Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Przygotowanie i ocena chelatów trójzębnych znakowanych 99 mTc do wstępnego celowania przy użyciu chemii bioortogonalnej

7.7K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/55188

⸱

4 lutego 2017

 ,  ,  ,  , 
1Department of Chemistry and Chemical Biology, McMaster University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Tutaj opisujemy protokół znakowania radioaktywnego i testowania in vivo pochodnych chelatu tetrazyny tridentate 99mTc(I) do wstępnego celowania i chemii bioortogonalnej.

Streszczenie

Wstępne celowanie w połączeniu z chemią bioortogonalną staje się skutecznym sposobem tworzenia nowych radiofarmaceutyków. Spośród dostępnych metod, cykloaddycja Dielsa-Aldera (IEDDA) z odwróconym zapotrzebowaniem elektronowym między znakowanymi radioaktywnie tetrazynami a transcyklooktenem (TCO) połączonym z biomolekułą okazała się wysoce skutecznym podejściem bioortogonalnym do obrazowania określonych celów biologicznych. Pomimo faktu, że technet-99m pozostaje najczęściej stosowanym izotopem w diagnostyce medycyny nuklearnej, brakuje metod otrzymywania tetrazyn znakowanych 99mTc. W niniejszym artykule przedstawiono preparat rodziny pochodnych trydentu-chelatu-tetrazyny i ich kompleksów Tc(I). Te nieznane dotąd związki znakowano radioaktywnie 99 mTc metodą wspomaganą mikrofalami z wydajnością radiochemiczną od 31% do 83%. Produkty są stabilne w soli fizjologicznej i PBS i szybko reagują z pochodnymi TCO in vitro. Ich zdolność do wstępnego celowania in vivo wykazano przy użyciu pochodnej TCO-bisfosfonianu (TCO-BP), która lokalizuje się w regionach aktywnego metabolizmu kości lub urazu. W badaniach na myszach 99mTc-tetrazyny wykazywały wysokie stężenia aktywności w stawach kolanowych i barkowych, czego nie obserwowano, gdy eksperymenty prowadzono przy braku TCO-BP. Ogólny wychwyt w narządach innych niż docelowe i farmakokinetyka różniły się znacznie w zależności od charakteru łącznika i polarności chelatu.

Wprowadzenie

99mTc pozostaje dominującym radioizotopem stosowanym w diagnostyce medycyny nuklearnej, z ponad 50 milionami procedur obrazowania przeprowadzanych rocznie na całym świecie1,2,3. Większość stosowanych klinicznie preparatów 99mTc to radiofarmaceutyki perfuzyjne. Istnieje ograniczona liczba związków ukierunkowanych aktywnie, w których 99mTc jest kierowany do wiązania się ze specyficznym biomarkerem poprzez ligację z konstruktem celującym. Tworzenie celowanych radiofarmaceutyków 99mTc jest często utrudnione przez wpływ kompleksów 99mTc-ligand na zdolność cząsteczki celującej do wiązania się z interesującym biomarkerem, lub okres półtrwania izotopu jest zbyt krótki do zastosowania w przypadku biomolekuł o wyższej masie cząsteczkowej, takich jak przeciwciała. W tym drugim przypadku zazwyczaj wymagane jest kilka dni przed wykonaniem obrazowania, aby biomolekuła mogła zostać usunięta z tkanek niedocelowych. Pretargetowanie oferuje alternatywne podejście pozwalające przezwyciężyć te trudności.

Wykazano, że wstępne celowanie w połączeniu z chemią bioortogonalną jest skutecznym sposobem opracowywania nowych sond do obrazowania molekularnego, zarówno w obrazowaniu fluorescencyjnym, jak i radioobrazowaniu4,5,6,7,8. Reakcja Dielsa-Aldera z odwróconym zapotrzebowaniem elektronowym (IEDDA) między pochodnymi 1,2,4,5-tetrazyny (Tz) a trans-cyklooktenem (TCO), przedstawiona na Rysunku 1, okazała się szczególnie efektywna6. Reakcja IEDDA z tymi komponentami może charakteryzować się szybką kinetyką w PBS (k2 ≈ 6,000 M-1 s-1) oraz wysoką selektywnością, co czyni ją idealną do zastosowań w wstępnym celowaniu in vivo 9,10.

