Artykuł metodologiczny

Manipulacja elektrokortykogramem padaczkowym (ECoG) i snem u szczurów i myszy za pomocą akupunktury

DOI:

10.3791/54896

⸱

22 grudnia 2016

 ,  ,  , 
1Department of Sports, Health & Leisure, College of Tourism, Leisure and Sports, Aletheia University, Tainan Campus, 2Department of Neurology, Mackay Memorial Hospital and Mackay Medical College, 3Department of Veterinary Medicine, School of Veterinary Medicine, National Taiwan University, 4Graduate Institute of Brain & Mind Sciences, College of Medicine, National Taiwan University, 5Graduate Institute of Acupuncture Science, College of Chinese Medicine, China Medical University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ten artykuł demonstruje skuteczność akupunktury, modeli epilepsji i analizy snu u gryzoni. Opisano procedurę akupunktury i identyfikację punktów akupunkturowych. Pilokarpina lub pentylenotetrazol (PTZ) jest stosowany w celu wywołania padaczki. Do analizy snu wykorzystuje się elektrokortykogram (ECoG), elektromiogram (EMG), temperaturę mózgu i zapisy aktywności lokomotorycznej.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Starożytna literatura chińska udokumentowała, że akupunktura ma skuteczne działanie terapeutyczne na epilepsję i bezsenność. Istnieje jednak niewiele badań, które ujawniłyby możliwe mechanizmy stojące za tymi efektami. Aby zbadać wpływ akupunktury na padaczkę i sen, należy zająć się kilkoma kwestiami. Pierwszym z nich jest identyfikacja punktów akupunkturowych, które odpowiadają między ludźmi, szczurami i myszami. Ponadto należy określić głębokość wprowadzenia igły do akupunktury, stopień skręcenia igły w manualnej akupunkturze igłowej oraz parametry stymulacji elektroakupunktury (EA). Aby ocenić wpływ akupunktury na padaczkę i sen, wymagany jest wykonalny model padaczki u gryzoni. Podajemy pilokarpinę do lewego centralnego jądra ciała migdałowatego (CeA) w celu symulacji ogniskowej padaczki skroniowej (TLE) u szczurów. Dootrzewnowe wstrzyknięcie pilokarpiny indukuje padaczkę uogólnioną i stan padaczkowy (SE) u szczurów. Pięć wstrzyknięć IP pentylenotetrazolu (PTZ) w jednodniowym odstępie między każdym wstrzyknięciem skutecznie indukuje spontaniczną padaczkę uogólnioną u myszy. Zapisy elektrokortykogramów (ECoG), elektromiogramów (EMG), temperatury mózgu i aktywności lokomotorycznej są wykorzystywane do analizy snu u szczurów, podczas gdy ECoG, EMG i aktywność lokomotoryczna są wykorzystywane do analizy snu u myszy. Elektrody ECoG są wszczepiane do czołowej, ciemieniowej i przeciwległej kory potylicznej, a termistor jest wszczepiany nad korą mózgową za pomocą chirurgii stereotaktycznej. Elektrody EMG są wszczepiane w mięśnie szyi, a detektor podczerwieni określa aktywność lokomotoryczną. Kryteria kategoryzacji etapów czujności, w tym czuwania, snu z szybkimi ruchami gałek ocznych (REM) i snu bez fazy REM (NREM), opierają się na informacjach z ECoG, EMG, temperatury mózgu i aktywności lokomotorycznej. Szczegółowe kryteria klasyfikacji znajdują się w tekście.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Epilepsja to powszechne zaburzenie neurologiczne, w którym nawracające napady występują przez całe życie pacjenta. Większość nawrotów padaczkowych może być dobrze kontrolowana przez leki przeciwpadaczkowe (AED). Jednak u około 30% pacjentów z padaczką rozwija się padaczka oporna na leczenie1. Padaczka powoduje zaburzenia snu, które mogą dodatkowo nasilać nawroty. Dowody wskazują, że padaczka może zakłócać sen w nocy lub powodować nadmierną senność w ciągu dnia2,3. Nasze wcześniejsze badania wskazują ponadto, że padaczka występująca w czasie zeitgeber (ZT) 0, czyli na początku okresu światła w cyklu światło:ciemność, skraca sen; Pośredniczy w tym hormon uwalniający kortykotropinę (CRH), czynnik homeostatyczny. Padaczka w ZT13 (początek okresu ciemności) zwiększa ekspresję innego czynnika homeostatycznego, interleukiny-1 (IL-1), który wydłuża sen. Rytm okołodobowy snu ulega zmianie, gdy padaczka występuje w ZT6, w środku okresu świetlnego4,5. Z drugiej strony, problemy ze snem dodatkowo nasilają postęp i nawrót padaczki6. Na podstawie powyższych dowodów staramy się wskazać optymalną metodę terapeutyczną, która pozwoli jednocześnie kontrolować padaczkę i zapobiegać zaburzeniom snu u pacjentów z padaczką. Wcześniej odkryliśmy, że elektroakupunktura (EA) z częstotliwością stymulacji 10 Hz, w której pewna ilość prądu jest dostarczana do punktu akupunkturowego przez igłę ze stali nierdzewnej, skutecznie tłumi aktywność padaczkową elektrokortykogramu (ECoG) i zaburzenia snu wywołane padaczką7. EA z częstotliwością stymulacji 100 Hz dodatkowo pogarsza aktywność epilepsyjną i zakłócenia snu u szczurów8,9. Ten udany eksperyment zależy od trzech czynników: po pierwsze, wykonalnego modelu zwierzęcego epileptyka; po drugie, metoda rejestracji i analizy snu gryzoni; i po trzecie, dokładne wykonanie akupunktury i dokładność lokalizacji punktów akupunkturowych.

