Artykuł metodologiczny

Przygotowanie i ocena chelatów trójzębnych znakowanych 99 mTc do wstępnego celowania przy użyciu chemii bioortogonalnej

DOI:

10.3791/55188

⸱

4 lutego 2017

 ,  ,  ,  , 
1Department of Chemistry and Chemical Biology, McMaster University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tutaj opisujemy protokół znakowania radioaktywnego i testowania in vivo pochodnych chelatu tetrazyny tridentate 99mTc(I) do wstępnego celowania i chemii bioortogonalnej.

Streszczenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Wstępne celowanie w połączeniu z chemią bioortogonalną staje się skutecznym sposobem tworzenia nowych radiofarmaceutyków. Spośród dostępnych metod, cykloaddycja Dielsa-Aldera (IEDDA) z odwróconym zapotrzebowaniem elektronowym między znakowanymi radioaktywnie tetrazynami a transcyklooktenem (TCO) połączonym z biomolekułą okazała się wysoce skutecznym podejściem bioortogonalnym do obrazowania określonych celów biologicznych. Pomimo faktu, że technet-99m pozostaje najczęściej stosowanym izotopem w diagnostyce medycyny nuklearnej, brakuje metod otrzymywania tetrazyn znakowanych 99mTc. W niniejszym artykule przedstawiono preparat rodziny pochodnych trydentu-chelatu-tetrazyny i ich kompleksów Tc(I). Te nieznane dotąd związki znakowano radioaktywnie 99 mTc metodą wspomaganą mikrofalami z wydajnością radiochemiczną od 31% do 83%. Produkty są stabilne w soli fizjologicznej i PBS i szybko reagują z pochodnymi TCO in vitro. Ich zdolność do wstępnego celowania in vivo wykazano przy użyciu pochodnej TCO-bisfosfonianu (TCO-BP), która lokalizuje się w regionach aktywnego metabolizmu kości lub urazu. W badaniach na myszach 99mTc-tetrazyny wykazywały wysokie stężenia aktywności w stawach kolanowych i barkowych, czego nie obserwowano, gdy eksperymenty prowadzono przy braku TCO-BP. Ogólny wychwyt w narządach innych niż docelowe i farmakokinetyka różniły się znacznie w zależności od charakteru łącznika i polarności chelatu.

Wprowadzenie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

99mTc pozostaje dominującym radioizotopem stosowanym w diagnostyce nuklearnej, z ponad 50 milionami procedur obrazowania przeprowadzanych rocznie na całym świecie1,2,3. Większość z 99 mlnleków Tc stosowanych klinicznie to radiofarmaceutyki typu perfuzyjnego. Istnieje ograniczona liczba aktywnie ukierunkowanych związków, w których 99mTc jest kierowane w celu związania określonego biomarkera poprzez ligację z konstruktem docelowym. Tworzenie celowanych radiofarmaceutyków 99mTc jest często utrudnione przez wpływ kompleksów 99mTc-ligand na zdolność cząsteczki docelowej do wiązania biomarkera będącego przedmiotem zainteresowania lub okres półtrwania izotopów nie jest wystarczająco długi, aby można go było stosować z biomolekułami o większej masie cząsteczkowej, takimi jak przeciwciała. To ostatnie zwykle wymaga kilku dni przed uzyskaniem obrazów, aby biomolekuła mogła usunąć się z tkanek niedocelowych. Kierowanie wstępne oferuje alternatywne podejście do pokonywania tych wyzwań.

Wykazano, że wstępne celowanie w połączeniu z chemią bioortogonalną jest skutecznym sposobem na opracowanie nowych sond do obrazowania molekularnego zarówno dla fluorescencji, jak i radioobrazowania4,5,6,7,8. Reakcja Dielsa-aldera z odwrotnym zapotrzebowaniem elektronowym (IEDDA) między pochodnymi 1,2,4,5-tetrazyny (Tz) i transcyklooktenu (TCO), jak pokazano na rysunku 1, okazała się szczególnie efektywna6. Reakcja IEDDA z tymi składnikami może wykazywać szybką kinetykę w PBS (k2 ≈ 6 000 M-1 s-1) i wysoką selektywność, dzięki czemu idealnie nadaje się do zastosowań wstępnego celowania in vivo9,10.

