Ustandaryzowaliśmy biopsję tkanki tłuszczowej jamy brzusznej metodą bez diatermii wykonywaną w znieczuleniu miejscowym. Wystąpiły trzy przypadki nadmiernego krwawienia pooperacyjnego na 115 operacji (2,61%). Stwierdzamy, że biopsja chirurgiczna tkanki tłuszczowej jamy brzusznej metodą bez diatermii może być bezpiecznie stosowana u zdrowych mężczyzn.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Technika podskórnej biopsji tkanki tłuszczowej jamy brzusznej metodą bez diatermii
* These authors contributed equally
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Biopsje tkanki tłuszczowej oferują próbki tkanek, które po analizie mogą dostarczyć wnikliwych przeglądów mechanizmów związanych z metabolizmem i chorobami. Aby uzyskać podskórne biopsje tkanki tłuszczowej w okolicy brzucha, naukowcy i lekarze stosują technikę chirurgiczną lub igłową. Jednak chirurgiczne biopsje podskórnej tkanki tłuszczowej mogą dostarczyć próbek tkanek, które mogą zapewnić bardziej kompleksowy przegląd złożoności wskaźników biologicznych w białej tkance tłuszczowej. Zwykle chirurgiczna biopsja tkanki tłuszczowej obejmuje zabieg diatermii w celu kauteryzacji naczyń krwionośnych, aby zapobiec nadmiernemu krwawieniu. Niemniej jednak po diatermii zgłaszano działania niepożądane, takie jak gwałtowne pożary i zmiany skórne w tkance. W związku z tym dążyliśmy do standaryzacji chirurgicznej biopsji tkanki tłuszczowej jamy brzusznej wykonywanej w znieczuleniu miejscowym metodą niediatermiczną. Wykonano 115 podskórnych biopsji tkanki tłuszczowej u zdrowych mężczyzn metodą biopsji chirurgicznej jamy brzusznej bez diatermii. Nasze wyniki wykazały trzy przypadki nadmiernego krwawienia pooperacyjnego na 115 operacji (2,61%). Podsumowując, nasza standaryzowana podskórna biopsja chirurgiczna tkanki tłuszczowej jamy brzusznej przy użyciu metody bez diatermii może być bezpiecznie stosowana u zdrowych mężczyzn przy łóżku pacjenta, przy minimalnych skutkach ubocznych.
Wprowadzenie
Biopsje tkanki tłuszczowej oferują próbki tkanek, które po analizie mogą dostarczyć wnikliwego przeglądu mechanizmów związanych z metabolizmem i chorobą. Na przykład, są one używane do identyfikacji guzów raka piersi1, badania składu kwasów tłuszczowych2 oraz badań nad ważnymi szlakami chorób metabolicznych i hormonalnych3. Aby uzyskać podskórne biopsje tkanki tłuszczowej w okolicy brzucha, naukowcy i lekarze stosują technikę chirurgiczną lub igłową. Jednak chirurgiczne biopsje podskórnej tkanki tłuszczowej mogą dostarczyć próbek tkanek, które mogą zapewnić bardziej wszechstronny przegląd złożonych mechanizmów biologicznych [np. ekspresja informacyjnego kwasu rybonukleinowego (mRNA), analiza histologiczna itp.]4. Były one wcześniej stosowane u zdrowych osób dorosłych4 i mogą być bezpiecznie wykonywane przy łóżku pacjenta5.
Technika biopsji opartej na igłach wymaga intensywnej liposukcji, która może zniszczyć integralność tkanki, i zazwyczaj pobiera niewielką ilość tkanki (100-500 mg)6. Te próbki tkanek mogą nie być odpowiednie do złożonych badań naukowych. Ponadto, w porównaniu z techniką opartą na igłach, chirurgiczne biopsje tłuszczu podskórnego mogą dostarczyć próbki tkanek, które mogą narysować pełniejszy obraz kilku wskaźników stanu zapalnego (np. sygnalizacji komórek B i T); regulacja cytoszkieletu; szlaki komórkowe; szlaki metaboliczne lipidów, węglowodanów i aminokwasów; i szlaki fosforylacji oksydacyjnej4. Ponadto technika oparta na igłach wiąże się z wyższym ryzykiem zanieczyszczenia komórek krwi niż technika chirurgiczna4, dostarczając jednocześnie niewiele informacji na temat zwłóknieniowych obszarów tkanki4,7,8.
