Ten artykuł wideo zawiera szczegółową demonstrację procedur wymaganych do skutecznego usunięcia trzustki myszy poprzez sekcję do analizy histologicznej i profilowania metabolicznego.
Artykuł metodologiczny
Ten artykuł wideo zawiera szczegółową demonstrację procedur wymaganych do skutecznego usunięcia trzustki myszy poprzez sekcję do analizy histologicznej i profilowania metabolicznego.
Badaliśmy specyficzny dla trzustki czynnik transkrypcyjny, 1a cre-rekombinazę; lox-stop-lox- mięsak szczura Kristen, glicyna do kwasu asparaginowego w kodonie 12 (Ptf1acre/+; Szczep myszy LSL-KrasG12D/+) jako model ludzkiego raka trzustki. Celem naszych obecnych badań jest identyfikacja nowych biomarkerów metabolicznych progresji raka trzustki. Przeprowadziliśmy profilowanie metaboliczne moczu, kału, krwi i ekstraktów z tkanek trzustki, a także analizy histologiczne trzustki w celu określenia stopnia zaawansowania nowotworu. Trzustka myszy nie jest dobrze zdefiniowanym narządem stałym, jak u ludzi, ale raczej jest rozproszoną tkanką miękką, która nie jest łatwa do zidentyfikowania przez osoby niezaznajomione z anatomią wewnętrzną myszy lub przez osoby, które mają niewielkie lub żadne doświadczenie w wykonywaniu sekcji narządów myszy. Celem tego artykułu jest przedstawienie szczegółowej demonstracji wizualnej, która poprowadzi nowicjuszy w usuwaniu trzustki myszy przez sekcję. Ten artykuł powinien być szczególnie cenny dla studentów i badaczy początkujących w badaniach, które wymagają pobrania trzustki myszy przez sekcję w celu profilowania metabolicznego lub analiz histologicznych.
Mysz stała się ważnym zwierzęcym modelem ludzkiego raka trzustki1,2. W Ptf1acre/+; Model mysi LSL-KrasG12D/+, onkogen mięsaka szczura Kristen (K-Ras) jest aktywowany wyłącznie w trzustce, co powoduje inicjację zmian przedrakowych w trzustce, znanych jako śródnabłonkowe neoplazje trzustki (PanINs), które postępują do gruczolakoraka przewodowego trzustki, powszechnie określanego jako PDACs3. Ten system modeli mysich zapewnia jeden z najlepszych dostępnych modeli zwierzęcych dla ludzkiego raka trzustki4,5, z d....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Procedury przeprowadzone w filmie i opisane poniżej zostały zatwierdzone przez Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) na Uniwersytecie Miami.
1. Test przygotowawczy i stymulacyjny
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Rysunek 1 przedstawia ogólny widok obszaru operacyjnego, a Rysunek 2 przedstawia obszar pooperacyjny. Chociaż ta konfiguracja zapewnia minimalną ilość sprzętu i przygotowań, osoby wykonujące procedurę mogą ją zmodyfikować, aby jak najlepiej dostosować ją do indywidualnych potrzeb. Protokół należy zoptymalizować zgodnie z konkretnymi wymaganiami eksperymentu. Procedura ta jest przeprowadzana w sposób kończący życie myszy, co wymag.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Znaczenie w odniesieniu do istniejących metod
Chociaż istnieją inne nieformalne filmy przedstawiające sekcje myszy, ten artykuł wideo stanowi pierwszą profesjonalną, recenzowaną, wizualną demonstrację wszystkich szczegółowych kroków wymaganych do ekstrakcji i pobrania trzustki myszy przez sekcję10. Ponieważ trzustka jest głównym narządem odpowiedzialnym za aktywność metaboliczną i produkcję insuliny, rozwarstwienie i pobranie trzustki pozwala na zachowanie cech fizjologicznyc.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Autorzy nie mają nic do ujawnienia.
MAK dziękuje za wsparcie dla tej pracy od National Institutes of Health / National Cancer Institute grant numer - 1R15CA152985-01A1. Projekt ten był również wspierany przez Miami University Undergraduate Research Award Program, Miami University Doctorate-Undergraduate Opportunities for Scholarship Program oraz Miami University Summer Scholars Program.
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Szklany słoik | Corning | 3140-150 | Szklany słoik użyty w filmie został wycofany z produkcji. To jest jego zamiennik. |
| Pokrywka szklanego | słoika Corning | 9985-150 | Szklana pokrywka słoika używana w filmie została wycofana. To jest jego zamiennik. |
| 15 ml Falcon Tubes | Fisher Scientific | 339650 | |
| Fisher Scientific | 9201 | ||
| Butelka do wyciskania | Fisher Scientific | 03-409-10DD | |
| 100% etanol | Fisher Scientific | 22-032-103 | |
| Formalina | Fisher Scientific | 245-684 | |
| Deski piankowe Kleszcze | 562908 | Therapak | |
| Fisher Scientific | 200205SHN | ||
| 1 mL 21G Strzykawki | BD Biosciences | 309624 | |
| 50 ml probówki Falcon | Fisher Scientific | 339652 | |
| 2,0 ml Probówki do mikrowirówek | Fisher Scientific | 02-681-258 | |
| Podkładki chirurgiczne | Fisher Scientific | S67011 | |
| Szpilki teowe Długość: 2" | Produkty ze sklepu | Advance X32T-05 | |
| Chusteczki sterylizujące | Professional Disposables International Inc. | Q85084 | |
| Pojemnik na ostre przedmioty | Fisher Scientific | 14-827-122 | |
| Waga analityczna | Marshall Scientific | ME-AE200 | |
| 4L Dewar | Taylor-Wharton | 4LD | |
| Płytkie szerokie usta Dewar | Fisher Scientific | F3087-V | |
| Pływający stojak na mikroprobówki | VWR | 60986-100 | |
| Fiolka kriogeniczna 1,2 ml, sterylna | Fisher Scientific | 10-500-25 | |
| Isothesia (Isoflurane) | Henry Schein Zdrowie zwierząt | 050033 | |
| ciekły azot | Bracia Wright | NIT-60-XX | |
| Szczep myszy Kras | Jackson Laboratory | OO8179 | |
| Szczep myszy Cre | MMRRC | OOO435-UNC |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Poproś o pozwolenie na ponowne wykorzystanie tekstu lub ilustracji tego artykułu JoVE
Poproś o pozwolenie