Najczęściej stosowane podejście polega na podaniu wektora celującego pochodnego TCO, a po odpowiednim odstępie czasu na podanie znakowanej radioaktywnie tetrazyny. Opisano zastosowanie tetrazyn znakowanych 11C, 18F, 64Cu, 89Zr oraz 111In11,12,13,14,15. W przeciwieństwie do nich, istnieje tylko jeden raport dotyczący Tz znakowanej 99mTc, która została przygotowana przy użyciu ligandu typu HYNIC, co wymagało zastosowania koligandów w celu zapobiegania wiązaniu białek i degradacji in vivo16. Jako alternatywę przedstawiamy tutaj syntezę tetrazyn znakowanych 99mTc(I) z wykorzystaniem rodziny ligandów, które tworzą stabilne kompleksy trójzębowe z rdzeniem [99mTc(CO)3]+.

Schemat reakcji chemicznej; cykloaddycja azydkowo-alkinowa, uwalnianie azotu.
Rycina 1: Bioortogonalna reakcja IEDDA pomiędzy tetrazyną a trans-cyklooktenem. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.

Przygotowana rodzina ligandów zawiera chelaty trójzębowe, które różnią się polarnością oraz charakterem grupy łącznikowej między regionem wiążącym metal a Tz (Rycina 2). Celem było zidentyfikowanie 99mKonstrukt Tc-tetrazyny, który mógłby skutecznie lokalizować się i reagować z miejscami znakowanymi TCO in vivo or szybko usuwać się z organizmu, gdy nie są związane, aby uzyskać wysokie stosunki sygnału z celu do sygnału z tkanek niecelowych. W celu przetestowania ligandów zastosowano pochodną TCO bisfosfonianu (TCO-BP)17Wcześniej wykazaliśmy, że TCO-BP lokalizuje się w obszarach aktywnego metabolizmu kostnego i może reagować z radioznaczonymi tetrazynami in vivo18Jest to wygodny odczynnik do testowania nowych tetrazyn, ponieważ można go przygotować w jednym etapie, a eksperymenty można przeprowadzać na normalnych myszach, u których lokalizacja następuje głównie w stawach (kolanowych i barkowych).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Badania na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Badań nad Zwierzętami na Uniwersytecie McMaster zgodnie z wytycznymi Kanadyjskiej Rady ds. Opieki nad Zwierzętami (CCAC).

1. Radioznakowanie ligandów trójzębnych Tz za pomocą 99mTc

UWAGA: Następujące procedury wymagają użycia związków promieniotwórczych. Prace powinny być prowadzone wyłącznie w licencjonowanym laboratorium z zachowaniem przepisów dotyczących bezpieczeństwa i utylizacji. Reakcje w kuchence mikrofalowej należy przeprowadzać w urządzeniu zaprojektowanym specjalnie do syntezy chemicznej.