Najczęstszym stosowanym podejściem jest podawanie wektora docelowego pochodzącego z TCO, a po upływie wystarczającego okresu opóźnienia, podawana jest radioznakowana tetrazyna. Zgłoszono znakowane radioaktywnie tetrazyny oparte na 11C, 18F, 64Cu, 89Zr i 111In11,12,13,14,15. W przeciwieństwie do tego, istnieje tylko jedno doniesienie o 99mTz znakowanym Tc, który został przygotowany przy użyciu liganda typu HYNIC wymagającego użycia koligandów w celu zapobieżenia wiązaniu i degradacji białek in vivo16. Jako alternatywę przedstawiamy tutaj syntezę tetrazyn znakowanych 99mTc(I) przy użyciu rodziny ligandów, które tworzą stabilne kompleksy trójzębne z rdzeniem [99mTc(CO)3]+.

figure-introduction-1
Rysunek 1: Bioortogonalna reakcja IEDDA między tetrazyną a transcyklooktenem. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.

Rodzina przygotowanych ligandów zawiera chelaty trójzębne, które różnią się polaryzacją i charakterem grupy łącznikowej między obszarem wiązania metalu a Tz (Rysunek 2). Celem było zidentyfikowanie 99-metrowegokonstruktu Tc-tetrazyny, który mógłby skutecznie lokalizować i reagować z miejscami znakowanymi TCO in vivo i szybko usuwać, gdy nie jest związany, w celu uzyskania wysokich proporcji celu do nie-celu. Do przetestowania ligandów użyto pochodnej TCO bisfosfonianu (TCO-BP) 17. Wykazaliśmy wcześniej, że TCO-BP lokalizuje się w obszarach aktywnego metabolizmu kości i może reagować z radioznakowanymi tetrazynami in vivo18. Jest to wygodny odczynnik do testowania nowych tetrazyn, ponieważ można go przygotować w jednym kroku, a eksperymenty można przeprowadzić na normalnych myszach, u których lokalizacja występuje głównie w stawach (kolana i barki).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Badania na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Radę Etyki Badań nad Zwierzętami na Uniwersytecie McMaster zgodnie z wytycznymi Kanadyjskiej Rady ds. Opieki nad Zwierzętami (CCAC).

1. Radioznakowanie ligandów Tz-trójzębnych za pomocą 99mTc

UWAGA: Następujące procedury wymagają użycia związków radioaktywnych. Prace należy wykonywać wyłącznie w licencjonowanym laboratorium z zachowaniem przepisów bezpieczeństwa i utylizacji. Reakcje mikrofalowe powinny być przeprowadzane w kuchence mikrofalowej przeznaczonej specjalnie do syntezy chemicznej.

