Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Wieloetapowa fotolitografia o zmiennej wysokości dla wielowarstwowych urządzeń mikroprzepływowych z zaworami

14.3K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/55276

⸱

27 stycznia 2017

 ,  , 
1Department of Bioengineering, Stanford University, 2Microfluidic Foundry, Stanford University, 3Department of Genetics, Stanford University, 4Chem-H Institute, Stanford University

* These authors contributed equally

W tym artykule

Podsumowanie

Wielowarstwowe urządzenia mikroprzepływowe często wiążą się z wytwarzaniem form wzorcowych o skomplikowanej geometrii dla funkcjonalności. W tym artykule przedstawiono kompletny protokół wieloetapowej fotolitografii z zaworami i funkcjami o zmiennej wysokości, które można dostosować do dowolnego zastosowania. W ramach demonstracji wytwarzamy mikroprzepływowy generator kropel zdolny do wytwarzania kulek hydrożelowych.

Streszczenie

Systemy mikroprzepływowe umożliwiły nowe, potężne podejścia do wysokoprzepustowej analizy biochemicznej i biologicznej. Nadal jednak istnieje bariera wejścia dla osób niebędących specjalistami, które odniosłyby ogromne korzyści z możliwości opracowania własnych urządzeń mikroprzepływowych w celu odpowiedzi na pytania badawcze. Szczególnie brakowało otwartego rozpowszechniania protokołów związanych z fotolitografią, która jest kluczowym krokiem w rozwoju formy repliki do produkcji urządzeń z polidimetylosiloksanu (PDMS). Podczas gdy wytwarzanie wzorców krzemowych o pojedynczej wysokości było szeroko badane w literaturze, etapy produkcji bardziej skomplikowanych funkcji fotolitografii niezbędnych dla wielu interesujących funkcji urządzeń (takich jak zaokrąglanie funkcji w celu tworzenia struktur zaworów, wzór pojedynczej formy o wielu wysokościach lub definicja wysokiego współczynnika proporcji) często nie są wyraźnie nakreślone.

Tutaj udostępniamy kompletny protokół do tworzenia wielowarstwowych urządzeń mikroprzepływowych z zaworami i skomplikowanymi geometriami o różnych wysokościach, dostosowanych do każdego zastosowania. Te procedury produkcyjne są przedstawione w kontekście mikroprzepływowego syntezatora kulek hydrożelowych i demonstrują wytwarzanie kropelek zawierających glikol polietylenowy (diakrylan PEG) i fotoinicjatora, który można polimeryzować w stałe kulki. Protokół ten i towarzysząca mu dyskusja stanowią podstawę zasad projektowania i metod wytwarzania, które umożliwiają rozwój szerokiej gamy urządzeń mikroprzepływowych. Zawarte tu szczegóły powinny pozwolić osobom niebędącym specjalistami na projektowanie i wytwarzanie nowatorskich urządzeń, a tym samym na wprowadzenie wielu niedawno opracowanych technologii do ich najbardziej ekscytujących zastosowań w laboratoriach biologicznych.

Wprowadzenie

W ciągu ostatnich 15 lat mikrofluidyka jako dziedzina nauki przeszła gwałtowny rozwój, któremu towarzyszył wysyp nowych technologii umożliwiających manipulację cieczami w skali mikrometrów1. Systemy mikrofluidyczne stanowią atrakcyjne platformy dla funkcjonalności laboratoriów mokrych, ponieważ małe objętości dają potencjał do zwiększenia szybkości i czułości, jednocześnie drastycznie zwiększając przepustowość i obniżając koszty dzięki wykorzystaniu korzyści skali2,3. Systemy mikrofluidyczne wielowarstwowe wywarły szczególnie znaczący wpływ na aplikacje w wysokoprzepustowej analizie biochemicznej, takie jak analiza pojedynczych komórek4,5,6, analiza pojedynczych cząsteczek (np. cyfrowy PCR7), krystalografia białek8, testy wiązania czynników transkrypcyjnych9,10 oraz przesiewanie komórkowe11.

Głównym celem mikrofluidyki było opracowanie urządzeń typu „lab on a chip”, zdolnych do przeprowadzania złożonych manipulacji płynami w obrębie jednego urządzenia w celu pełnej analizy biochemicznej12. Rozwój technik wielowarstwowej litografii miękkiej pomógł w realizacji tego celu, umożliwiając tworzenie zintegrowanych z układem zaworów, mieszalników i pomp do aktywnego sterowania płynami w małych objętościach13,14,15. Pomimo ich zalet i zademonstrowanych zastosowań, wiele z tych technologii mikrofluidycznych pozostaje w dużej mierze niewykorzystanych przez użytkowników niebędących specjalistami. Powszechne wdrożenie było utrudnione częściowo ze względu na ograniczony dostęp do zaplecz mikrowytwarzania, ale także z powodu niewystarczającego przekazywania informacji na temat technik fabrykacji. Dotyczy to szczególnie wielowarstwowych urządzeń mikrofluidycznych posiadających struktury zaworów lub złożone geometrie: brak szczegółowych, praktycznych informacji o istotnych parametrach projektowych i technikach wytwarzania często zniechęca nowych badaczy do podejmowania projektów związanych z projektowaniem i tworzeniem takich urządzeń.

Niniejszy artykuł ma na celu wypełnienie tej luki w wiedzy poprzez przedstawienie kompletnego protokołu tworzenia wielowarstwowych urządzeń mikrofluidycznych z zaworami i elementami o zmiennej wysokości, począwszy od parametrów projektowych, aż po wszystkie etapy wykonania. Skupiając się na początkowych etapach fotolitografii w procesie produkcji, protokół ten uzupełnia inne protokoły mikrofluidyczne16, które opisują kolejne etapy odlewania urządzeń z form oraz przeprowadzania konkretnych eksperymentów.

Urządzenia mikroprzepływowe z monolitycznymi zaworami na chipie składają się z dwóch warstw: warstwy „przepływu”, w której analizowany płyn jest manipulowany w mikrokanałach, oraz warstwy „kontrolnej”, w której mikrokanały zawierające powietrze lub wodę mogą selektywnie modulować przepływ płynu w warstwie przepływu14. Obie warstwy są wytwarzane na osobnych krzemowych matrycach formierskich, które są następnie wykorzystywane do odlewania replik z polidimetylosiloksanu (PDMS) w procesie zwanym „miękką litografią17”. Aby stworzyć urządzenie wielowarstwowe, każda z warstw PDMS jest odlewana na odpowiedniej matrycy, a następnie warstwy są względem siebie wyrównywane, tworząc w ten sposób kompozytowe urządzenie z PDMS z kanałami w każdej warstwie. Zawory powstają w miejscach, w których kanały przepływu i kontrolne przecinają się i są oddzielone jedynie cienką membraną; zwiększenie ciśnienia w kanale kontrolnym powoduje odgięcie tej membrany, co zamyka kanał przepływu i lokalnie przemieszcza płyn (Rycina 1).

