Ten protokół opisuje implantację siatki w przegrodzie odbytniczo-pochwowej owiec za pomocą techniki pojedynczego nacięcia pochwy, z i bez wprowadzania ramion kotwiczących pod kierunkiem trokaru.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Ten protokół opisuje implantację siatki w przegrodzie odbytniczo-pochwowej owiec za pomocą techniki pojedynczego nacięcia pochwy, z i bez wprowadzania ramion kotwiczących pod kierunkiem trokaru.
Ten protokół opisuje wprowadzanie siatki do przegrody odbytniczo-pochwowej u owiec przy użyciu techniki pojedynczego nacięcia pochwy, z i bez wprowadzania ramion kotwiczących pod kierunkiem trokara. Owce parzyste poddano rozwarstwieniu przegrody odbytniczo-pochwowej, a następnie wszczepiono implant z czterema ramionami kotwiczącymi lub bez nich, oba zaprojektowane tak, aby pasowały do anatomii owcy. Ramiona kotwiące zostały zamocowane za pomocą trokaru i techniki "na zewnątrz do wewnątrz". Ramiona czaszki przechodziły przez mięśnie zasłonowe, gracilis i przywodziciela wielkiego. Ramiona ogonowe były umocowane w pobliżu więzadła krzyżowo-guzowego, poprzez mięśnie kości ogonowej. Technika ta pozwala na naśladowanie zabiegów chirurgicznych wykonywanych u kobiet cierpiących na wypadanie narządów miednicy. Przestrzenie i elementy anatomiczne są łatwe do zidentyfikowania. Najważniejszą częścią zabiegu jest wprowadzenie trokaru czaszkowego, który może łatwo przeniknąć do jamy otrzewnej lub otaczających ją narządów miednicy. Można tego uniknąć poprzez bardziej rozległe rozwarstwienie zaotrzewnowe i prowadzenie trokara bardziej na boki. Podejście to jest przeznaczone wyłącznie do eksperymentalnego testowania nowych implantów na dużych modelach zwierzęcych, ponieważ wprowadzanie pod kontrolą trokaru nie jest obecnie stosowane klinicznie.
Wypadanie narządów miednicy jest klinicznie diagnozowane u połowy kobiet, które miały co najmniej jeden poród drogą pochwową, ale subiektywnie przeszkadza to połowie kobiet ogółem1. Podstawą terapii jest rekonstrukcja chirurgiczna przy użyciu natywnych tkanek lub materiałów implantologicznych, ale każda z tych metod ma swoje ograniczenia, w tym nawrót lub miejscowe powikłania2,3,4. Idealny implant nie został jeszcze zidentyfikowany; W związku z tym istnieje ciągłe zapotrzebowanie na innowacje produktowe i opracowanie odpowiedniej linii badań przedklinicznych przed wprowadzeniem nowych produktów i technik na rynek. Jednym z kroków w tej ścieżce jest ocena eksperymentalna na odpowiednich modelach zwierzęcych5,6. Idealnie byłoby, gdyby naśladowały środowisko anatomiczne, biomechaniczne i biologiczne. Jeśli chodzi o eksperymentalną ocenę nowych implantów, są one zazwyczaj najpierw testowane na mniejszych modelach, albo pod kątem biokompatybilności, albo pod kątem rekonstrukcji wad powłoki brzusznej. Tego typu eksperymenty zostały skrytykowane, ponieważ implanty nie są wprowadzane w obszar zainteresowania (tj. pochwę)7. Modele chirurgii pochwy są rzadsze, zwłaszcza gdy celem eksperymentu jest udokumentowanie biomechanicznych cech eksplantatów. Z tego powodu nastąpiło przejście od królików do owiec8. Dorosłe owce to duże modele zwierząt z rozsądną i dostępną pochwą. Mogą być one wykorzystywane do średnioterminowej oceny nowych implantów i możliwe jest odtworzenie ekspozycji pochwy za pomocą niektórych materiałów9,10,11,12,13. Nie tylko wymiary i anatomia pochwy i dna miednicy owiec są porównywalne z ludzkimi, ale także spontaniczne występowanie wypadania, które występuje u 15% owiec. Czynniki ryzyka wypadania nakładają się na siebie (tj. wielorodność, wcześniejsza historia TZP, zwiększone ciśnienie w jamie brzusznej wywołane wyższą masą ciała lub podczas wypasu na wzgórzach oraz porównywalne skutki (fito)estrogenów)6,14. W Europie owce są jedyną rozsądną alternatywą, ponieważ badania na naczelnych zostały prawie całkowicie zakazane. W tym przypadku model poszedł o krok dalej, naśladując przezpochwowe wprowadzanie implantów za pomocą trokarów i prowadnic do beznaprężeniowego umieszczania siatek w przegrodzie odbytniczo-pochwowej. Następnie zamocowano implant za pomocą zakotwiczenia ramion przez więzadła mięśni, co można uznać za równoważne praktyce klinicznej15,16. Do tej pory technika ta nie była badana, chociaż wielu uważa, że mogą wystąpić określone komplikacje z powodu stosowania tych dłuższych pasków i/lub przekłuwania struktur anatomicznych.