  1. Synteza [99mTc(CO)3(H2O)3]+ 19,20
    1. W fiolce do kuchenki mikrofalowej połączyć 8 mg K2 [BH3CO2], 15 mg Na2CO3, 20 mg Na2B4O7·10H2O i 25 mg KOCO[CH(OH)]2COONa·4H2O. Płukać fiolkę przez 10 minut argonem.
    2. Dodać 4 ml 99mTcO4- (~1,100 MBq, ~30 mCi) w 0,9% soli fizjologicznej do fiolki.
    3. Podgrzewać reakcję w kuchence mikrofalowej przez 3,5 minuty w temperaturze 110 °C po 10 sekundach mieszania, aby zapewnić dokładne wymieszanie odczynników.
    4. Dostosować pH roztworu do 3,5-4 za pomocą ~400 μL 1 M HCl. Sprawdź za pomocą bibuły pH.
  2. Znakowanie radioizotopowe ligandów tetrazynowych 1-5
    1. Rozpuścić 2 mg każdego liganda (związki 1-5) w 250 μl MeOH21.
    2. Dodać 250 μL [99mTc(CO)3(H2O)3]+ (~74 MBq, ~2 mCi) do każdego roztworu.
    3. Podgrzewać mieszaninę reakcyjną za pomocą kuchenki mikrofalowej przez 20 minut w temperaturze 60 °C.
      UWAGA: Ten krok był identyczny dla wszystkich 5 tetrazyn.
    4. W przypadku związków 2-5 należy odparować rozpuszczalnik i ponownie rozpuścić powstałe produkty w 1 ml 1:1 v/v DCM:TFA.
    5. Rozpuszczone produkty reakcji (2-5) podgrzewać w temperaturze 60 °C w kuchence mikrofalowej przez 6 minut (2-4) lub 10 minut (5).
    6. Po schłodzeniu do temperatury pokojowej odparować rozpuszczalnik za pomocą parownika (36 °C, 8 mbar, 3 min, 6 000 obr./min) i rozpuścić wysuszony związek w 1:1 ACN:H2O lub 1:1 MeOH:H2O, przed oczyszczaniem HPLC.
    7. Oczyść związki znakowane 99mTc (1-5), w tym oddzielenie znakowanego produktu od nieznakowanego liganda tetrazynowego, przy użyciu HPLC (C18 odwrócona faza). Zazwyczaj stosuje się gradient elucji od 30:70 ACN:H2O (oba z 0,1% TFA) do 40:60 ACN:H2O przez 20 minut (18 min) i kolumnę analityczną C18 4,6 x 100 mm. Używaj zarówno detekcji UV (254 nm), jak i gamma.
      1. Pobrać małą próbkę każdego oznakowanego produktu i porównać jego czas retencji HPLC z czasem współwstrzykiwanego, nieradioaktywnego, ponownie znakowanego wzorca (0,125 mg w 20% metanolu-H2O). Ponownie oznakowany wzorzec jest identyfikowany w śladzie UV HPLC i będzie eluował w tym samym czasie, co związek znakowany 99mTc w śladzie γ-HPLC. To współwstrzykiwanie wykazuje szczyty przy porównywalnych czasach retencji, potwierdzając tożsamość związku znakowanego 99 mTc.
    8. Odparować rozpuszczalnik z frakcji HPLC za pomocą parownika (36 °C, 8 mbar, 3 min, 6 000 obr./min).
    9. Oczyszczony związek należy sformułować w stężeniu 7,4 kBq/μL w PBS, zawierającym 0,5% BSA i 0,01% Tween-80.
    10. Aby upewnić się, że znakowane związki są stabilne, należy przeprowadzić badanie stabilności in vitro. Inkubować przygotowany związek w temperaturze 37 °C przez 1, 4 i 6 godzin, wstrzykując niewielką ilość (3,7 MBq) mieszaniny do HPLC w każdym punkcie czasowym w celu oceny stabilności.