  1. Synteza [99mTc(CO)3(H2O)3]+ 19,20
    1. W fiolce do kuchenki mikrofalowej połączyć 8 mg K2[BH3CO2], 15 mg Na2CO3, 20 mg Na2B4O7·10H2O oraz 25 mg KOCO[CH(OH)]2COONa·4H2O. Przepłukać fiolkę argonem przez 10 min.
    2. Do fiolki dodać 4 mL 99mTcO4- (~1,100 MBq, ~30 mCi) w 0,9% soli fizjologicznej.
    3. Reakcję ogrzewać w kuchence mikrofalowej przez 3,5 min w temperaturze 110 °C, po uprzednim mieszaniu przez 10 s w celu zapewnienia dokładnego wymieszania reagentów.
    4. Dostosować pH roztworu do wartości 3,5-4, używając ~400 μL 1 M HCl. Sprawdzić za pomocą papierka wskaźnikowego pH.
  2. Radiomarkowanie ligandów tetrazynowych 1-5
    1. Rozpuścić 2 mg każdego ligandu (związki 1-5) w 250 μL MeOH21.
    2. Do każdego roztworu dodać 250 μL [99mTc(CO)3(H2O)3]+ (~74 MBq, ~2 mCi).
    3. Mieszaninę reakcyjną ogrzewać w kuchence mikrofalowej przez 20 min w temperaturze 60 °C.
      UWAGA: Krok ten był identyczny dla wszystkich 5 tetrazyn.
    4. W przypadku związków 2-5 odparować rozpuszczalnik i ponownie rozpuścić otrzymane produkty w 1 mL mieszaniny DCM:TFA w stosunku 1:1 v/v.
    5. Rozpuszczone produkty reakcji (2-5) ogrzewać w kuchence mikrofalowej w temperaturze 60 °C przez 6 min (2-4) lub 10 min (5).
    6. Po ochłodzeniu do temperatury pokojowej odparować rozpuszczalnik za pomocą wirówki odparowującej (36 °C, 8 mbar, 3 min, 6,000 rpm) i rozpuścić wysuszony związek w mieszaninie ACN:H2O 1:1 lub MeOH:H2O 1:1 przed oczyszczaniem metodą HPLC.
    7. Oczyścić związki znakowane 99mTc (1-5), w tym oddzielić produkt znakowany od nieznakowanego ligandu tetrazynowego, za pomocą HPLC (odwrócona faza C18). Zazwyczaj stosuje się gradient elucji od 30:70 ACN:H2O (oba z 0,1% TFA) do 40:60 ACN:H2O w czasie 20 min (18 min) oraz analityczną kolumnę C18 o wymiarach 4,6 x 100 mm. Należy stosować detekcję UV (254 nm) oraz gamma.
      1. Pobrać niewielką próbkę każdego produktu znakowanego i porównać jego czas retencji w HPLC z czasem retencji współwstrzykniętego, niepromieniotwórczego standardu znakowanego Re (0,125 mg w 20% metanolu-H2O). Standard znakowany Re jest identyfikowany na chromatogramie UV HPLC i eluje w tym samym czasie co związek znakowany 99mTc na chromatogramie γ-HPLC. Współwstrzyknięcie to wykazuje piki przy porównywalnych czasach retencji, co potwierdza tożsamość związku znakowanego 99mTc.
    8. Odparować rozpuszczalnik z frakcji HPLC za pomocą wirówki odparowującej (36 °C, 8 mbar, 3 min, 6,000 rpm).
    9. Przygotować formułę oczyszczonego związku o stężeniu 7,4 kBq/µL w buforze PBS zawierającym 0,5% BSA i 0,01% Tween-80.
    10. Aby upewnić się, że związki znakowane są stabilne, przeprowadzić badanie stabilności in vitro. Inkubować przygotowany związek w temperaturze 37 °C przez 1, 4 i 6 h, wstrzykując niewielką ilość (3,7 MBq) mieszaniny do HPLC w każdym punkcie czasowym w celu oceny stabilności.