Zazwyczaj, chirurgiczna biopsja tkanki tłuszczowej obejmuje zabieg diatermii w celu kauteryzacji naczyń krwionośnych, aby zapobiec nadmiernemu krwawieniu9. Diatermia jest również stosowana do spalania i niszczenia tkanek dotkniętych nowotworami i brodawkami lub tkanek zakażonych chorobą9. Technika ta jest szczególnie przydatna w neurochirurgii i chirurgii oka9.
Nadmierne stosowanie diatermii może prowadzić do powstawania martwiczej tkanki, powodując infekcje i opóźniając proces gojenia10. Rzeczywiście, skutki uboczne, takie jak gwałtowne pożary i zmiany skórne w tkance, były zgłaszane po diatermii9. Ponadto wyrażono obawy dotyczące toksyczności dymu chirurgicznego uwalnianego przez diatermię do środowiska chirurgicznego, który może być wdychany przez uczestnika/pacjenta i personel operacyjny9. Rzeczywiście, stosowanie diatermii może spowodować toksyczność powietrza na sali operacyjnej równą tej, która powstaje przy wypaleniu sześciu papierosów11 i chociaż sale operacyjne zazwyczaj mają dobre systemy wentylacyjne, skażenie może utrzymywać się przez co najmniej 20 min12. Jednak u pacjentów poddanych operacji wycięcia migdałków metoda diatermii wykazała mniej, ale nieistotne, ból pooperacyjny 13 i krwawienie14 niż klasyczna metoda hemostazy podwiązania. Ogólnie rzecz biorąc, prawie nie istnieją dane naukowe dotyczące różnic w częstości występowania bólu pooperacyjnego i krwawień po biopsjach tkanki tłuszczowej u osób zdrowych. Biorąc pod uwagę brak dowodów i skutki uboczne diatermii, standaryzacja metody biopsji tkanki tłuszczowej bez diatermii jest uzasadniona. W związku z tym celem niniejszej pracy była standaryzacja techniki operacyjnej biopsji tkanki tłuszczowej jamy brzusznej, wykonywanej w znieczuleniu miejscowym metodą bez diatermii u zdrowych mężczyzn. Ponadto przedstawiono procedury pobierania tkanek w celu określenia ekspresji mRNA i stężenia białka oraz wykonania analiz histologicznych.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Badanie było zgodne ze standardami ustalonymi przez Deklarację Helsińską i zostało zatwierdzone przez Uniwersytet w Tesalii, Wydział Nauk o Ćwiczeniach, Komitet Etyki Politycznej.
1. Przygotowanie sprzętu chirurgicznego i materiałów eksploatacyjnych
- Umieść zdezynfekowane pole operacyjne na 4-kołowym stojaku chirurgicznym Mayo.
- Umieść następujące materiały eksploatacyjne i sprzęt chirurgiczny na 4-kołowym stojaku chirurgicznym Mayo:
Jedna para prostych nożyczek roboczych (15 cm)
Jeden skalpel (nr 11)
Jeden trzonek do skalpela
Jedna para zakrzywionych nożyczek (14 cm)
Jedna kleszczyk do komarów
Jedna para pęset Kocher
Jedna pęseta chirurgiczna
Powidon-jod (na jałowej gazie)
Jeden szew (4,0)
Jedna para prostych nożyczek (11 cm)
Jeden uchwyt na igłę (15 cm)
Pięć sterylnych gaz
Jedna przyczepna sterylna gaza
Jedna strzykawka 10 ml ze zdezynfekowaną igłą
10 ml 2% ksylokainy (bez adrenaliny) < BR / > Jedna para zdezynfekowanych rękawic chirurgicznych - Na osobnym stole należy umieścić następujące materiały:
Dwie probówki do mikrowirówek
Jedna probówka zawierająca 5 ml 10% formaliny
Jeden mały pojemnik zawierający 50-100 ml ciekłego azotu w temperaturze -190 °C.