Epilepsja została podzielona na dwa główne typy: padaczkę ogniskową i padaczkę uogólnioną. Interesuje nas ogniskowa padaczka skroniowa (TLE), padaczka uogólniona, stan padaczkowy (SE) oraz nawroty padaczki spontanicznie uogólnionej. W związku z tym stosuje się różne manipulacje, aby stworzyć odpowiednie modele padaczkowe dla naszych eksperymentów. W celu ustalenia ogniskowego TLE podaje się małą dawkę pilokarpiny do lewego centralnego jądra ciała migdałowatego (CeA). Aby zweryfikować ten model, sześć elektrod ECoG jest wszczepionych w płat czołowy (F1 i F2), ciemieniowy (P1 i P2) i potyliczny (O1 i O2) zarówno w lewej, jak i prawej półkuli, a kolejne dwie elektrody referencyjne (R1 i R2) są umieszczane nad móżdżkiem w obu półkulach. Dodatkowa kaniula prowadząca do mikroiniekcji jest chirurgicznie wszczepiana do lewego CeA (AP, 2,8 mm od bregma; ML, 4,2 mm; DV, 7,8 mm względem bregma). Współrzędne zostały zaczerpnięte z atlasu szczurów Paxinos i Watson10. Jeśli ogniskowe TLE zostanie pomyślnie wywołane, tylko zapis z elektrody na lewej korze ciemieniowej (P1), która znajduje się w pobliżu lewego CeA, powinien uzyskać dominujące ECoG padaczkowe, bez istotnych ECoG padaczkowych zarejestrowanych z innych elektrod ECoG. Dootrzewnowe (IP) wstrzyknięcia pilokarpiny szczurom wywołują padaczkę uogólnioną i SE, ale może to być śmiertelne. Pięć wstrzyknięć IP pentylenotetrazolu (PTZ) w jednodniowym odstępie między każdym wstrzyknięciem skutecznie indukuje spontaniczną uogólnioną padaczkę u myszy, a także zapewnia przeżycie myszy. Dwie przewodowe elektrody ECoG są wszczepiane do kory czołowej i ciemieniowej u myszy w celu odbierania sygnałów ECoG i weryfikacji spontanicznie nawrotu padaczki.