We wcześniejszym szczegółowym badaniu anatomicznym, dno miednicy owiec zostało porównane z miednicą samicy17. Jeśli chodzi o zakotwiczenie implantu, owce nie mają więzadła krzyżowo-kolcowego, ale mają bardzo dobrze rozwinięte i szerokie więzadło krzyżowo-guziczne. Nerw sromowy przebiega nad nim brzusznie, co sprawia, że używanie tego punktu orientacyjnego jako punktu zawieszenia jest niebezpieczne. I odwrotnie, mięsień ogonowy i jego powięź, a także błona zasłonowa, są dostępne przez przestrzeń odbytniczo-pochwową. W tym miejscu zaproponowano dostęp i położenie struktur anatomicznych do mocowania ramion kotwiących. Omówiono instrumenty, które można wykorzystać do pozycjonowania siatki. Na koniec opisano również stosunek ramion lub trokarów do sąsiednich struktur anatomicznych, takich jak naczynia i nerwy, a także potencjalne powikłania śródoperacyjne.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Zgoda etyczna na przeprowadzenie tego eksperymentu została uzyskana z Komisji Etyki ds. Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu KU Leuven (P065/2013). Zwierzęta były traktowane zgodnie z aktualnymi krajowymi wytycznymi dotyczącymi dobrostanu zwierząt.
1. Materiały i zwierzę doświadczalne

Rysunek 1: Trokar i implanty. (A) Schemat trokara. (B) implant w kształcie litery H z polifluorku winylidenu (PVDF) wraz ze szczegółowym widokiem części centralnej (panel C). Jego kształt został zainspirowany czteroramiennymi siatkami stosowanymi obecnie w transvaginalnej korekcji wypadania narządów. Prostokątny korpus (30 x 40 mm2) jest bocznie przedłużone przez cztery wyciągnięte ramiona (150 x 10 mm2). Wymiary ramion zostały zaprojektowane tak, aby były wystarczająco długie do przebicia odpowiednich struktur zawiesin, na podstawie wcześniejszych badań anatomicznych17. (D) Prostokątny implant (30 x 40 mm2). Oba implanty zostały wykonane z polifluororku winylidenu; charakterystyka i właściwości tkaniny znajdują się w Tabela 1.

Rycina 2: Operacja zwierząt. (A) Owca ułożona w pozycji na plecach, z biodrami w maksymalnym zgięciu uzyskanym poprzez unieruchomienie kończyn dolnych. (BZewnętrzne punkty wejścia dla trokarów znajdują się po stronie brzusznej (pusta strzałka) oraz grzbietowo na bocznych fałdach ogona (pełna strzałka).C) Położenie brzusznych punktów wpięcia; przerywana linia w środku reprezentuje płaszczyznę pośrodkową zwierzęcia. (D) Preparowana przegroda prostniczo-pochwowa. (E) Wprowadzenie trokara brzusznego przez mięśnie po stronie przyśrodkowej uda, otwór zasadkowy oraz przestrzeń przypochwową. Trajektoria wprowadzenia trokara jest kontrolowana palcem. (F i GPo umieszczeniu trokara wprowadzana jest taśma druciana (otwarta strzałka), do której mocowane jest ramię siatki dopochwowej.H) Końcowa pozycja ramion brzusznych (pełne strzałki) i grzbietowych (pusta strzałka). (ICzęść środkowa jest umieszczana bez napięcia pomiędzy ścianą pochwy a powięzią odbytnicy.