2. Badania biodystrybucji z wstępnym targetowaniem

  1. Przygotowanie zwierząt
    1. U samic myszy Balb/c w wieku 7–9 tygodni (n=3) podać TCO-BP sformułowany w soli fizjologicznej (20 mg/kg) (5 μg/μL) poprzez wstrzyknięcie do żyły ogonowej.
    2. Umieścić mysz w urządzeniu do unieruchomienia fizycznego, zidentyfikować żyły znajdujące się na bocznych powierzchniach ogona i przemyć je gazikiem nasączonym alkoholem. W odległości około 2 cm od końca ogona wprowadzić igłę 30G pod niewielkim kątem, równolegle do żyły. Powoli nacisnąć tłok, aby wstrzyknąć preparat, wyjąć igłę i przyłożyć czysty gazik do miejsca wstrzyknięcia, lekko uciskając do momentu ustąpienia krwawienia.
    3. 1 h po wstrzyknięciu TCO-BP podać ~0,74 MBq (20 μCi) 99mTc-tetrazyny sformułowanej w 100 μL 0,5% BSA i 0,01% Tween-80 w PBS, poprzez wstrzyknięcie do żyły ogonowej.
  2. Badania biodystrybucji
    1. W wyznaczonym punkcie czasowym (t = 6 h) znieczulić myszy mieszaniną gazową 3% izofluranu i 2% tlenu. Wykonać test ucisku palca u znieczczonej myszy, aby upewnić się, że zwierzę znajduje się w chirurgicznej płaszczyźnie znieczulenia.
    2. Pobrać krew (1 mL) poprzez punkcję serca za pomocą strzykawki wstępnie potraktowanej heparyną. Położyć mysz na plecach z nosem w stożku do znieczulenia i zlokalizować wyrostek mieczykowaty u zwierzęcia.
      1. Wprowadzić igłę 25 G, lekko na lewo od linii środkowej zwierzęcia pod wyrostkiem mieczykowatym, pod kątem 20°. Wprowadzić igłę całkowicie i powoli odciągnąć tłok; pojawienie się krwi w nasadzie igły świadczy o przebiciu serca. Jeśli to konieczne, delikatnie skorygować położenie igły, trzymając tłok, aby przebić serce. Powoli pobrać krew do strzykawki.
    3. Uśmiercić zwierzę poprzez zwichnięcie stawów szyjnych podczas znieczulenia.
    4. Umieścić każde zwierzę w plastikowej torebce i użyć kalibratora dawek (ustawienie 99mTc), aby zmierzyć poziom aktywności całego ciała.
    5. Zebrać następujące tkanki i płyny do wcześniej zważonych probówek do liczenia: krew, kości (kolano i bark), pęcherzyk żółciowy, nerki, wątrobę, żołądek (z treścią), jelito cienkie (z treścią), jelito grube i kątnicę (z treścią), tarczycę i tchawicę, pęcherz moczowy z moczem oraz ogon.
    6. Przepłukać odpowiednie tkanki (z wyłączeniem krwi, pęcherzyka żółciowego i pęcherza moczowego) w PBS w celu usunięcia krwi i osuszyć je przed umieszczeniem w odpowiednich probówkach do liczenia.
    7. Umieścić tułów zwierzęcia w plastikowej torebce i zmierzyć pozostałą aktywność całego ciała za pomocą kalibratora dawek.
    8. Zważyć każdą probówkę zawierającą próbkę tkanki. Odjąć początkową masę probówki, aby uzyskać masę tkanki.
    9. Użyć kalibratora dawek (ustawienie 99mTc), aby zmierzyć poziom aktywności w próbce kontrolnej (100 µL) w momencie wstrzyknięcia dla każdej myszy.
      UWAGA: Próbka kontrolna jest równa objętości wstrzyknięcia, co pozwala określić poziom aktywności w momencie podania.
    10. W czasie pomiaru tkanek odpiłować 5 µL wcześniej użytej próbki kontrolnej. Użyć gammaspektrometru wielodetektorowego (ustawienie 99mTc) i dokonać pomiaru, aby uzyskać liczbę zliczeń na minutę (CPM) dla próbki kontrolnej 5 µL.
    11. Wykorzystać dwie wartości uzyskane w punktach 2.2.9 i 2.2.10 do obliczenia zależności między aktywnością a CPM za pomocą równania 1, aby uzyskać współczynnik konwersji (CPM µCi-1).
      (1) Wzór na ilościowe oznaczenie radiotracerów, obejmujący liczbę zliczeń na minutę, kalibrację dawki i licznik gamma.
    12. Użyć gammaspektrometru do zmierzenia ilości radioaktywności w każdej próbce tkanki lub płynu.
    13. Użyć równania 1 do obliczenia ilości aktywności w każdej tkance lub płynie w momencie pomiaru w stosunku do całkowitej wstrzykniętej dawki. Wartość tę następnie znormalizować przez masę organu i przedstawić jako procent wstrzykniętej dawki na gram (tj. %ID/g) tkanki.
    14. Postępować zgodnie z krokami od 2.1.2 do 2.2.13 w celu przeprowadzenia eksperymentu z kontrolą negatywną przy użyciu ligandów tetrazyny znakowanych 99mTc wobec braku TCO-BP. Uśmiercić myszy (n = 3) po 0,5, 1, 4 i 6 h od wstrzyknięcia i pobrać tkanki lub płyny zgodnie z powyższym opisem.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Ligandy zsyntezyzowano z wykorzystaniem różnych łączników i chelatorów za pomocą prostej strategii aminowania redukcyjnego (Rysunek 2), a następnie przeprowadzono sprzęganie produktu z komercyjnie dostępną tetrazyną22,23. Radiomarkowanie wykonano tą samą metodą dla wszystkich związków i było ono wysoce powtarzalne. Proces zoptymalizowano poprzez zmianę pH, ilości ligandu, czasu oraz temperatury reakcji, w wyniku c...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Przygotowano zbiór chelatów trójzębnych związanych z tetrazyną o różnej polarności i oceniono przydatność ich 99-mkompleksów Tc w reakcji IEDDA z pochodną TCO in vivo . Opracowano skuteczną i powtarzalną metodę znakowania 99 mTc dla pięciu chelatów tetrazynowych, w których stężenie ligandów wynosiło 10-3 M. Po etapie znakowania nastąpiła deprotekcja grup t-butylowych (dla związków 2-5). Wysokie stężenie liganda wykorzystano w celu poprawy wydajności radi...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy deklarują, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Podziękowania