Polisomnografia (PSG) to kompleksowa metoda rejestrowania zmian fizjologicznych, które zachodzą podczas snu, i może obiektywnie klasyfikować sen na różne etapy snu bez szybkich ruchów gałek ocznych (NREM) i szybkich ruchów gałek ocznych (REM). PSG rejestruje parametry funkcji organizmu, w tym fale mózgowe (elektroencefalogram, EEG), ruchy gałek ocznych (elektrookulogram, EOG), tony mięśni szkieletowych (elektromiogram, EMG), rytmy serca (elektrokardiogram, EKG) oraz poziom tlenu we krwi i parametry oddechowe. U szczurów rejestrujemy ECoG, EMG, temperaturę kory mózgowej i aktywność lokomotoryczną, aby sklasyfikować stany czujności na czuwanie, sen NREM i sen REM. Analizę snu u myszy przeprowadza się za pomocą ECoG, EMG i wyników aktywności lokomotorycznej. Szczurom wszczepia się chirurgicznie trzy elektrody śrubowe ECoG w czołowej, ciemieniowej i przeciwległej korze móżdżku za pomocą chirurgii stereotaktycznej. Określenie stanów czujności (czuwanie, sen NREM i sen REM) po akwizycji odbywa się na podstawie parametrów uzyskanych z ECoGs, EMG, temperatury mózgu i aktywności lokomotorycznej. Szczegółowe kryteria kategoryzacji zachowania zwierzęcia zarówno u szczurów, jak i myszy opisano w protokole.

Zarówno szczury, jak i myszy muszą być znieczulone niską dawką zoletilu (25 mg/kg), która stanowi połowę dawki środków znieczulających zwykle podawanych podczas operacji stereotaktycznej, przed wykonaniem manualnej akupunktury lub EA. Taka dawka pozwala zwierzętom obudzić się od 30 do 35 minut po wstrzyknięciu. Na początku okresu ciemności wykonuje się akupunkturę manualną lub EA, ze stałym okresem czasu wynoszącym 30 minut, a każde zwierzę jest kolejno leczone przez dwa do trzech dni. Stymulujące prądy EA są dostarczane do określonego punktu akupunkturowego za pomocą igły ze stali nierdzewnej, która jest wprowadzana do punktu akupunkturowego. Prąd bodźca to ciąg dwufazowych impulsów kwadratowych, w których czas trwania impulsu wynosi 150 ms, a intensywność stymulacji 1 mA. Jeśli do akupunktury manualnej używa się suchej igły, igła wprowadzona do akupunkturów jest drgana 10 razy co 5 minut. Trudną częścią akupunktury manualnej lub EA jest zlokalizowanie punktów akupunkturowych u gryzoni. Lokalizacja punktów akupunkturowych u szczurów lub myszy jest podobna do ich anatomicznej lokalizacji u ludzi. Na przykład obustronne punkty akupunkturowe Fengchi znajdują się w odległości 3 mm od tylnej linii środkowej na szyi, między dwoma uszami, co jest podobne do ich anatomicznego położenia u ludzi11. Co więcej, punkty akupunkturowe o niskiej impedancji na skórze mogą być dodatkowo potwierdzone. Udawana akupunktura lub pozorowana manipulacja EA jest niezbędna do akupunktury lub eksperymentów EA. Akupunktura pozorowana lub pozorowana EA powinna być wykonywana w nieakupunkturowym znajdującym się w pobliżu punktu akupunkturowego, na przykład w pobliżu pachy12.

Aby skutecznie zbadać wpływ akupunktury lub EA na epilepsję i zaburzenia snu wywołane padaczką, muszą być spełnione następujące czynniki: wykonalny model zwierzęcy epilepsji, dokładna analiza epileptycznych ECoG i nawrotów padaczki, metoda klasyfikacji stanów czujności oraz dokładne działanie akupunktury lub EA u gryzoni.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wszystkie protokoły eksperymentalne są zatwierdzane przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt (IACUC) Narodowego Uniwersytetu Tajwańskiego.

1. Chirurgia stereotaktyczna do wszczepiania elektrod ECoG, elektrod EMG, termistora mózgu i kaniuli prowadzącej do wstrzykiwań