2. Procedura chirurgiczna

Rysunek 3: Schematyczny rysunek miednicy owczej, z ramionami kranialnymi przechodzącymi przez otwór obturatora i ramionami kaudalnymi przechodzącymi przez fałdy ogona. Szerokie więzadło krzyżowo-guzowe zaznaczono kolorem niebieskim. Mniejszy panel ilustruje ułożenie ramion u zwierzęcia w pozycji leżącej, bezpośrednio przed skróceniem nadmiaru materiału. Panel główny przedstawia tę samą sytuację, lecz po usunięciu skóry i mięśni.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Zarządzanie w konfiguracji do dłuższych obserwacji
Po zabiegu chirurgicznym, w celu zabezpieczenia pozycji implantu, można wprowadzić tampon w pochwie (pakiet gazy nasączonej roztworem soli fizjologicznej, wprowadzony do pochwy bezpośrednio po operacji) na 24 h. Owcę należy umieścić w klatce rekonwalescencyjnej i monitorować funkcje oddechowe do momentu pełnego wybudzenia. Następnie można przenieść owcę do stajn...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
W tym miejscu opisujemy eksperymentalną procedurę u owiec, mającą na celu naśladowanie rozwarstwienia pochwy i przezpochwowego wprowadzenia siatki implantu z ramionami kotwiącymi lub bez. Kolejne kroki i instrumenty zostały zainspirowane zabiegami chirurgicznymi wykonanymi w przypadku POP i wysiłkowego nietrzymania moczu 15,16,19,20. Po wstępnych sekcjach anatomicznych nadal występowały pewne p...
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Ten program badawczy dotyczący modelu owczego był wspierany przez bezwarunkowy grant od Medri i Blasingame, Burch, Garrard i Ashley (Atlanta GA, USA). Realizacja umów odbywa się za pośrednictwem biura transferowego Leuven Research and Development. Sponsorzy nie ingerowali w planowanie, realizację ani raportowanie tego eksperymentu, ani nie są właścicielami wyników. NS i LH są beneficjentami grantu Komisji Europejskiej w ramach 7PR (projekt Bip-Upy; NMP3-LA-2012-310389). AF otrzymało wsparcie z grantu Komisji Europejskiej w ramach programu partnerstwa przemysłowo-akademickiego (251356).
Dziękujemy Ivanowi Laermansowi, Rosicie Kinart, Ann Lissens (Centrum Technologii Chirurgicznych, KU Leuven, Leuven, Belgia). Jo Verbinnen i Kristof Reyniers (Vesalius Institute of Anatomy, Faculty of Medicine, KU Leuven, Leuven, Belgia) zapewnili wsparcie techniczne podczas eksperymentu. Dziękujemy Leen Mortier za pomoc w zarządzaniu danymi i manuskryptami. Dziękujemy firmie FEG Textiltechniken za wyprodukowanie prototypowych siatek, ich sterylizację i bezwarunkowe przekazanie do badań.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Zwierzęta: | |||
| samice owiec (45 - 65 kg) | Zoö Instytut Techniczny KU Leuven | NA | experimetnal animal |
| Odzież sterylna: | |||
| serweta sterylna 45 x 75 cm | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 33002 | inny materiał |
| sterylny serweta OR 150 x 180 cm | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 33009 | inny materiał |
| sterylne świeci 2x | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 16652 | inny materiał |
| sterylny fartuch chirurgiczny 2x | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 19342 | inny materiał |