Aktywne zawory na chipie można wytwarzać na wiele sposobów, w zależności od zamierzonego końcowego zastosowania. Zawory mogą być skonfigurowane w geometrii typu „push down” (nacisk w dół) lub „push up” (nacisk w górę), w zależności od tego, czy warstwa sterująca znajduje się nad czy pod warstwą przepływową (Rysunek 1)15. Geometrie „push up” pozwalają na stosowanie niższych ciśnień zamykających i zapewniają wyższą stabilność urządzenia przeciwko delaminacji, podczas gdy geometrie „push down” umożliwiają bezpośredni kontakt kanałów przepływowych z przyklejonym podłożem, co daje korzyść w postaci możliwości selektywnej funkcjonalizacji lub wzorowania powierzchni podłoża w celu uzyskania późniejszej funkcjonalności18,19.

Zawory mogą być albo celowo nieszczelnymi zaworami typu „sito”, albo w pełni uszczelniającymi, w zależności od profilu przekroju kanału przepływowego. Zawory typu sito są użyteczne do wychwytywania kulek, komórek lub innych makroanalitów1 i są wytwarzane przy użyciu typowych negatywowych fotorezystów (tzn. seria SU-8), które mają profile prostokątne. Gdy kanał sterujący w obszarach tych zaworów zostaje poddany nadciśnieniu, membrana PDMS pomiędzy warstwą sterującą a przepływową odkształca się izotropowo w prostokątny profil zaworu bez uszczelniania narożników, co umożliwia przepływ cieczy, ale zatrzymuje cząstki w skali makro (Rycina 1). Z kolei w pełni uszczelniające zawory mikrofluidyczne są wytwarzane poprzez wprowadzenie niewielkiego obszaru zaokrąglonego fotorezystu w miejscach położenia zaworów. Przy takiej geometrii nadciśnienie w kanale sterującym dociska membranę do zaokrąglonej warstwy przepływowej, aby całkowicie zamknąć kanał i zatrzymać przepływ cieczy. Zaokrąglone profile w warstwie przepływowej są generowane poprzez topnienie i reflow pozytywowego fotorezystu (np. AZ50 XT lub SPR 220) po typowych etapach fotolitografii. Wykazaliśmy wcześniej, że wysokość obszarów zaworowych po procesie reflow zależy od wybranych wymiarów struktur21. Niniejszy protokół przedstawia wytwarzanie obu geometrii zaworów w urządzeniu do syntezy kulek.

Schemat geometrii zaworów typu push-up; kontrola przepływu w zaworze sitowym i pełnym, projekt mikrofluidyczny, warstwa przepływu.
Rysunek 1: Geometrie wielowarstwowych zaworów mikrofluidycznych. Typowe architektury urządzeń typu „push up” dla zaworów sitowych i w pełni szczelnych przed (góra) i po (dół) podaniem ciśnienia. Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.

Urządzenia mogą również zawierać złożone elementy pasywne, takie jak miksery chaotyczne13 i rezystory zintegrowane w układzie20, które wymagają struktur o wielu różnych wysokościach w obrębie jednej warstwy przepływowej. Aby uzyskać warstwę przepływową o zmiennej wysokości, różne grupy badawcze stosowały wiele metod, w tym trawienie płytek drukowanych22, wielowarstwowe wyrównywanie reliefów z PDMS23 lub wieloetapową fotolitografię24. Nasz zespół uznał wieloetapową fotolitografię na pojedynczej formie odlewniczej za metodę skuteczną i powtarzalną. W tym celu stosuje się prostą technikę fotolitograficzną polegającą na budowaniu grubych kanałów z negatywowego fotorezystu (np. fotorezysty z serii SU-8) w warstwach, bez wywoływania pomiędzy nakładaniem poszczególnych warstw. Każdą warstwę negatywowego fotorezystu nanosi się metodą wirowania na krzemowej formie, dostosowując parametry do wymaganej grubości zgodnie z instrukcjami producenta25. Następnie struktury o danej wysokości są wzorowane na warstwie przy użyciu specyficznej maski transparentnej (Rycina 2) przymocowanej do szklanej płyty maskującej i wyrównanej względem wcześniej naniesionej warstwy przed naświetlaniem. W fotolitografii wieloetapowej precyzyjne wyrównanie między warstwami jest kluczowe dla uformowania kompletnego kanału przepływowego o zmiennej wysokości. Po wyrównaniu każda warstwa jest poddawana wygrzewaniu po naświetlaniu, zależnemu od jej grubości. Bez wywoływania następna warstwa jest wzorowana w analogiczny sposób. W ten sposób, za pomocą wielu masek, na pojedynczej warstwie płytki przepływowej można nadbudowywać wysokie struktury warstwa po warstwie. Poprzez pominięcie etapu wywoływania między kolejnymi krokami, poprzednie warstwy fotorezystu mogą być wykorzystane do generowania struktur o złożonej wysokości (tzn. dwie warstwy o grubości 25 µm mogą utworzyć strukturę o wysokości 50 µm)24. Dodatkowo, struktury dna kanału, takie jak rowki w kształcie jodełki w mikserach chaotycznych13, mogą być tworzone przy użyciu warstw z uprzednio naświetlonymi elementami. Proces kończy finalny etap wywoływania, w wyniku którego powstaje pojedyncza płytka przepływowa ze strukturami o zmiennej wysokości (Rycina 3).