2. Wstępnie ukierunkowane badania biodystrybucji

  1. Przygotowanie zwierząt
    1. Używając 7-9 tygodniowych samic myszy Balb/c (n = 3), podawaj TCO-BP w postaci soli fizjologicznej (20 mg / kg) (5 μg / μL) poprzez wstrzyknięcie do żyły ogonowej.
    2. Umieść mysz w fizycznym urządzeniu przytrzymującym i zidentyfikuj żyły znajdujące się na bocznych powierzchniach ogona i przetrzyj wacikiem nasączonym alkoholem. W odległości około 2 cm od końca ogona wbij igłę o rozmiarze 30 pod płytkim kątem, równolegle do żyły. Powoli wcisnąć tłok w celu wstrzyknięcia, wyjąć igłę i przyłożyć czystą gąbkę z gazy w miejsce wstrzyknięcia, lekko uciskając, aż do ustania krwawienia.
    3. Po 1 godzinie od wstrzyknięcia TCO-BP podaj ~0,74 MBq (20 μCi) 99mTc-tetrazyny sformułowanej w 100 μL 0,5% BSA, 0,01% Tween-80 w PBS, poprzez wstrzyknięcie do żyły ogonowej.
  2. Badania biodystrybucji
    1. W pożądanym punkcie czasowym (t = 6 godzin) znieczulij myszy za pomocą 3% mieszaniny izofluranu i 2% tlenu gazowego. Zademonstruj wycofanie szczypania palców u znieczulonej myszy, aby upewnić się, że znajdują się one w znieczuleniu chirurgicznym.
    2. Pobrać krew (1 ml) przez punkcję serca za pomocą strzykawki wstępnie podanej heparyną. Umieść mysz na grzbiecie z nosem w stożku nosowym w celu kontynuowania znieczulenia i zlokalizuj wyrostek mieczykowaty na zwierzęciu.
      1. Wprowadzić igłę 25 G, nieco na lewo od linii środkowej zwierzęcia pod wyrostkiem mieczykowatym, pod kątem 20°. Całkowicie wbić igłę i powoli pociągnąć tłok do tyłu, aby zobaczyć krew w piaście igły, jeśli serce zostało przebite. W razie potrzeby lekko wyregulować igłę, trzymając tłok, aby nakłuć serce. Powoli pobrać krew do strzykawki.
    3. Poddaj zwierzę eutanazji przez zwichnięcie szyjki macicy, będąc pod narkozą.
    4. Umieść każde zwierzę w plastikowej torbie i użyj kalibratora dawki (ustawienie 99 mTc), aby zmierzyć poziom aktywności całego ciała.
    5. Do wstępnie zważonych probówek do liczenia należy pobrać następujące tkanki i płyny: krew, kości (kolano i ramię), woreczek żółciowy, nerki, wątroba, żołądek (z zawartością), jelito cienkie (z zawartością), jelito grube i kątnica (z zawartością), tarczyca i tchawica, pęcherz moczowy z moczem i ogon.
    6. Wypłucz odpowiednie tkanki (z wyłączeniem krwi, pęcherzyka żółciowego i pęcherza moczowego) w PBS, aby usunąć krew i osuszyć przed umieszczeniem tkanek w odpowiednich probówkach do liczenia.
    7. Umieścić zwłoki zwierzęce w plastikowej torbie i zmierzyć pozostałą aktywność całego ciała za pomocą kalibratora dawki.
    8. Zważyć każdą probówkę zawierającą próbkę tkanki. Odejmij początkową masę rurki, aby uzyskać masę tkanki.
    9. Za pomocą kalibratora dawki (ustawienie 99 mTc) należy zmierzyć aktywność badanej próbki (100 μl) w momencie wstrzyknięcia dla każdej myszy.
      UWAGA: Ta próbka testowa jest równa objętości wstrzyknięcia, co daje liczbę aktywności w momencie wstrzyknięcia.
    10. W czasie pomiaru tkanki należy podać podwielokrotność 5 μl próbki do badań użytej poprzednio. Użyj wielodetektorowego licznika gamma (ustawienie 99 mTc) i policz, aby uzyskać liczbę na minutę (CPM) dla próbki testowej o pojemności 5 μl.
    11. Użyć dwóch wartości uzyskanych w ppkt 2.2.9 i 2.2.10 w celu obliczenia zależności między aktywnością a CPM za pomocą równania 1 w celu uzyskania współczynnika konwersji (CPM μCi-1).
      (1) figure-protocol-1
    12. Użyj licznika gamma, aby zmierzyć ilość promieniotwórczości w każdej próbce tkanki lub płynu.
    13. Użyć równania 1, aby obliczyć wielkość aktywności w każdej tkance lub płynie w czasie pomiaru w stosunku do całkowitej wstrzykniętej dawki. Wartość ta jest następnie normalizowana na podstawie masy narządu i podawana jako procent wstrzykniętej dawki na gram (tj. %ID/g) tkanki.
    14. Wykonaj kroki od 2.1.2 do 2.2.13, aby przeprowadzić eksperyment kontroli ujemnej przy użyciu ligandów tetrazynowych znakowanych 99mTc przy braku TCO-BP. Uśmierc myszy (n = 3) w 0,5, 1, 4 i 6 godzin po wstrzyknięciu i uzyskaj tkankę lub płyn, jak opisano powyżej.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ligandy zostały zsyntetyzowane przy użyciu różnych łączników i chelatorów za pomocą prostej strategii aminacji redukcyjnej (Rysunek 2), a następnie produkt został sprzężony z dostępną na rynku tetrazyną22,23. Znakowanie radioizotopem przeprowadzono przy użyciu tej samej metody dla wszystkich związków i było ono wysoce powtarzalne. Proces został zoptymalizowany poprzez zmianę pH, ilości ligandu, czasu reakcji i tem...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Przygotowano zbiór chelatów trójzębnych związanych z tetrazyną o różnej polarności i oceniono przydatność ich 99-mkompleksów Tc w reakcji IEDDA z pochodną TCO in vivo . Opracowano skuteczną i powtarzalną metodę znakowania 99 mTc dla pięciu chelatów tetrazynowych, w których stężenie ligandów wynosiło 10-3 M. Po etapie znakowania nastąpiła deprotekcja grup t-butylowych (dla związków 2-5). Wysokie stężenie liganda wykorzystano w celu poprawy wydajności radi...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Autorzy deklarują, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Podziękowania