2. Przygotowanie uczestników
- Poproś uczestników, aby przeszli 8-godzinną klasę fast15 przed zabiegiem biopsji.
- Poproś uczestników, aby powstrzymali się od ćwiczeń fizycznych, nadmiernych stresorów, alkoholu oraz aktywnego i biernego palenia tytoniu na 72 godziny przed biopsją16,17.
3. Wykonywanie podskórnej biopsji tkanki tłuszczowej
- Ułóż uczestnika na łóżku operacyjnym w pozycji leżącej.
- Zdezynfekuj obszar nacięcia za pomocą jodu powidonu.
- Wstrzyknij 10 ml 2% ksylokainy (bez adrenaliny) powoli i równomiernie18 w wybrane miejsce, aby służyło jako znieczulenie miejscowe.
- Umieść sterylne pole chirurgiczne nad obszarem, który ma pokryć ciało uczestnika, z wyłączeniem obszaru nacięcia.
- Co najmniej 3-5 minut później należy przyłożyć pęsetę do miejsca znieczulenia miejscowego i zapytać uczestnika, czy odczuwa ból19, aby upewnić się, że znieczulenie miejscowe zostało osiągnięte.
- Przymocuj skalpel nr 11 do rękojeści skalpela.
- Wykonaj nacięcie o długości 2-2,5 cm, 3-5 cm po lewej lub prawej stronie pępka.
- Usuń tkankę podskórną za pomocą prostych nożyczek operacyjnych o długości 15 cm.
- Gdy tkanka tłuszczowa zostanie odsłonięta, uchwyć ją pęsetą i parą zakrzywionych nożyczek o długości 14 cm.
- Wytnij i usuń około 1 g tkanki tłuszczowej.
- Po usunięciu tkanki umieść sterylne gazy na nacięciu, aby uzyskać hemostazę.
- Gdy hemostaza zostanie potwierdzona, uchwyć szew 4,0 za pomocą igły o długości 14 cm, a skórę pęsetą chirurgiczną, aż tkanka podskórna będzie widoczna.
- Włóż igłę do szwów w skórę, przesuwając się w kierunku tkanki podskórnej, podczas gdy skóra i podskórna są ściśle wyrównane.
- Za pomocą igły do szwów postępuj zgodnie z ciągłą techniką zygzakowatą w tkance podskórnej, aż zostanie wypchnięta na zewnątrz ze skóry. Kontynuuj, aż nacięcie skóry zostanie zamknięte.
- Zewnętrznie zawiąż szew.
- Oczyść miejsce nacięcia solą fizjologiczną i przykryj go lepką sterylną gazą.
4. Osadzanie tkanki
- Pobraną tkankę tłuszczową należy podzielić na trzy części: 150, 350 i 500 mg.
- Umieścić kawałki próbki tkankowej o wielkości 150 i 350 mg w probówkach do mikrowirówek.
- Zanurzyć dwie probówki do mikrowirówek w małym pojemniku z ciekłym azotem w temperaturze -190 °C aż do ostatecznego osadzenia w zamrażarce w temperaturze -80 °C.
UWAGA: Wcześniej za pomocą sterylnej igły przebić mały otwór w probówkach do mikrowirówek, aby uniknąć uszkodzenia kubka podczas zanurzania probówek do mikrowirówek w ciekłym azocie w temperaturze -190 °C. - Zanurzyć kawałek tkanki o wielkości 500 mg - przeznaczony do analizy histologicznej - w probówce zawierającej 5 ml 10% formaliny.