W niniejszym opracowaniu przedstawiono kompletny protokół wieloetapowej fotolitografii, obejmujący przykłady wszystkich procedur niezbędnych do wytworzenia zintegrowanych zaworów i kanałów przepływowych o różnych wysokościach. Protokół wykonania został zaprezentowany w kontekście wielowarstwowego mikrofluidycznego syntezatora kulek, którego funkcjonalność wymaga zastosowania zaworów i elementów o zmiennej wysokości. Urządzenie to zawiera złącza T do generowania kropel wody w osłonie olejowej, zintegrowane rezystory do modulowania szybkości przepływu poprzez kontrolę oporu Poiseuille'a, mikser chaotyczny do homogenizacji składników kropel oraz zawory całkowicie uszczelniające i zawory sitowe, umożliwiające zautomatyzowane cykle pracy z wieloma wlotami odczynników. Dzięki zastosowaniu wieloetapowej fotolitografii, poszczególne elementy te są wytwarzane w różnych warstwach, w zależności od wymaganej wysokości lub rodzaju fotorezystu; w tym protokole tworzone są następujące warstwy: (1) warstwa zaworów Flow Round (55 µm, AZ50 XT), (2) warstwa Flow Low (55 µm, SU-8 2050), (3) warstwa Flow High (85 µm, SU-8 2025, wysokość addytywna 30 µm) oraz (4) rowki typu Herringbone (125 µm, SU-8 2025, wysokość addytywna 40 µm) (Rycina 3).

Kuleczki hydrożelowe mogą być wykorzystywane w wielu zastosowaniach, w tym do selektywnej funkcjonalizacji powierzchni w analizach następczych, enkapsulacji leków, w badaniach radiopodążania i obrazowania oraz do inkorporacji komórek; wcześniej wykorzystaliśmy bardziej złożoną wersję tych urządzeń do produkcji spektralnie kodowanych kuleczek hydrożelowych z PEG zawierających nanofosfory lantanowców20. Projekty omówione w niniejszym tekście są dostępne w Materiałach Dodatkowych, aby każde laboratorium mogło wykorzystać je w swoich badaniach, jeśli zajdzie taka potrzeba. Przewidujemy, że niniejszy protokół stanie się otwartym zasobem zarówno dla specjalistów, jak i osób niebędących specjalistami, zainteresowanych tworzeniem wielowarstwowych urządzeń mikroprzepływowych z zaworami lub złożoną geometrią, co obniży próg wejścia w dziedzinę mikroprzepływów i zwiększy szanse na sukces w ich wykonaniu.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

1. Wielowarstwowa konstrukcja urządzenia

UWAGA: Cechy o różnych wysokościach i/lub fotorezystorach muszą być dodawane sekwencyjnie do płytki podczas różnych etapów produkcji, aby stworzyć ostateczne cechy kompozytu. W związku z tym projekty dla każdej oddzielnej wysokości i fotorezystu, które mają być zawarte na płytce, muszą być wydrukowane na osobnej masce (Rysunek 4).

  1. Pobierz program do projektowania wspomaganego komputerowo (CAD) (np. AutoCAD Educational Version).
  2. Zdefiniuj obszar płytki 4", rysując okrąg 4". Projekty płytek półprzewodnikowych (Rysunek 4, Dodatkowe zasoby) podano jako przykład.
  3. Wewnątrz 4-calowego obrysu wafla umieść obramowania urządzenia za pomocą prostokątów polilinii 300 μm. Użyj tych obramowań urządzeń do wyrównania podczas fotolitografii.
  4. Utwórz różne warstwy dla każdej wysokości lub fotorezystu potrzebnego do ostatecznego projektu (tj. przepływ okrągły, przepływ niski, przepływ wysoki i kontrola w projekcie) za pomocą panelu Warstwy.
    1. Cechy konstrukcyjne o określonej żądanej wysokości na odpowiedniej warstwie. Przykładowy projekt przedstawia 4 różne aktywne warstwy, z których każda ma swój własny kolor (Rysunek 4).
      UWAGA: Obramowania urządzeń, tekst globalny i kontur płytki powinny być wykonane na osobnej warstwie (tj. 1-Negatywie w projektach), która później pojawi się na wszystkich warstwach w celu globalnego wyrównania. Cechy różnych fotorezystów (takie jak w pełni uszczelnialne zawory, które muszą być wykonane z dodatnim rezystantem) muszą pojawiać się na różnych warstwach, niezależnie od wysokości.
  5. Korzystając z zamkniętych polilinii o zerowej szerokości, można projektować elementy urządzenia w granicach urządzenia.
    1. Rozważ parametry projektowe w tabeli 1, aby zwiększyć szanse na pomyślne wykonanie.
    2. Dla każdej wysokości zaznacz tę warstwę w panelu Warstwy i dodaj wszystkie obiekty o tej wysokości.
  6. Gotowe projekty do druku folii przezroczystej przy użyciu Podstawowego Pliku Maski (Dodatkowe Zasoby), w którym każde 4-calowe kółko waflowe jest wstawione w 5-calową prostokątną obwódkę. Każda warstwa zostanie wydrukowana na osobnej folii przezroczystej w celu sekwencyjnego dodawania każdej warstwy fotorezystu.
    UWAGA: Ten podstawowy plik maski reprezentuje ostateczne projekty używane do drukowania.
    1. Aby zakończyć projektowanie, wyłącz wszystkie warstwy z wyjątkiem 1-ujemnej i warstwy zaworu AZ50 XT. Skopiuj całą płytkę z warstwą aktywną (tj. zaworami) i cechami globalnymi (tj. obramowaniami urządzeń).
    2. Otwórz plik maski podstawowej i wklej ten projekt do prostokąta zatytułowanego Zawory AZ50 XT. Użyj zewnętrznej krawędzi płytki do wyrównania, a następnie usuń ją po wklejeniu.
    3. Powtórz te czynności dla pozostałych warstw (np. w przykładowym projekcie: przepływ kwadratowy niski, przepływ kwadratowy wysoki i kontrola). Przykładowe pliki przezroczystości są dostępne (Dodatkowe zasoby).
    4. Wyślij pliki do komercyjnej firmy poligraficznej (np. FineLine Imaging) w celu wydrukowania na folii przezroczystej. Użyj 32 000 DPI do drukowania obiektów >10 μm i do 50 000 DPI do mniejszych obiektów. Jeśli potrzebne są cechy mniejsze niż 7 μm, zamów maskę chromowaną zamiast folii przezroczystej.

Tabela 1: Parametry projektowe i sugestie. Zagadnienia projektowe mające na celu uniknięcie typowych pułapek podczas procesu projektowania CAD urządzeń mikroprzepływowych. Kliknij tutaj, aby wyświetlić tę tabelę. (Kliknij prawym przyciskiem myszy, aby pobrać.)