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ta praca jest wspierana przez granty badawcze z Natural Sciences and Engineering Research Council (NSERC) z Kanady, Ontario Institute for Cancer Research (OICR, #P.SI.015.8) oraz Canadian Cancer Society (CCS, #703857). Autorzy doceniają wkład dr Denisa Snidera, który udzielił pomocy w przygotowaniu manuskryptu.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Gaz argonowyAlphagaz------
Na2CO3EMD Millipore106395---
Na2B4O7· 10H2OAnachemiaS9640---
KNaC4H4O6· 4H2OAnachemia217255---
Technelite 99mTc generatorobrazowania medycznego Lantheus---Źródło 99mTcO4-
0,9% Obrazowaniemedyczne Saline Lantheus---Do generatora elucji
1 M HClLab Chem------
MeOHCaledon------
ACNCaledon---HPLC grade
Millipore H2OThermoFisher Scientific Barnstead Nanopure---
DCMCaledon------
TFACaledon------
PBSThermo Fisher Scientific10010023pH 7,4 1x
BSASigma AldrichA7906---
Tween80Sigma AldrichP8047---
IsofluraneCDMV108737Dostawca: Fresenius Kabi Animal Health
HPLCWaters1525 Pompa binarna, 2998 Detektor fotodiodowy, E-SAT/IN, Bioscan Flowcount PMT detector (pozycja # 15590)---
Kolumna HPLC do analizy i oczyszczania związków 2-4Phenomenex00G-4435-E0Bliźnięta® 5 & mikro; m C18 110  Å, LC Column 250 x 4,6 mm
Kolumna HPLC do analizy i oczyszczania związków 1 i 5Wody 186003115XBridge BEH C18 Kolumna, 130 & kąt;, 5 &mikro; m, 4,6 mm x 100 mm
Reaktor mikrofalowy Biologia Inicjator 8---
Biotage V10 ParownikBiotage Numer seryjny # V1041---
Kalibrator dawkiCapintec, Inc. CRC-25R---
Gamma LicznikPerkin Elmer Wizard1470 Automatyczny licznik gamma---
Waga do pomieszczeń dla zwierząt Gama --- mikrofalowych METTLER TOLEDOXP105
Delta  Biologia 3556290,5-2 ml 

