 2-5 Jednak pewne ograniczenia techniki MRI (np. toksyczność środków kontrastowych, ograniczona możliwość zastosowania u pacjentów z klaustrofobią lub metalowymi implantami) wymagają alternatywnego narzędzia diagnostycznego.

Pozytonowa tomografia emisyjn....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Przygotowanie EOB-DTPA i Ga[EOB-DTPA]

Ostrzeżenie: Przed użyciem należy zapoznać się ze wszystkimi odpowiednimi kartami charakterystyki substancji niebezpiecznych (MSDS) stosowanych rozpuszczalników organicznych, kwasów i zasad. Wszystkie czynności należy wykonywać pod wyciągiem i stosować środki ochrony osobistej (okulary ochronne, rękawice, fartuch laboratoryjny).

  1. Izolacja EOB-DTPA z kwasu gadoksetowego
    1. Umieścić 3 ml 0,25 M roztworu do wstrzykiwań kwasu gadoksetowego do kolby. Dodać 500 mg (5,6 mmol) kwasu szczawiowego do wymieszanego roztworu.
    2. Po mieszaniu przez 1 godzinę przefiltrować zawiesinę przez fr....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ligand EOB-DTPA i nieradioaktywny kompleks Ga(III) analizowano za pomocą spektroskopii 1 H i 13C{1H} NMR, spektrometrii mas i analizy elementarnej. Wyniki wymienione w tabeli 1 i przedstawione na rysunkach 1-6 weryfikują czystość substancji.

Elucja generatora 68Ge/68Ga dała roztwory 400-600 MBq 68Ga. Opisana procedura zna.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

EOB-DTPA jest dostępny w drodze wieloetapowej syntezy33 , ale równie dobrze może być izolowany z dostępnych środków kontrastowych zawierających kwas gadoksetowy. W tym celu centralny jon Gd(III) można wytrącić nadmiarem kwasu szczawiowego. Po usunięciu szczawianu Gd(III) i kwasu szczawiowego ligand można wyizolować przez wytrącanie w zimnej wodzie o pH 1,5. Jednakże w celu zwiększenia wydajności można przeprowadzić chromatografię kolumnową filtratu zamiast niego lub jako procedurę następczą. Każda z metod daje.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają żadnych podziękowań.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
primovistBayer-0,25 M
chlorek galu(III)Sigma-Aldrich Co.
woda (dejonizowana)-urządzenia do dejonizacji wody wodociągowej firmy Auma-Tec GmbH
kwas solny 12 MVWR20252.29
wodorotlenek soduPolskie Odczynniki Chemiczne S.A.
Kwas szczawiowySigma-Aldrich Co.75688
octan etyluBrenntag GmbH10010447
żel krzemionkowyMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0,063-0,2  mm
Żel krzemionkowy TLC 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
metanolVWR20903.55
etanolBrenntag GmbH10018366
eiethyletherVWR23807.468przechowywany na płytkach KOH
roztwór amoniaku (25%)VWR1133.1
Elektroda pHVWR662-1657
jednostka mieszająco-grzewczaPompa Heidolph505-20000-00
Ilmvac GmbH322002
fryta- niestandardowa konstrukcja
Spektrometr NMR Spektrometrmasowy Bruker Coorporation-UltraShield 400
Thermo Fisher Scientific Inc.-
analizator elementarnyHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVectorEA 3000 CHNS
deuterowana D2Oeuriso-topD21499,90% D
Materiał/Sprzęt wymagany do procedur etykietowania
68Ge/68GaITG Isotope Technologies Garching GmbHA150
ScintomicsGmbH-Variosystem
kwas solny 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
woda (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
chlorek sodu (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
octan sodu (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
lodowaty kwas octowy (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
dwuwodny cytrynian soduVEB Laborchemie Apolda10782>98,5%
PS-H+ Cartridge (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.Bufor T2036
PBS (tabletki)Sigma-Aldrich Co.79382
surowica ludzkaSigma-Aldrich Co.H4522z ludzkich męskich kolb plazmowych AB
, kolumn, etc.< / em>niestandardowa elektroda
pHKnick Elektronische Messgerä te GmbH & Co. KG765-Set
pompa binarna (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
Detektor UV/Vis (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)detektor
radioaktywny (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFPkolumna Advanced Chromatography Technologies Ltd.ACE-1110-1503/A100528
Fiolki szklane HPLCGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipetaEppendorf-fiolki
plastikoweSarstedt AG & Co.6542.007
fiolki plastikoweGreiner Bio-One International GmbH717201
activimeterMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2010
pęsetaprojektowania
inkubatorHeraeus Instruments GmbH51008815
mieszalnik wirowyFisons-Whirlimixer
wirówkaHeraeus Instruments GmbH75003360
licznik studni gammaMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed 2100
woda do chromatografiiMerck KGaA1.15333.2500
acetonitryl do chromatografiiMerck KGaA1.00030.2500
kwas trifluorooctowySigma-Aldrich91707
Skaner radioaktywności TLCraytest Isotopenmessgerä te GmbHB00003875wyposażona w detektor tworzywa sztucznego beta
450898810925429 woda generator System pomp i dozowników do na zamówienie

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
  2. Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Gallium 68 TracerEOB DTPA ComplexRadioactive LabelingRadio HPLC AnalysisRadio TLC AnalysisDistribution CoefficientIn Vitro StabilityLigand IsolationGa III ComplexRadiochemical Purity

Related Articles