2. Przygotowanie wafla do fotolitografii

UWAGA: Te kroki są dodatkowo wyświetlane w formie tabeli w Tabeli 2.

  1. W pomieszczeniu czystym lub wyznaczonym obszarze czystym wyczyść i odwodnij 4-calową płytkę silikonową klasy testowej (polerowaną jednostronnie).
    1. Dobrze opłucz wafel metanolem.
      UWAGA: W przypadku stosowania warstwy adhezyjnej SU-8 opisanej poniżej nie są wymagane żadne dalsze czynności czyszczące. Inne warstwy adhezyjne, które odbiegają od tego protokołu (np. HMDS), często wymagają dokładniejszego czyszczenia, takiego jak trawienie piranii.
    2. Wysuszyć suszarką zN2 lub sprężonym powietrzem.
    3. Piec na aluminiowej płycie grzejnej w temperaturze 95 °C przez 10 minut, aby całkowicie odparować rozpuszczalnik.
  2. Wykonać jednolitą warstwę SU-8 2005 o grubości 5 μm, aby poprawić przyczepność kolejnych warstw fotorezystu.
    1. Umieść oczyszczoną wafel na powlekarce wirowej, włącz odkurzacz, aby przymocować go do uchwytu wirowego i zdmuchnij kurz za pomocą N2 lub sprężonego powietrza.
    2. Nanieść 1-2 ml ujemnego fotorezystu SU-8 2005 na środek płytki i zawirować w następujący sposób: rozrzut: 500 obr./min, 10 s, przyspieszenie 133 obr./s; odlew: 3 000 obr./min, 40 s, przyspieszenie 266 obr./min.
    3. Wyjmij wafel i miękki wypiek, przełączając wafel między dwiema płytami grzewczymi ustawionymi na 65 °C i 95 °C zgodnie z następującym programem: 65 °C: 2 min, 95 °C: 3 min, 65 °C: 2 min.
    4. Pozwól, aby wafel ostygł do RT.
    5. Umieść wafel w uchwycie nakładki do maski UV i naświetlaj bez maski ("ekspozycja na zalanie"), aby uzyskać całkowite osadzanie energii 124 mJ (tutaj 20 sekund przy natężeniu lampy ~6,2 mW/cm2). Jeśli to możliwe, wybierz tryb twardego kontaktu, aby uzyskać separację płytki 300 μm: maska.
    6. Wyjmij wafel i pieczenie poekspozycyjne, przełączając wafel między dwiema płytami grzewczymi ustawionymi na 65 °C i 95 °C w następujący sposób: 65 °C: 2 min, 95 °C: 4 min, 65 °C: 2 min.

Produkcja zaworów zaokrąglonych

  1. Skorzystaj z internetowego zasobu predyktora zaworów AZ50 XT26, aby zaplanować prędkości wirowania dla żądanych wymiarów i wysokości zaworów.
    UWAGA: Poniższe kroki spowodują nałożenie warstwy dodatniego fotorezystu o grubości 55 μm w celu zdefiniowania zaworu i zaokrąglenia rozpływowego.
  2. Umieść wafel na powlekarce wirowej, włącz podciśnienie, aby przymocować go do uchwytu wirującego i zdmuchnij kurz za pomocą N2 lub sprężonego powietrza.
  3. Nałóż 2-3 ml dodatniego fotorezystu AZ50 XT na środek płytki. Wirować w następujący sposób: spread: 200 obr./min, 10 s, 133 obr./min przyspieszenie; Rzut: 1 200 obr./min, 40 s, przyspieszenie 266 obr./min; Wirowanie zatrzaskowe w celu usunięcia krawędzi: 3 400 obr./min, 1 s, przyspieszenie 3 400 obr./s.
  4. Na 5-calowej szalce Petriego ostrożnie połóż wafel i pozwól mu się zrelaksować przez 20 minut.
  5. Miękkie pieczenie wafla na płycie grzejnej: 65 °C - 112 °C, 22 min, prędkość narastania 450 °C/h.
  6. Wyjmij wafel i odstaw na noc w temperaturze pokojowej na szalce Petriego w celu nawodnienia w temperaturze otoczenia.
  7. Przepływ taśmy Okrągła przezroczysta maska do 5-calowej szklanej płyty drukowanej stroną do dołu (najbliżej wafla) i załadowana do pozycjonera maski wyrównywacza maski UV. Wystaw wafel na działanie 930 mJ promieniowania UV w 6 cyklach (np. 6 cykli po 25 sekund przy intensywności lampy ~6,2 mW/cm2, czas oczekiwania między ekspozycjami 30 s).
  8. Natychmiast opracuj wafel, zanurzając go w mieszanej kąpieli 25 ml AZ500k 1:3 Developer w 6-calowym szklanym naczyniu na 3-5 minut lub do momentu, gdy kąpiel zmieni kolor na fioletowy i pojawią się cechy.
    1. Wyjmij wafel i dobrze spłucz wodą DI.
    2. Ocenić wysokość przed rozpływem za pomocą profilometru (siła trzpienia pomiarowego 10,5 mg).
      UWAGA: Profilometr należy obsługiwać zgodnie z instrukcjami producenta, ostrożnie ustawiając rysik siłowy obok kanału elementu na żądanej warstwie przed profilowaniem. Ustawienia używane w tym protokole były następujące: siła igły 10,5 mg, długość 1 000 μm, prędkość 200 μm/s, reżim w dół.
  9. Rozpływowy twardy piecz wafel do stopienia i zaokrąglij funkcje zaworu w następujący sposób: 65 °C - 190 °C, 15 godzin, 10 °C/h prędkość narastania.
  10. Pozwól wafli ostygnąć do temperatury pokojowej. Oceń wysokość po rozpływie za pomocą profilometru (siła igły 10,5 mg). Dla tej geometrii urządzenia należy spodziewać się wysokości 55 μm ± 2 μm.