| nasadka chirurgiczna na głowę 2x | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 17427 | inny materiał |
| maska chirurgiczna na twarz 2x | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 11983 | inny materiał |
| Inny materiał | |||
| implant FEG Textiltechnik GmbH, Akwizgran, Niemcy | NA | specjalnie zaprojektowany implant | |
| 3/0 szew polipropylenowy | Prolene, Ethicon, Diegem, Belgia | 8762H | materiał do zszywania |
| 3/0 szew poligekapranowy | Vicryl, szew Ethicon | J311H | |
| materiał gaziki waciki 10 x 10 cm 10x, 12-warstwowe | Lohmann & Rauscher, Regensdorf, Niemcy | 11574 | |
| strzykawka z innego materiału 10 ml | Becton Dickinsosn S.A., Madryt, Hiszpania | 300613 | do aqua-dyspreparacji |
| 16 mm | Terumo, Leuven, Belgia | NN-2238R | aqua-dyssekcja |
| Sprzęt chirurgiczny: | |||
| ostrze nr 22 | Nauki piękne, Heidelberg, Niemcy | 10022-00 | chirurgiczny instrumenty |
| Kleszcze do tkanek Allis 1x | Heidelberg, Niemcy | 11091-15 | chirurgiczne |
| Kleszcze standardowe 1 x 2 teeth 1x | Heidelberg, Niemcy | 11023-14 | narzędzia chirurgiczne |
| Kleszcze standardowe proste ząbkowane 1x | Science, Heidelberg, Niemcy | 11000-14 | narzędzia chirurgiczne |
| Rękojeść skalpela 1x | Fine science intruments, Heidelberg, Niemcy | 10004-13 | instrumenty chirurgiczne |
| Kleszcze Halsteada-Mosquito 2x | science, Heidelberg, Niemcy | 13008-12 | narzędzia chirurgiczne |
| Nożyczki do standardowych wzorów 1x | Heidelberg, Niemcy | 14001-14 | instrumenty chirurgiczne |
| Nożyczki Metzenbaum 1x | Intrumenty naukowe, Heidelberg, Niemcy | 14016-18 | Instrumenty chirurgiczne |
| Crile Drewniany uchwyt na igły 1x | Akcesoria do nauk ścisłych, Heidelberg, Niemcy | 12003-15 | narzędzia chirurgiczne |
| Kleszcze Kell 1x | Akcesoria do nauk ścisłych, Heidelberg, Niemcy | 13018-14 | Instrumenty chirurgiczne |
| Długi samozatrzymujący się retraktor Starr z ośmioma ostrymi haczykami 5 mm | Cooper Surgical, Tumbull, USA | 3704 | instrumenty chirurgiczne |
| Heaney Simon Retraktor dopochwowy | Materiały i sprzęt medyczny co., Katy, Teksas, USA | 403-129Instrumenty | chirurgiczne |
| Trocar (Insnare) | Bard, West Sussex, Wielka Brytania | NA | dowolny trokar na rynku do implantacji siatki przezpochwowej |
| Leki: | |||
| klawulanian amoksycyliny 1000 mg / 300 ml (ampicylina) | GSK, Wavre, Belgia | NA | antybiotyki |
| buprenorfina 0,3 mg/ml + chlorokrezol 1,35 mg/ml (Vetregesic) | Ecuphar, Oostkamp, Belgia | NA | znieczulenie |
| ketamin HCL 100 mg/ml (Ketamina 1000) | Ceva Sante Animale, Bruksela, Belgia | NA | znieczulenie |
| izofluran (IsoFlo) | Abbott Laboratories Ltd, Maidenhead, Berkshire, Wielka Brytania | Znieczulenie NA | |
| poliwidon jodowy 7,5% (Braunol) | B. Braun Medical, Machelen, Belgia | NA | miejscowa dezynfekcja |
| roztwór soli 500 ml | B. Braun Medical, Machelen, Belgia | NA | aqua-dissection |
| XXYLAZINE HCl , 1 mL/50 kg | Vexylan, Ceva Sante Animale, Belgia | NA | premedykacja |
| siarczan atropiny 15 mg / ml (), | Viatris, Belgia | NA | premedykacja |
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.