  1. Dla szczurów (250 - 350 g, 6- do 8-tygodniowych szczurów Sprague-Dawley)
    1. Znieczulić szczury przez wstrzyknięcie IP z 50 mg/kg zoletylu. Potwierdź prawidłową głębokość znieczulenia, obserwując brak reakcji po uszczypnięciu w tylną łapę. Nałóż maść na oczy, ogol sierść i wysterylizuj skórę roztworem jodu powidonu i 75% etanolem. Wstrzyknij antybiotyk (penicylinę G), aby zapobiec infekcji.
    2. Przygotuj skalpele, nożyczki, hemostatyki, gazy i maszynę do kauteryzacji do operacji. Sterylizować sprzęt chirurgiczny i gazy w autoklawie i kauteryzacji 75% etanolem.
    3. Umieść pasek na uszy w przewodzie słuchowym i zamontuj szczura do stereotaksji.
    4. Za pomocą skalpela wykonaj około 2-centymetrowe nacięcie w linii środkowej czaszki wzdłuż linii między dwoma uszami, poruszając się doogonowo. Przytnij płaty skóry hemostatami, aby odsłonić czaszkę i usunąć tkankę nad czaszką za pomocą skalpela.
    5. Wywierć osiem otworów (F1, F2, P1, P2, O1, O2, R1 i R2), każdy o średnicy około 0.7 mm, w czaszce za pomocą narzędzia obrotowego. Przykręć osiem elektrod ECoG na płacie czołowym, ciemieniowym i potylicznym oraz móżdżku zarówno w lewej, jak i prawej półkuli. Elektrody te służą do wykrywania padaczki ogniskowej.
      1. Użyj następujących współrzędnych dla elektrod rejestrujących: czołowa (F1 i F2): +2,0 mm przed bregmą i +2,5 mm od linii środkowej, ciemieniowa (P1 i P2): -2,0 mm przed bregmą i +3,0 mm od linii środkowej oraz potyliczna (O1 i O2): -5,5 mm przed bregmą i +3,0 mm od linii środkowej.
      2. Umieść dwie elektrody referencyjne (R1 i R2) nad móżdżkiem (-11,0 mm przed bregmą i +4,0 mm od linii środkowej).
    6. W oddzielnych grupach szczurów wywierć trzy otwory i umieść dwie przykręcane elektrody EEG nad prawym płatem czołowym (F2) i ciemieniowym (P2) kory mózgowej o tych samych współrzędnych, jak opisano w kroku 1.1.5.1. Umieść trzecią elektrodę EEG nad lewym móżdżkiem (R1), która służy do uziemienia zwierzęcia i zmniejszenia artefaktów sygnału. Elektrody te służą do potwierdzania padaczki uogólnionej i analizy etapów czujności.
    7. Oddziel skórę szyi i mięśnie i wprowadź dwie elektrody EMG do mięśnia szyi.
    8. Wywierć kolejny otwór w czaszce i umieść kaniulę prowadzącą do mikroiniekcji w lewym CeA (AP, 2,8 mm od bregma; ML, 4,2 mm; DV, 7,8 mm w stosunku do bregma) u szczurów. Współrzędne zostały zaczerpnięte z atlasu szczurów Paxinos i Watson10.
    9. Wywierć większy otwór (o średnicy 1,6 mm) w czaszce i umieść skalibrowany termistor 30 kV na powierzchni kory ciemieniowej, który zostanie później zacementowany, aby monitorować temperaturę kory mózgowej u szczurów.
    10. Użyj gazy i kauteryzacji, aby zatrzymać krwawienie, gdy się pojawi.
    11. Poprowadź izolowane przewody od elektrod ECoG i elektrod EMG do cokołu i podłącz termistor do linki. Zacementuj cokół i poprowadź kaniulę do czaszki za pomocą akrylu dentystycznego.
    12. Leczyć nacięcie miejscowo polisporyną (bacytracyny/siarczan polimyksyny B), aby zapobiec infekcji. Podawaj zwierzętom zarówno ibuprofen, jak i penicylinę G w wodzie przez tydzień po zabiegu.
  2. Dla myszy (20 - 30 g, myszy C57BL/C w wieku od 6 do 8 tygodni)
    1. Znieczulić myszy przez wstrzyknięcie IP z 50 mg/kg zoletilu i potwierdzić właściwą głębokość znieczulenia, obserwując brak odpowiedzi po uszczypnięciu tylnej łapy. Nałóż maść do oczu. Po zgoleniu sierści wysterylizuj skórę roztworem jodu powidonu i 75% etanolem. Wstrzyknij antybiotyk (penicylinę G), aby zapobiec infekcji.
    2. Umieść pasek douszny w przewodzie słuchowym i zamontuj mysz do stereotaksji.
    3. Za pomocą skalpela wykonaj około 1,5-centymetrowe nacięcie w linii środkowej czaszki wzdłuż linii między dwoma uszami, poruszając się doogonowo. Przytnij płaty skóry hemostatykami, aby odsłonić czaszkę i usuń tkankę nad czaszką za pomocą skalpela.
    4. Zrób dwa otwory w czaszce nożyczkami chirurgicznymi i umieść dwie druciane elektrody ECoG na prawym płacie czołowym (F2: +2,0 mm do bregma i +1,5 do linii środkowej) i lewym płacie ciemieniowym (P1: -3,0 mm do bregmy i -2,5 mm do linii środkowej).
    5. Oddziel skórę szyi i mięśnie i wprowadź dwie elektrody EMG do mięśnia szyi.
    6. Podłącz izolowane przewody z drutowych elektrod ECoG i elektrod EMG do końcówek żeńskich i do złącza 2,54 mm, a następnie przycementuj do czaszki za pomocą akrylu dentystycznego.
    7. Leczyć nacięcie miejscowo polisporyną (bacytracyny/siarczan polimyksyny B), aby zapobiec infekcji. Podawaj zwierzętom zarówno ibuprofen, jak i penicylinę G w wodzie przez tydzień po zabiegu.
  3. Pozwolić wszystkim zwierzętom dojść do siebie przez siedem dni przed rozpoczęciem doświadczeń.
  4. Szczury lub myszy trzymane w pomieszczeniach trzymanych oddzielnie, w oddzielnych klatkach do nagrywania, w odizolowanym pomieszczeniu, w którym temperatura jest utrzymywana na poziomie 23 ± 1 °C, a rytm światło-ciemność (L:D) jest kontrolowany w cyklu 12:12 godzin (oświetlenie 40 W x 4 lampy). Zapewnij jedzenie i wodę ad libitum.
  5. Podłącz ECoG, EMG i termistor za pomocą linki do amplifiers tydzień po operacji, aby rozpocząć nagrania.