3. Wytwarzanie elementów o zmiennej wysokości w tandemie

  1. Przejdź do produkcji o zmiennej wysokości dzięki opracowanej płytce z przezroczystościami Flow Low, Flow High i Herringbone Mixer o konstrukcji Bead Synthesizer.
  2. Aby dostosować protokół dla projektów, użyj arkuszy danych producenta25, aby określić energię ekspozycji, prędkości wirowania i parametry czasu pieczenia, co pozwala na ± 5% tolerancji.
    UWAGA: Ten protokół wytwarza warstwę Flow Low o wysokości 55 μm przy użyciu ujemnego fotorezystu SU-8 2050 nawiniętego na elementy zaworu.
  3. Umieść oczyszczoną płytkę na powlekarce wirowej, włącz odkurzacz, aby przymocować go do uchwytu wirującego i zdmuchnij kurz za pomocą N2 lub sprężonego powietrza.
    1. Nałóż 1-2 ml ujemnego fotorezystu SU-8 2050 na środek płytki i wiruj w następujący sposób: rozpiętość: 500 obr./min, 10 sek., przyspieszenie 133 obr./s; odlew: 3,000 obr./min, 40 sek., przyspieszenie 266 obr./min. Fotorezystor wirowy nad rozwiniętymi funkcjami zaworu.
  4. Ostrożnie umieść odwirowaną wafel na 5-calowej szalce Petriego i pozwól mu się zrelaksować przez 20 minut na płaskiej powierzchni lub do momentu, gdy wszelkie smugi znikną.
  5. Wyjmij wafel i miękki upiecz, umieszczając na dwóch płytach grzewczych ustawionych na 65 °C i 95 °C w następujący sposób: 65 °C: 2 min, 95 °C: 8 min, 65 °C: 2 min.
  6. Pozwól wafli ostygnąć do RT.
  7. Przyklej maskę Flow Low Transparency do 5-calowej szklanej płytki kwarcowej stroną do dołu (najbliżej płytki) i załaduj do pozycjonera maski w wyrównywaczu maski UV.
  8. Umieść wafel w uchwycie wyrównującym maskę UV i za pomocą okularu mikroskopu lub kamery ostrożnie dopasuj nowe cechy warstwy Flow Low do cech warstwy zaworu Flow Round. Zacznij od wyrównania osi poziomych, pionowych i pochylenia obramowań urządzenia do elementów obramowania urządzenia na masce. Następnie wyrównaj elementy krzyżyka między warstwami. Na koniec upewnij się, że cechy zaworu przecinają się z funkcjami niskiego przepływu tam, gdzie ma to zastosowanie.
  9. Wystaw na działanie osadzania UV 170 mJ (28 sekund przy ~6,2 mW/cm2).
  10. Wyjmij wafel i piecz po naświetleniu, przełączając się między dwiema płytami grzejnymi ustawionymi na 65 °C i 95 °C w następujący sposób: 65 °C: 2 min, 95 °C: 9 min, 65 °C: 2 min.
  11. Nie rozwijając się, pozwól wafli ostygnąć do temperatury RT i przystąp do wytwarzania warstwy Flow High. Ta warstwa Flow High doda 30 μm fotorezystu do nierozwiniętej warstwy fotorezystu 55 μm, aby uzyskać cechy 85 μm w wcześniej nienaświetlonych miejscach.
  12. Powtórz kroki od 3.3 do 3.10 przy użyciu SU-8 2025 i maski Flow High layer z następującymi modyfikacjami ustawień wirowania: rozpiętość: 500 obr./min, 10 s, 133 obr./s przyspieszenie; rzut: 3,500 obr./min, 40 sek., przyspieszenie 266 obr./s.
    1. Wystaw na działanie osadzania UV 198 mJ (32 s przy ~6,2 mW/cm2).
  13. Nie rozwijając, pozwól wafli ostygnąć do temperatury pokojowej i przystąp do wytwarzania warstwy Chaotic Mixer w jodełkę. Końcowe cechy tej warstwy będą miały całkowitą wysokość 125 μm: 55 μm z warstwy Flow Low, 30 μm z warstwy Flow Square i 40 μm z warstwy Chaotic Mixer Jodełka (patrz rysunek 3) i będą obejmować rowki w jodełkę 35 μm.
  14. Powtórz kroki od 3.3 do 3.10 przy użyciu SU-8 2025 i maski warstwy w jodełkę z następującymi modyfikacjami, upewniając się, że rowki w jodełkę znajdują się całkowicie w konturach kanału Flow High.
    1. Użyj następującego programu pieczenia na miękko: 65 °C: 2 min, 95 °C: 7 min, 65 °C: 2 min.
    2. Wystaw na działanie osadzania UV 148 mJ (24 s przy ~6,2 mW/cm2).
  15. Po skompletowaniu wszystkich warstw należy wytworzyć, zanurzając wafel w mieszanej kąpieli 25 ml wywoływacza SU-8 w szklanym naczyniu o średnicy 6 cali na 3,5 minuty lub do momentu, gdy wyraźnie pojawią się cechy. Sprawdź, czy obiekty mają wyraźne, zdefiniowane granice obiektów za pomocą stereoskopu.
  16. Upiecz wafel na twardo, aby ustabilizować wszystkie cechy fotorezystu na płycie grzejnej w następujący sposób: 65 °C - 165 °C, 2 godziny 30 min, prędkość narastania 120 °C/h.
  17. Ocenić wysokość elementu we wszystkich warstwach za pomocą profilometru (siła rysika 10,5 mg).

4. Kontroluj produkcję wafli

  1. Oczyścić, odwodnić i wytworzyć warstwę adhezyjną 5 μm na nowej 4-calowej płytce krzemowej, jak w sekcji 4.
  2. Wykonaj warstwę kontrolną o grubości 25 μm za pomocą ujemnego fotorezystu SU-8 2025.
  3. Umieść wafel na powlekarce wirowej, włącz podciśnienie, aby przymocować go do uchwytu wirującego i zdmuchnij kurz za pomocą N2 lub sprężonego powietrza.
  4. Nałóż 1-2 ml negatywnego fotorezystu SU-8 2025 na środek płytki i wiruj w następujący sposób: rozrzut: 500 obr./min, 10 sek., 133 obr./s przyspieszenie; odlew: 3 500 obr./min, 40 sek., przyspieszenie 266 obr./s.
  5. Wyjmij wafel i upiecz na miękko, przełączając się między dwiema płytami grzewczymi ustawionymi na 65 °C i 95 °C w następujący sposób: 65 °C: 2 min, 95 °C: 5 min, 65 °C: 2 min.
  6. Pozwól wafli ostygnąć do RT.
  7. Dopasuj maskę przezroczystości kontrolnej do 5-calowej szklanej płytki i załaduj do wyrównywacza maski UV.
  8. Umieść wafel w uchwycie wyrównywacza maski UV i wystawij na osadzanie UV 155 mJ (25 sekund przy natężeniu lampy ~6,2 mW/cm2).
  9. Wyjmij wafel i piecz po ekspozycji, przełączając się między dwiema płytami grzejnymi ustawionymi na 65 °C i 95 °C w następujący sposób: 65 °C: 2 min, 95 °C: 6 min, 65 °C: 2 min.
  10. Rozwijaj się, zanurzając wafel w mieszanej kąpieli 25 ml SU-8 Developer w 6-calowym szklanym naczyniu na 1 minutę lub do momentu pojawienia się cech. Sprawdź funkcje za pomocą stereoskopu.
  11. Upiecz wafel na twardo, aby ustabilizować cechy fotorezystu w następujący sposób: 65 °C - 165 °C, 2 godziny 30 min, prędkość narastania 120 °C/h.