Bibliografia

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Jurisson, S. S., Lydon, J. D. Potential Technetium Small Molecule Radiopharmaceuticals. Chem. Rev. 99 (9), 2205-2218 (1999).
  2. Kluba, C. A., Mindt, T. L. Click-to-chelate: Development of Technetium and Rhenium-Tricarbonyl Labeled Radiopharmaceuticals. Molecules. 18, 3206-3226 (2013).
  3. Amato, I. Nuclear Medicines Conundrum. Chem. Eng. News. 87 (36), 58-70 (2009).
  4. Hnatowich, D. J., Virzi, F., Rusckowski, M. Investigations of Avidin and Biotin for Imaging Applications. J. Nucl. Med. 28 (8), 1294-1302 (1987).
  5. Blackman, M. L., Royzen, M., Fox, J. M. Tetrazine Ligation: Fast Bioconjugation Based on Inverse-Electron-Demand Diels-Alder Reactivity. J. Am. Chem. Soc. 130 (41), 13518-13519 (2008).
  6. Devaraj, N. K., Weissleder, R., Hilderbrand, S. A. Tetrazine-Based Cycloadditions: Application to Pretargeted Live Cell Imaging. Bioconjugate Chem. 19 (12), 2297-2299 (2008).
  7. Rossin, R., et al. In Vivo Chemistry for Pretargeted Tumor Imaging in Live Mice. Angew. Chem., Int. Ed. 49 (19), 3375-3378 (2010).
  8. Zeglis, B. M., et al. Optimization of a Pretargeted Strategy for the PET Imaging of Colorectal Carcinoma via the Modulation of Radioligand Pharmacokinetics. Mol. Pharmaceutics. 12 (10), 3575-3587 (2015).
  9. Rossin, R., et al. Highly Reactive trans-Cyclooctene Tags with Improved Stability for Diels-Alder Chemistry in Living Systems. Bioconjugate Chem. 24 (7), 1210-1217 (2013).
  10. Rossin, R., Robillard, M. S. Pretargeted Imaging Using Bioorthogonal Chemistry in Mice. Curr. Opin. Chem. Biol. 21, 161-169 (2014).
  11. Denk, C., et al. Development of a 18F-Labeled Tetrazine with Favorable Pharmacokinetics for Bioorthogonal PET Imaging. Angew. Chem., Int. Ed. 53 (36), 9655-9659 (2014).
  12. Herth, M. M., Andersen, V. L., Lehel, S., Madsen, J., Knudsen, G. M., Kristensen, J. L. Development of a 11C-labeled Tetrazine for Rapid Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation. Chem. Commun. 49 (36), 3805-3807 (2013).
  13. Li, Z., et al. Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation for the Rapid Construction of 18F Labeled Probes. Chem. Commun. 46 (42), 8043(2010).
  14. Nichols, B., Qin, Z., Yang, J., Vera, D. R., Devaraj, N. K. 68Ga Chelating Bioorthogonal Tetrazine Polymers for the Multistep Labeling of Cancer Biomarkers. Chem. Commun. 50 (40), 5215-5217 (2014).
  15. Zeglis, B. M., et al. A Pretargeted PET Imaging Strategy Based on Bioorthogonal Diels-Alder Click Chemistry. J. Nucl. Med. 54 (8), 1389-1396 (2013).
  16. García, M. F., et al. 99mTc-Bioorthogonal Click Chemistry Reagent for In Vivo Pretargeted Imaging. Bioorg. Med. Chem. 24 (6), 1209-1215 (2016).
  17. Russell, R. G. G. Bisphosphonates: The First 40 Years. Bone. 49 (1), 2-19 (2011).
  18. Yazdani, A., et al. A Bone-Seeking Trans-Cyclooctene for Pretargeting and Bioorthogonal Chemistry: A Proof of Concept Study Using 99mTc and 177Lu-Labeled Tetrazines. J. Med. Chem. , (2016).
  19. Alberto, R., et al. A Novel Organometallic Aqua Complex of Technetium for the Labeling of Biomolecules: Synthesis of [99mTc(OH2)3(CO)3]+ from [99mTcO4]- in Aqueous Solution and its Reaction with a Bifunctional Ligand. J. Am. Chem. Soc. 120 (31), 7987-7988 (1998).
  20. Alberto, R., Ortner, K., Wheatley, N., Schibli, R., Schubiger, A. P. Synthesis and properties of boranocarbonate: A convenient in situ CO source for the aqueous preparation of [99mTc(OH2)3(CO)3. J. Am. Chem. Soc. 123 (13), 3135-3136 (2001).
  21. Lu, G., et al. Synthesis and SAR of 99mTc/Re-labeled Small Molecule Prostate Specific Membrane Antigen Inhibitors with Novel Polar Chelates. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23 (5), 1557-1563 (2013).
  22. Maresca, K. P., et al. Small Molecule Inhibitors of PSMA Incorporating Technetium-99m for Imaging Prostate Cancer: Effects of Chelate Design on Pharmacokinetics. Inorg. Chim. Acta. 389, 168-175 (2012).
  23. Bartholomä, M. D., et al. Insight into the Mode of Action of Re(CO)3 Thymidine Complexes. ChemMedChem. 5 (9), 1513-1529 (2010).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE

Poproś o pozwolenie

Tagi

Znakowanie technetem 99msynteza tetrazynyobrazowanie pretargetowaneradioznakowanie wspomagane mikrofalowooczyszczanie metod HPLCpochodna TCO BPcelowanie w ko ciobrazowanie in vivoopracowywanie radiofarmaceutyk w

Powiązane artykuły