2. Ustalenie ogniskowej padaczki TLE, SE i spontanicznie nawracającej padaczki

  1. Dla szczurów
    1. Podać 0,5 μl pilokarpiny (2,4 mg/μl) do lewego CeA przez kaniulę prowadzącą iniekcję za pomocą pompy do mikroiniekcji. Szybkość wstrzykiwania powinna być ustawiona na 0,2 μl/min w celu wywołania ogniskowego TLE.
    2. IP wstrzyknąć 300 mg/kg pilokarpiny w celu wywołania padaczki uogólnionej z nawracającym SE.
  2. Dla myszy
    1. IP podaje PTZ (0,035 mg/g masy ciała myszy) w określonym punkcie ZT co drugi dzień. Pięć kolejnych wstrzyknięć spowoduje rozwój padaczki uogólnionej spontanicznie i nawracająco.
  3. Dla szczurów i myszy
    1. Wzmocnij sygnały ECoG o 5 000 i przefiltruj pasmo analogowe w zakresie od 0,1 do 40 Hz.
    2. Użyj płytki konwertującej A/C, aby przekonwertować analogowe sygnały ECoGs na sygnały cyfrowe z częstotliwością próbkowania 128 Hz.
    3. Korzystaj z oprogramowania do oceny wizualnej i analizuj początek i czas trwania padaczki. Zmierz skalę czasu, aby przedstawić czas trwania.
    4. Zdefiniuj padaczkę ECoG na podstawie pojawienia się skoków padaczkowych o amplitudzie większej niż 2 mV i trwających dłużej niż 30 s13.

3. Klasyfikacja stanów czujności

  1. Dla szczurów
    1. Określ stany czujności, korzystając z parametrów uzyskanych z ECoG, EMG, temperatury mózgu i lokomocji w ciągu 12-sekundowego epizodu zapisu. Podłącz ECoG, EMG i termistor za pomocą linki do amplifiers tydzień po operacji, aby rozpocząć nagrywanie. Oceń stany za pomocą niestandardowego oprogramowania zgodnie z krokami 3.1.5 - 3.1.7.
    2. Mierz aktywność lokomotoryczną za pomocą detektora ruchu na podczerwień, integruj sygnały co 1 s i przechowuj sygnały.
    3. Zmierz temperaturę kory mózgowej i zapisz sygnały.
    4. Klasyfikuj stany czujności zgodnie z naszymi wcześniej zdefiniowanymi kryteriami14.
    5. Oceń stan czuwania, korzystając z następujących cech: ECoG o małej amplitudzie z widmami o wysokiej częstotliwości, wyższą mocą delta (0,5 - 4,0 Hz) i niższą mocą theta (6,0 - 9,0 Hz), dominującą aktywnością lokomotoryczną, wysoką aktywnością EMG i stopniowo rosnącą temperaturą kory mózgowej.
    6. Oceń sen NREM, używając następujących cech: ECoG z dominacją fali delta o dużych amplitudach, zmniejszona aktywność EMG, obniżona temperatura kory mózgowej i brak aktywności lokomotorycznej.
    7. Oceń sen REM, korzystając z następujących cech: zmniejszona amplituda ECoG z dominującą częstotliwością theta, nagły wzrost temperatury kory mózgowej, minimalna aktywność EMG i niska aktywność lokomotoryczna z drganiami ciała.
  2. Dla myszy
    1. Powtórz klasyfikację stanów czujności u myszy, jak przeprowadzoną u szczurów, z wyjątkiem tego, że termistor nie rejestruje temperatury kory mózgowej.