5. Obróbka wafli silanowych dla łatwego startu PDMS

  1. Umieść gotowe wafle w stojaku na płytki w eksykatorze próżniowym w słoiku dzwonowym w dygestoriach wolnych od wody lub odczynników rozpuszczalnych w wodzie.
  2. Pod maską użyj zakraplacza, aby nałożyć 1 kroplę trichloro(1H,1 H,2 H,2 H-perfluorooktylo)silanu (PFOTS) na szklane szkiełko i umieścić wewnątrz eksykatora.
  3. Zamknij pokrywę eksykatora i zastosuj próżnię przez 1 minutę.
  4. Po 1 minutach wyłącz próżnię bez zwiększania ciśnienia lub opróżniania słoika dzwonowego.
  5. Pozostaw mieszaninę na 10 minut, podczas gdy aerozol PFOTS pokryje powierzchnię wafla
    6. .
  6. Otwórz pokrywkę słoika i wyjmij wafel za pomocą pęsety. Umieść na szalce Petriego do formowania repliki PDMS. Szkiełka pokryte silanem należy wyrzucać do odpowiednich odpadów niebezpiecznych.
    UWAGA: Wafle pokryte fluorowanymi silanami mogą być używane setki do tysięcy razy bez ponownej obróbki. Warstwa protektorowa PDMS w skali 1:10 może być nałożona na płytki, utwardzona i wyrzucona po pierwszej obróbce silanem w celu usunięcia nadmiaru grup silanowych z powierzchni płytki.

6. Formowanie replik PDMS

  1. Wytwarzanie wielowarstwowych urządzeń mikroprzepływowych w geometrii "push up" na szkle zgodnie z istniejącymi protokołami otwartego dostępu16.
    UWAGA: Szczegółowy protokół można dodatkowo znaleźć na stronie internetowej27.
  2. Podczas oględzin upewnij się, że wszystkie zawory są prawidłowo ustawione w stosunku do przewodów sterujących, a wszystkie wloty (zarówno na warstwie przepływowej, jak i sterującej) są całkowicie przedziurowane przed kontynuowaniem.

7. Produkcja kulek hydrożelowych z kropelek

  1. Podłącz rurki (np. Tygon) załadowane wodą do systemu kontroli przepływu (np. pomp strzykawkowych, sterowników płynów lub zestawu zaworów elektromagnetycznych typu open source ze zbiornikami28).
  2. Podłącz metalowe kołki do przewodów i podłącz do portów urządzenia na wlotach linii sterującej. Zwiększ ciśnienie w przewodach sterujących urządzeniem, ustawiając wybrany system kontroli przepływu na 25 psi dla każdej linii. Upewnij się, że zawory zamykają się i otwierają ponownie poprzez inspekcję pod mikroskopem.
    UWAGA: Postępuj zgodnie z instrukcjami producenta dla wybranego układu sterowania przepływem. W tej pracy niestandardowy, sterowany programowo system pneumatyczny wywiera ciśnienie na każdą linię za pomocą zaworów elektromagnetycznych, które przełączają się między ciśnieniem sprężonego powietrza 25 psi (pod ciśnieniem) a ciśnieniem atmosferycznym (rozhermetyzowany). Szczegóły na temat tego systemu można znaleźć w Dyskusji.
  3. Przygotuj niestandardowe mikroprzepływowe zbiorniki ciśnieniowe do ładowania odczynników i oleju.
    1. Za pomocą szpilki przebij dwa otwory w górnej części rurki z fiolką kriogeniczną, włóż kapilarną rurkę PEEK do jednego otworu i włóż metalową szpilkę połączoną z rurką do drugiego otworu.
    2. Uszczelnij rurki na miejscu za pomocą żywicy epoksydowej. Pozostaw do wyschnięcia na 1 godzinę.
  4. W oczekiwaniu, w probówce do mikrowirówki, zawiesić 3,9 mg fotoinicjatora LAP w 100 μl wody DI ([LAP] = 39 mg/ml) w celu przygotowania roztworu fotoinicjatora służącego do polimeryzacji kropelek do kulek hydrożelowych. Chronić przed światłem.
  5. W drugiej probówce do mikrowirówki dodaj 132 μl wody DI, 172 μl diakrylanu PEG, 12 μl roztworu LAP i 85 μl buforu HEPES, aby uzyskać roztwór kropelek hydrożelu.
  6. Przenieść roztwór kropelki hydrożelu do gotowego naczynia rurki kriogenicznej.
    UWAGA: Dodatki do innych zastosowań, takich jak nanokryształy, cząstki magnetyczne lub cząsteczki biologiczne, mogą być zawarte w komponencie HEPES.
  7. Podłącz rurkę naczynia rurki kriogenicznej do kontrolowanego źródła ciśnienia i podłącz rurkę PEEK do wlotu odczynnika urządzenia.
  8. Przygotuj 10 ml lekkiego oleju mineralnego z 2% v/v niejonowym środkiem powierzchniowo czynnym (np. Span 80) i 0,05% EM90 na emulsję kropelek oleju. Przefiltrować za pomocą filtra strzykawkowego 0,22 μm i załadować 1 ml do drugiego naczynia z probówką kriogeniczną.
  9. Włóż rurkę PEEK do wylotu urządzenia w celu zbierania kropel.
  10. Usuń pęcherzyki powietrza z urządzenia, zwiększając ciśnienie wlotów oleju, wody lub mieszaniny PEG (ciśnienie robocze 4 psi). Włącz wszystkie zawory. Sekwencyjnie wyłączaj każdy zawór na ścieżce płynu po 1 minucie lub do momentu, gdy pęcherzyki powietrza przenikną przez urządzenie PDMS. Na przykład, aby usunąć bąbelki z mieszadełek w jodełkę, włącz zawory Wlot 1, Wymieszaj 1 i Wymieszaj odpady. Następnie rozhermetyzuj wlot 1, wymieszaj 1 i wymieszaj odpady, aż wszystkie bąbelki znikną.
  11. Gdy urządzenie zostanie ponownie zwarte po odbąbelowaniu, rozhermetyzuj zawór olejowy Ro1 i ustaw ciśnienie oleju na 10 psi.
  12. Ustaw ciśnienie mieszanki PEG na 9 psi, rozpręż zawory przed (wlot 1, krople 1) i wyreguluj w razie potrzeby, aby wytworzyć kropelki o pożądanej wielkości. Wielkość kropli można określić za pomocą mikroskopii za pomocą kamery o szybkości 50 kl./s lub większej.
  13. Gdy kropelki się ustabilizują, umieść plamkę o średnicy 5 mm ze źródła światła UV (np. systemu utwardzania punktowego UV z płynnym światłowodem (LLG) lub skupioną diodą LED UV) nad obszarem polimeryzacji urządzenia i zastosuj 100 mW/cm2 UV (365 nm) ze źródła UV.
  14. Zwiększ ciśnienie w zaworze sita perełek, aby obserwować, jak zbierają się spolimeryzowane kulki i upewnić się, że kropelki stwardniały w kulki. W razie potrzeby dostosuj LLG, aby uzyskać pełną polimeryzację.
  15. Rozhermetyzuj zawór sita perełkowego i zbierz kulki do rurki przez rurkę wylotową PEEK.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