UWAGA: Kleszczyków do komarów należy używać tylko w przypadku nadmiernego krwawienia podczas zabiegu. W takich przypadkach należy złapać naczynie za pomocą kleszczy komarów, aby podwiązać i zamknąć, aż do uzyskania hemostazy.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Charakterystyka uczestników przedstawiona jest w Tabeli 1. Szwy w okolicy nacięcia odpadły w ciągu kolejnych 8-12 dni. Przeprowadziliśmy łącznie 115 biopsji tkanki tłuszczowej podskórnej przy użyciu metody chirurgicznej biopsji brzusznej bez użycia diatermii u zdrowych dorosłych mężczyzn (wiek: 35,2 ± 6,9 lat; wskaźnik masy ciała: 27,3 ± 4,4; oraz zawartość tkanki tłuszczowej w organizmie: 27,0 ± 9,0%). Nadmierne krwawienie po biopsji zaobserwowano w trzech przypadkach (c...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
Celem pracy była standaryzacja techniki operacyjnej biopsji tkanki tłuszczowej jamy brzusznej, wykonywanej w znieczuleniu miejscowym metodą bez diatermii u zdrowych mężczyzn. Diatermia jest powszechnie stosowana na sali operacyjnej; Mogą jednak wystąpić możliwe skutki uboczne (tj. gwałtowne pożary i toksyczność środowiskowa)9 oraz opóźnienia w gojeniu10. Te niepożądane efekty diatermii mogą stanowić zagrożenie dla zdrowia zarówno personelu operacyjnego, jak i pacje...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autorzy oświadczają, że nie mają konkurencyjnych interesów finansowych.
Podziękowania
Ta praca otrzymała dofinansowanie z programów Unii Europejskiej Horyzont 2020 (umowa o grant nr 645710) i 7. ramowych (umowy o grant nr 612547 i 319010). Autorzy pragną podziękować dr Fotini Sourli-Chasioti za pomoc w procedurze biopsji. Autorzy dziękują również panu Yiorgosowi Paterakisowi za jego cenną pomoc w przygotowaniu filmu.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Zdezynfekowane pole operacyjne | Hartmann | 23516-00 | |
| Stojaki na instrumenty ze stali nierdzewnej (majonez chirurgiczny) | Magazyn urządzeń medycznych Inc. | 32000 | |
| Nożyczki operacyjne proste 15 cm | Karl Storz | 791903 | |
| skalpel nr 11 | Swann-Morton | 203 | Bipolarny, numer katalogowy 429011 |
| Trzonek do szalika nr 3 | Karl Storz | 488090 | |
| Nożyczki zakrzywione 14 cm | Karl Storz | 511514, 752918 | |
| Kleszczyki do komarów | Karl Storz | 535012 | |
| Pęseta Kocher | Karl Storz | 530416 | Bipolarny, numer katalogowy 830316 |
| Pęseta chirurgiczna | Karl Storz | 793216 | Bipolarny, numer katalogowy 831016 |
| Powidon-jod | Różne | Nie dotyczy | |
| Szew 4.0 Vicryl | Johnsons | V4970H | |
| Nożyczki proste 11 cm | Karl Storz | 512511 DS | |
| Uchwyt na igły 15 cm | Karl Storz | 515515 | Bipolarny, numer katalogowy 213015 |
| Gazy sterylne | Hartmann | 3021 | |
| Α Sterylna gaza dhesive | Sprzęt medyczny Digas | 2889 | |
| 10 ml strzykawka ze zdezynfekowaną igłą | Alpha roztwory medyczne | 10310-55-0010 | |
| 2%-ksylokaina (bez adrenaliny) | Różne | Nie dotyczy | |
| Sterylne rękawiczki chirurgiczne | Sempermed | 10001 | |
| Rurki Eppendorf | Kartell | 16283 | |
| 10% formalina | Alpha medical solutions | 11016-30-2909 | |
| Probówki 120 ml | Sprzęt medyczny Digas | 9025 | |
| Ciekły azot o temperaturze -190° C | Odrodzenie | Nie dotyczy |
Bibliografia
- Bruening, W., et al. Systematic review: comparative effectiveness of core-needle and open surgical biopsy to diagnose breast lesions. Ann Intern Med. 152, 238-246 (2010).