4. Wykonywanie akupunktury manualnej i EA u szczurów

  1. Szczur jest znieczulony do protokołu EA.
  2. Zlokalizuj punkt akupunktowy według anatomii i potwierdź niską impedancję skóry w akupunkcie. Światło po wykryciu niskiej impedancji skóry. Uwaga: Punkty akupunkturowe Fengchi znajdują się w odległości 3 mm od tylnej linii środkowej między dwoma uszami, na szyi.
  3. Włóż igły ze stali nierdzewnej do punktów akupunkturowych na głębokości 2 mm.
  4. Szarp wbite igły 10 razy co 5 minut.
  5. Za pomocą funkcjonalnego stymulatora elektrycznego dostarcz ciąg dwufazowych impulsów (każdy o czasie trwania 150 μs) o intensywności 1 mA do punktów akupunkturowych przez igłę.
  6. Wykonaj pozorowaną akupunkturę lub pozorowaną EA jako kontrolę.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Istnieją różne modele szczurów i myszy, które zaspokajają potrzeby różnych typów epilepsji. W celu wywołania ogniskowego TLE podaje się 0,5 μl pilokarpiny (2,4 mg/μl) do lewego CeA. Dominujące ECoG padaczkowe są pozyskiwane z elektrody ECoG na płacie ciemieniowym lewej półkuli (ryc. 1A: b), a rzadkie czynności padaczkowe są wychwytywane z pozostałych elektrod ECoG (ryc. 1A: a, c, d, e i <...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wybór wykonalnego modelu zwierzęcego padaczki jest niezbędny dla każdego celu eksperymentalnego. Jednym z naszych celów jest wyjaśnienie wpływu EA na tłumienie padaczki. EA jest medycyną alternatywną, która może wykazywać działanie terapeutyczne w padaczce i została udokumentowana w starożytnej literaturze chińskiej. Brakuje jednak dowodów naukowych, które by to potwierdzały. Aby określić wpływ EA na padaczkę, skupiliśmy się przede wszystkim na wpływie EA na łagodną padaczkę ogniskową, a nie na ciężkim napadzie uogólnion...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca była wspierana przez granty Ministerstwa Nauki i Technologii (MOST) MOST104-2410-H-002-053 & NSC99-2320-B-002-026-MY3. Rękopis ten został zredagowany i sprawdzony przez pana Briana Changa, który ma doświadczenie w poprawianiu profesjonalnych dokumentów.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Drugs
ZoletilVirbac50 mg/kg i.p.
pilokarpinaSigma-AldrichP6503300 mg/kg i.p.; 1,2 mg mikroiniekcja
PTZSigma-AldrichP65000,035 mg/mysz
polisporynaPfizer
Surgery
ECoGTworzywa sztuczne Jednaelektroda śrubowaE363/20
CokółPlastics OneMS363
KaniulaPlastics OneC315G/spc
TermistorOmega Engineering44008
Dentystyczny akrylowyTempron
StoeltingRamiona duralowe
Urządzenia rejestrujące
ECoG wzmacniaczColbourn InstrumentsV75-01
Płyta A/DNational InstrumentsNI PCI-6033E
Detektory ruchu na podczerwieńBiobserve GmbHwykonane
oprogramowanie ICELUSG-System
AxoScope 10Urządzenia molekularne
Potrzeby akupunktury
Igły ze stali nierdzewnejShanghai Yanglong Medical Articles Co.32 x 1"
Funkcje: Stymulator elektrycznyI.T.O., JapanTrio 300
AcuPenLhasa OMSPointer Excel II
dla szczurów instrument stereotaktyczny na zamówienie