W niniejszej pracy prezentujemy wykonanie zaworowych, wielowarstwowych form mikroprzepływowych o zmiennej wysokości poprzez stworzenie urządzeń zdolnych do generowania kulek hydrożelu z glikolu polietylenowego (PEG) z kropel (Rysunek 2). Przegląd pełnego procesu wykonania przedstawiono na Rysunku 3. Wykorzystując elementy projektowe z poprzednich prac, syntezator kulek posiada 4 wysokości w swojej warstwie przepływu, w tym (1) zaokrąglone...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Praca ta demonstruje kompletny, wieloetapowy protokół fotolitograficzny dla wielowarstwowego urządzenia mikroprzepływowego z zaworami i geometrią o zmiennej wysokości, które można dostroić do dowolnego zastosowania za pomocą prostych modyfikacji parametrów produkcyjnych w oparciu o nasze narzędzie online26 i instrukcje producenta25. Protokół ten ma na celu wyjaśnienie wielowarstwowej fotolitografii dla badaczy chcących konstruować urządzenia mikroprzepływowe poza prostymi, ...

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.

Podziękowania

Autorzy dziękują Scottowi Longwellowi za pomocne komentarze i edycje manuskryptu oraz Robertowi Puccinellemu za fotografię urządzenia. Autorzy dziękują za hojne wsparcie ze strony grantu na rozwój technologii Beckman Institute. K.B. jest wspierany przez stypendium NSF GFRP oraz komponent TLI Stanford Clinical and Translational Science Award to Spectrum (NIH TL1 TR 001084); P.F. potwierdza stypendium McCormick and Gabilan Faculty Fellowship.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Materials
Mylar Maski przezroczyste, 5"FineLine Plotting
5" Płytki kwarcoweUnited Silica Niestandardowe
4-calowe wafle krzemowe,wafel uniwersytecki452
SU8 2005, 2025, 2050 fotorezystorMicrochemY111045, Y111069, Y111072
Az50XT Zintegrowane mikromateriałyAZ50XT-Q
SU8 DeveloperMicrochemY020100
AZ400K Developer 1:3Zintegrowane mikromateriałyAZ400K1:3-CS
Szklana miska Pyrex 150 mmSigma-AldrichCLS3140150-1EA
Waflowa szalka Petriego, 150 mmVWR25384-326
Pęseta waflowa Mikroskopia elektronowa Nauki (EMS)78410-2W
Trichloro(1H,1H,2H,2H-perfluorooktylo)silan (PFOTS)Sigma-Aldrich448931-10G
Szkiełka szklane 2" x 3"Thomas Scientific 6686K20
RTV 615 elastomerowa baza i utwardzacz PDMS zestawMomentive RTV615-1P
Rurka Tygon, 0.02" OD Fischer Naukowy 14-171-284
Rurka kapilarna PEEK, 510 μ m OD, 125 μ m IDZeusNiestandardowe360 μ m PEEK jest łatwo dostępny przez Idex (numer katalogowy: 1571)
Cyro 4 ml tubkaGreiner Bio-One127279
Epoxy, 30 minPermatex84107
Metalowe kołki, 0,025 "OD, .013" IDNew England Small TubeNE-1310-02
Diakrylan poli(glikolu etylenowego), Mn 700Sigma-Aldrich455008-100ML
Fotoinicjator fosfinianu fenylo(2,4,6-trimetylobenzoilo)fosfinianu litu Tokijski przemysł chemiczny Co.L0290Zazwyczaj syntetyzujemy LAP we własnym zakresie. 
HEPESSigma-AldrichH4034-25G
Lekki olej mineralnySigma-Aldrich330779-1L
Span-80Sigma-Aldrich85548
ABIL EM 90UPI Chem420095 
 
Nazwa Company<strong>Numer katalogowyKomentarze
EquipmentEquivalent equiptation lub domowe zestawy będą działać równie
Mask AlignerKarl SussMA6
ProfilometrKLA-TencorAlpha-Step D500
Spin PowlekarkaLaurell TechnologiesWS-650-23Można użyć dowolnej powlekarki, która akceptuje wafle 100 mm
Eksykator próżniowy, Bell-Jar StyleBel-Art420100000
PiekarnikCole-PalmerWU-52120-02
System utwardzania punktowego UV z opcją 3 mm LLGDiody LED UV Dymax41015ksenonowe lampy łukowe lub inne źródła UV o tej samej intensywności działają równie dobrze
MFCS Microfluidic Fluid Control SystemMożnaFluidgent MFCS-EZ, niestandardowe pneumatyki lub inne systemy sterowania
Zautomatyzowane skrypty sterująceMATLAB
Płyta grzewczaTory Pines ScientificHP30Wystarczy dowolna płyta grzewcza z równomiernym ogrzewaniem (tj. , płyty aluminiowe lub ceramiczne).
klasy testowej dobrze , również stosować pompy strzykawkowe