Ta praca jest wspierana przez granty badawcze z Natural Sciences and Engineering Research Council (NSERC) z Kanady, Ontario Institute for Cancer Research (OICR, #P.SI.015.8) oraz Canadian Cancer Society (CCS, #703857). Autorzy doceniają wkład dr Denisa Snidera, który udzielił pomocy w przygotowaniu manuskryptu.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Gaz argonowyAlphagaz------
Na2CO3EMD Millipore106395---
Na2B4O7· 10H2OAnachemiaS9640---
KNaC4H4O6· 4H2OAnachemia217255---
Technelite 99mTc generatorobrazowania medycznego Lantheus---Źródło 99mTcO4-
0,9% Obrazowaniemedyczne Saline Lantheus---Do generatora elucji
1 M HClLab Chem------
MeOHCaledon------
ACNCaledon---HPLC grade
Millipore H2OThermoFisher Scientific Barnstead Nanopure---
DCMCaledon------
TFACaledon------
PBSThermo Fisher Scientific10010023pH 7,4 1x
BSASigma AldrichA7906---
Tween80Sigma AldrichP8047---
IsofluraneCDMV108737Dostawca: Fresenius Kabi Animal Health
HPLCWaters1525 Pompa binarna, 2998 Detektor fotodiodowy, E-SAT/IN, Bioscan Flowcount PMT detector (pozycja # 15590)---
Kolumna HPLC do analizy i oczyszczania związków 2-4Phenomenex00G-4435-E0Bliźnięta® 5 & mikro; m C18 110  Å, LC Column 250 x 4,6 mm
Kolumna HPLC do analizy i oczyszczania związków 1 i 5Wody 186003115XBridge BEH C18 Kolumna, 130 & kąt;, 5 &mikro; m, 4,6 mm x 100 mm
Reaktor mikrofalowy Biologia Inicjator 8---
Biotage V10 ParownikBiotage Numer seryjny # V1041---
Kalibrator dawkiCapintec, Inc. CRC-25R---
Gamma LicznikPerkin Elmer Wizard1470 Automatyczny licznik gamma---
Waga do pomieszczeń dla zwierząt Gama --- mikrofalowych METTLER TOLEDOXP105
Delta  Biologia 3556290,5-2 ml 