- Beynen, A. C., Katan, M. B. Rapid sampling and long-term storage of subcutaneous adipose-tissue biopsies for determination of fatty acid composition. Am J Clin Nutr. 42, 317-322 (1985).
- Wang, Y., et al. Muscle and adipose tissue biopsy in older adults with type 2 diabetes . J Diabetes Mellitus. 1, 27-35 (2011).
- Mutch, D. M., et al. Needle and surgical biopsy techniques differentially affect adipose tissue gene expression profiles. Am J Clin Nutr. 89, 51-57 (2009).
- Ikeda, S., Sekijima, Y., Tojo, K., Koyama, J. Diagnostic value of abdominal wall fat pad biopsy in senile systemic amyloidosis. Amyloid. 18, 211-215 (2011).
- Alderete, T. L., et al. A novel biopsy method to increase yield of subcutaneous abdominal adipose tissue. Int J Obes. 39, 183-186 (2015).
- Padoin, A. V., et al. A comparison of wedge and needle hepatic biopsy in open bariatric surgery. Obes Surg. 16, 178-182 (2006).
- Kral, J. G., et al. Effects of surgical treatment of the metabolic syndrome on liver fibrosis and cirrhosis. Surgery. 135, 48-58 (2004).
- Fitzgerald, J. E., Malik, M., Ahmed, I. A single-blind controlled study of electrocautery and ultrasonic scalpel smoke plumes in laparoscopic surgery. Surg Endosc. 26, 337-342 (2012).
- Memon, M. Surgical Diathermy. Br J Hosp Med. 52, (1994).
- Tomita, Y., et al. Mutagenecity of smoke condensates induced by CO-laser irradiation and electrocauterization. Mutat Res. 89, 145-149 (1989).
- Brandon, H., Young, L. Characterisation and removal of electrosurgical smoke. Surg Serv Manag. 3, 14-16 (1997).
- Attner, P., Hemlin, C., Soderman, A. C. Ligasure versus diathermy scissors tonsillectomy: A controlled randomized study. Acta Otolaryngol. 130, 1180-1184 (2010).
- Ecker, T., Carvalho, A. L., Choe, J. H., Walosek, G., Preuss, K. J. Hemostasis in thyroid surgery: harmonic scalpel versus other techniques--a meta-analysis. Otolaryngol Head Neck Surg. 143, 17-25 (2010).
- Campbell, K. L., et al. A pilot study of sampling subcutaneous adipose tissue to examine biomarkers of cancer risk. Cancer Prev Res. 2, 37-42 (2009).
- Jamurtas, A. Z., et al. The effects of a single bout of exercise on resting energy expenditure and respiratory exchange ratio. Eur J Appl Physiol. 92, 393-398 (2004).
- Adriaens, P. E. M., Schoffelen, F. M. P., Westerterp, K. R. Intra-individual variation of basal metabolic rate and the influence of daily habitual physical activity before testing. Brit J Nutri. 90, 419-423 (2003).
- Latham, J. L., Martin, S. N. Infiltrative anesthesia in office practice. Am Fam Phys. 89, 956-962 (2014).
- Jurevic, R., et al. Plasma levels of 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine with young children undergoing dental procedures. Anesth Prog. 45, 87-90 (1998).
- Kale, S. S., Yende, S. Effects of Aging on Inflammation and Hemostasis through the Continuum of Critical Illness. Aging Dis. 2, 501-511 (2011).
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