Bibliografia

  1. Duncombe, T. A., Tentori, A. M., Herr, A. E. Microfluidics: reframing biological enquiry. Nat. Rev. Mol. Cell Bio. 16 (9), (2015).
  2. Squires, T. M., Quake, S. R. Microfluidics: Fluid physics at the nanoliter scale. Rev.Mod. Phys. 77 (3), (2005).
  3. Whitesides, G. M. The origins and the future of microfluidics. Nature. 442 (7101), (2006).
  4. Kalisky, T., Blainey, P., Quake, S. R. Genomic Analysis at the Single-Cell Level. Ann. Rev. of Genetics. 45 (1), (2011).
  5. Finkel, N. H., Lou, X., Wang, C., He, L. Peer Reviewed: Barcoding the Microworld. Anal. Chem. 76 (19), (2004).
  6. Lecault, V., White, A. K., Singhal, A., Hansen, C. L. Microfluidic single cell analysis: from promise to practice. Curr. Opin. in Chem. Bio. 16 (3-4), (2012).
  7. White, A. K., Heyries, K. A., Doolin, C., VanInsberghe, M., Hansen, C. L. High-Throughput Microfluidic Single-Cell Digital Polymerase Chain Reaction. Anal. Chem. 85 (15), (2013).
  8. Hansen, C. L., Classen, S., Berger, J. M., Quake, S. R. A Microfluidic Device for Kinetic Optimization of Protein Crystallization and In Situ Structure Determination. J. Am. Chem. Soc. 128 (10), (2006).
  9. Maerkl, S. J., Quake, S. R. A Systems Approach to Measuring the Binding Energy Landscapes of Transcription Factors. Science. 315 (5809), (2007).
  10. Fordyce, P. M., Gerber, D., et al. De novo identification and biophysical characterization of transcription-factor binding sites with microfluidic affinity analysis. Nat. Biotech. 28 (9), (2010).
  11. Fan, R., et al. Integrated barcode chips for rapid, multiplexed analysis of proteins in microliter quantities of blood. Nat. Biotech. 26 (12), (2008).
  12. Kovarik, M. L., Gach, P. C., Ornoff, D. M., Wang, Y. Micro total analysis systems for cell biology and biochemical assays. Anal. Chem. , (2011).
  13. Stroock, A. D., Dertinger, S. K. W., Ajdari, A., Mezić, I., Stone, H. A., Whitesides, G. M. Chaotic Mixer for Microchannels. Science. 295 (5555), 647-651 (2002).
  14. Unger, M. A., Chou, H. -P., Thorsen, T., Scherer, A., Quake, S. R. Monolithic Microfabricated Valves and Pumps by Multilayer Soft Lithography. Science. 288 (5463), 113-116 (2000).
  15. Thorsen, T., Maerkl, S. J., Quake, S. R. Microfluidic Large-Scale Integration. Science. 298 (5593), (2002).
  16. Li, N., Sip, C., Folch, A. Microfluidic Chips Controlled with Elastomeric Microvalve Arrays. JoVE. (8), e296(2007).
  17. Kim, P., et al. Soft lithography for microfluidics: a review. Biochip. J. 2 (1), 1-11 (2008).
  18. Studer, V., Hang, G., Pandolfi, A., Ortiz, M., Anderson, W. F., Quake, S. R. Scaling properties of a low-actuation pressure microfluidic valve. J. Appl. Phys. 95 (1), 393-398 (2004).
  19. Kartalov, E. P., Scherer, A., Quake, S. R., Taylor, C. R., Anderson, W. F. Experimentally validated quantitative linear model for the device physics of elastomeric microfluidic valves. J. Appl. Phys. 101 (6), 064505(2007).
  20. Gerver, R. E., Gómez-Sjöberg, R., et al. Programmable microfluidic synthesis of spectrally encoded microspheres. Lab. Chip. 12 (22), 4716-4723 (2012).
  21. Fordyce, P. M., Diaz-Botia, C. A., DeRisi, J. L., Gómez-Sjöberg, R. Systematic characterization of feature dimensions and closing pressures for microfluidic valves produced via photoresist reflow. Lab. Chip. 12 (21), 4287-4295 (2012).
  22. Li, C. -W., Cheung, C. N., Yang, J., Tzang, C. H., Yang, M. PDMS-based microfluidic device with multi-height structures fabricated by single-step photolithography using printed circuit board as masters. The Analyst. 128 (9), 1137-1142 (2003).
  23. Romanowsky, M. B., Abate, A. R., Rotem, A., Holtze, C., Weitz, D. A. High throughput production of single core double emulsions in a parallelized microfluidic device. Lab. Chip. 12 (4), 802-807 (2012).
  24. Mata, A., Fleischman, A. J., Roy, S. Fabrication of multi-layer SU-8 microstructures. JMM. 16 (2), 276(2006).
  25. Microchem. SU-8 2000 Series Data Sheet. , Microchem. Available from: http://www.microchem.com/pdf/SU-82000DataSheet2025thru2075Ver4.pdf (2016).
  26. Fordyce, P. M., DeRisi, J. L., Gómez-Sjöberg, R. AZ50 XT Feature Height Calculator. , Available from: http://derisilab.ucsf.edu/software/AZ50XT/AZ50XTToolInput.html (2016).
  27. Foundry, S. M. Stanford Microfluidics Foundry Website. , Available from: > http://web.stanford.edu/group/foundry/Microfluidic%20valve%20technology.html (2016).
  28. Sjöberg, R. Rafael's Microfluidics Site. , Available from: https://sites.google.com/site/rafaelsmicrofluidicspage/valve-controllers (2016).
  29. Wanat, S., Plass, R., Sison, E., Zhuang, H., Lu, P. -H. Optimized Thick Film Processing for Bumping Layers. Proc. SPIE. , 1281-1288 (2003).

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Tagi

Wieloetapowa fotolitografiastruktury o zmiennej wysokościmatryce do mikroprzepływówzawory na chipiefotorezyst SU-8wyrównywanie maski UVwytwarzanie urządzeń PDMSsynteza kulek hydrożelowychsystem kontroli przepływuwyrównywanie urządzenia
Wieloetapowa fotolitografia o zmiennej wysokości dla wielowarstwowych urządzeń mikroprzepływowych z zaworami
Skontaktuj się z nami
Poleć bibliotece

Prywatność

Warunki korzystania z usługi

Zasady

Prawa autorskie © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.