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Regesta, G., Tanganelli, P. Clinical aspects and biological bases of drug-resistant epilepsies. Epilepsy Res. 34 (2-3), 109-122 (1999).
  2. Malow, B. A., Bowes, R. J., Lin, X. Predictors of sleepiness in epilepsy patients. Sleep. 20 (12), 1105-1110 (1997).
  3. Stores, G., Wiggs, L., Campling, G. Sleep disorders and their relationship to psychological disturbances in children with epilepsy. Child Care Health Dev. 24 (1), 5-19 (1998).
  4. Yi, P. L., Tsai, C. H., Lin, J. G., Lee, C. C., Chang, F. C. Kindling stimuli delivered at different times in the sleep-wake cycle. Sleep. 27 (2), 203-212 (2004).
  5. Yi, P. L., Chen, Y. J., Lin, C. T., Chang, F. C. Occurrence of epilepsy at different zeitgeber times alters sleep homeostasis differently in rats. Sleep. 35 (12), 1651-1665 (2012).
  6. Bazil, C. W. Sleep and epilepsy. Semin Neurol. 22, 321-327 (2002).
  7. Yi, P. L., Lu, C. Y., Jou, S. B., Chang, F. C. Low frequency electroacupuncture suppress focal epilepsy and improves epilepsy-induced sleep disruptions. J Biomed Sci. 22, 49(2015).
  8. Yi, P. L., Lu, C. Y., Cheng, C. H., Tsai, Y. F., Lin, C. T., Chang, F. C. Activation of amygdala opioid receptors by electroacupuncture of Feng-Chi (GB20) acupoints exacerbates focal epilepsy. BMC Complement Altern Med. 13, 290(2013).
  9. Yi, P. L., Lu, C. Y., Cheng, C. H., Tsai, Y. F., Lin, C. T., Chang, F. C. Amygdala opioid receptors mediate the electroacupuncture-induced deteriortation of sleep disruptions in epilepsy rats. J Biomed Sci. 20, 85(2013).
  10. Paxinos, G., Watson, W. The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates (4th edition). , Academic Press. San Diego. (1998).
  11. Siu, F. K. W., Lo, S. C. L., Leung, M. C. P. Electro-acupuncture potentiates the disulphide-reducing activities of thioredoxin system by increasing thioredoxin expression in ischemia-reperfused rat brains. Life Sci. 77 (4), 386-399 (2005).
  12. Yi, P. L., Tsai, C. H., Lin, J. G., Liu, H. J., Chang, F. C. Effects of electroacupuncture at 'Anmian' (extra) acupoints on sleep activities in rats: the implication of the caudal nucleus tractus solitaries. J Biomed Sci. 11 (5), 579-590 (2004).
  13. Jou, S. B., Kao, I. F., Yi, P. L., Chang, F. C. Electrical stimulation of left anterior thalamic nucleus with high-frequency and low-intensity currents reduces the rate of pilocarpine-induced epilepsy in rats. Seizure. 22 (3), 221-229 (2012).
  14. Chang, F. C., Opp, M. R. Blockade of corticotropin-releasing hormone receptors reduces spontaneous waking in the rat. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 275 (3), Pt 2 793-802 (1998).
  15. Cheng, C. H., Yi, P. L., Lin, J. G., Chang, F. C. Endogenous opiates in the nucleus tractus solitaries mediate electroacupuncture-induced sleep activities in rats. Evid Based Complement Alternat Med. 2011, 159209(2011).
  16. Tsui, P., Leung, M. C. Comparison of the effectiveness between manual acupuncture and electro-acupuncture on patients with tennis elbow. Acupunct Electrother Res. 27 (2), 107-117 (2002).
  17. Napadow, V., Makris, N., Liu, J., Kettner, N. W., Kwong, K. K., Hui, K. K. Effects of electroacupuncture versus manual acupuncture on the human brain as measured by fMRI. Hum Brain Mapp. 24 (3), 193-205 (2005).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Epileptyczny ECoGefekty akupunkturychirurgia stereotaktycznawstrzykiwanie pilkarpinyanaliza snuelektroakupunkturaelektrody ECoGelektrody EMGpunkty akupunktury Feng Chigryzoni model epilepsji

Powiązane artykuły