Bibliografia

  1. Jurisson, S. S., Lydon, J. D. Potential Technetium Small Molecule Radiopharmaceuticals. Chem. Rev. 99 (9), 2205-2218 (1999).
  2. Kluba, C. A., Mindt, T. L. Click-to-chelate: Development of Technetium and Rhenium-Tricarbonyl Labeled Radiopharmaceuticals. Molecules. 18, 3206-3226 (2013).
  3. Amato, I. Nuclear Medicines Conundrum. Chem. Eng. News. 87 (36), 58-70 (2009).
  4. Hnatowich, D. J., Virzi, F., Rusckowski, M. Investigations of Avidin and Biotin for Imaging Applications. J. Nucl. Med. 28 (8), 1294-1302 (1987).
  5. Blackman, M. L., Royzen, M., Fox, J. M. Tetrazine Ligation: Fast Bioconjugation Based on Inverse-Electron-Demand Diels-Alder Reactivity. J. Am. Chem. Soc. 130 (41), 13518-13519 (2008).
  6. Devaraj, N. K., Weissleder, R., Hilderbrand, S. A. Tetrazine-Based Cycloadditions: Application to Pretargeted Live Cell Imaging. Bioconjugate Chem. 19 (12), 2297-2299 (2008).
  7. Rossin, R., et al. In Vivo Chemistry for Pretargeted Tumor Imaging in Live Mice. Angew. Chem., Int. Ed. 49 (19), 3375-3378 (2010).
  8. Zeglis, B. M., et al. Optimization of a Pretargeted Strategy for the PET Imaging of Colorectal Carcinoma via the Modulation of Radioligand Pharmacokinetics. Mol. Pharmaceutics. 12 (10), 3575-3587 (2015).
  9. Rossin, R., et al. Highly Reactive trans-Cyclooctene Tags with Improved Stability for Diels-Alder Chemistry in Living Systems. Bioconjugate Chem. 24 (7), 1210-1217 (2013).
  10. Rossin, R., Robillard, M. S. Pretargeted Imaging Using Bioorthogonal Chemistry in Mice. Curr. Opin. Chem. Biol. 21, 161-169 (2014).
  11. Denk, C., et al. Development of a 18F-Labeled Tetrazine with Favorable Pharmacokinetics for Bioorthogonal PET Imaging. Angew. Chem., Int. Ed. 53 (36), 9655-9659 (2014).
  12. Herth, M. M., Andersen, V. L., Lehel, S., Madsen, J., Knudsen, G. M., Kristensen, J. L. Development of a 11C-labeled Tetrazine for Rapid Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation. Chem. Commun. 49 (36), 3805-3807 (2013).
  13. Li, Z., et al. Tetrazine-Trans-Cyclooctene Ligation for the Rapid Construction of 18F Labeled Probes. Chem. Commun. 46 (42), 8043(2010).
  14. Nichols, B., Qin, Z., Yang, J., Vera, D. R., Devaraj, N. K. 68Ga Chelating Bioorthogonal Tetrazine Polymers for the Multistep Labeling of Cancer Biomarkers. Chem. Commun. 50 (40), 5215-5217 (2014).
  15. Zeglis, B. M., et al. A Pretargeted PET Imaging Strategy Based on Bioorthogonal Diels-Alder Click Chemistry. J. Nucl. Med. 54 (8), 1389-1396 (2013).
  16. García, M. F., et al. 99mTc-Bioorthogonal Click Chemistry Reagent for In Vivo Pretargeted Imaging. Bioorg. Med. Chem. 24 (6), 1209-1215 (2016).
  17. Russell, R. G. G. Bisphosphonates: The First 40 Years. Bone. 49 (1), 2-19 (2011).
  18. Yazdani, A., et al. A Bone-Seeking Trans-Cyclooctene for Pretargeting and Bioorthogonal Chemistry: A Proof of Concept Study Using 99mTc and 177Lu-Labeled Tetrazines. J. Med. Chem. , (2016).
  19. Alberto, R., et al. A Novel Organometallic Aqua Complex of Technetium for the Labeling of Biomolecules: Synthesis of [99mTc(OH2)3(CO)3]+ from [99mTcO4]- in Aqueous Solution and its Reaction with a Bifunctional Ligand. J. Am. Chem. Soc. 120 (31), 7987-7988 (1998).
  20. Alberto, R., Ortner, K., Wheatley, N., Schibli, R., Schubiger, A. P. Synthesis and properties of boranocarbonate: A convenient in situ CO source for the aqueous preparation of [99mTc(OH2)3(CO)3. J. Am. Chem. Soc. 123 (13), 3135-3136 (2001).
  21. Lu, G., et al. Synthesis and SAR of 99mTc/Re-labeled Small Molecule Prostate Specific Membrane Antigen Inhibitors with Novel Polar Chelates. Bioorg. Med. Chem. Lett. 23 (5), 1557-1563 (2013).
  22. Maresca, K. P., et al. Small Molecule Inhibitors of PSMA Incorporating Technetium-99m for Imaging Prostate Cancer: Effects of Chelate Design on Pharmacokinetics. Inorg. Chim. Acta. 389, 168-175 (2012).
  23. Bartholomä, M. D., et al. Insight into the Mode of Action of Re(CO)3 Thymidine Complexes. ChemMedChem. 5 (9), 1513-1529 (2010).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Znakowanie technetem-99msynteza tetrazynyobrazowanie pretargetowaneradioznakowanie wspomagane mikrofalowooczyszczanie metodą HPLCpochodna TCO-BPcelowanie w kościobrazowanie in vivoopracowywanie radiofarmaceutyków
Przygotowanie i ocena chelatów trójzębnych znakowanych 99 mTc do wstępnego celowania przy użyciu chemii bioortogonalnej
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.