Test rozpoznawania obiektów (ORT) to prosty i skuteczny test do oceny uczenia się i pamięci u myszy. Metodologia została opisana poniżej.
Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.
Artykuł metodologiczny
Nowatorski test rozpoznawania obiektów do badania uczenia się i pamięci u myszy
W tym artykule
Podsumowanie
Streszczenie
Test rozpoznawania obiektów (ORT) jest powszechnie używanym testem behawioralnym do badania różnych aspektów uczenia się i pamięci u myszy. ORT jest dość prosty i można go ukończyć w ciągu 3 dni: dzień przyzwyczajenia, dzień treningu i dzień testu. Podczas treningu mysz może eksplorować 2 identyczne obiekty. W dniu testu jeden z obiektów treningowych jest zastępowany nowym obiektem. Ponieważ myszy mają wrodzoną preferencję do nowości, jeśli mysz rozpozna znajomy obiekt, spędzi większość czasu przy nowym obiekcie. Ze względu na tę wrodzoną preferencję nie ma potrzeby stosowania pozytywnego lub negatywnego wzmocnienia ani długich harmonogramów treningowych. Dodatkowo ORT może być również modyfikowany do wielu zastosowań. Interwał retencji można skrócić w celu zbadania pamięci krótkotrwałej lub wydłużyć w celu zbadania pamięci długotrwałej. Interwencja farmakologiczna może być stosowana w różnych momentach przed treningiem, po treningu lub przed przypomnieniem w celu zbadania różnych faz uczenia się (tj. przyswojenia, wczesnej lub późnej konsolidacji lub przypomnienia). Ogólnie rzecz biorąc, ORT jest stosunkowo mało stresującym, skutecznym testem pamięci u myszy i jest odpowiedni do wykrywania zmian neuropsychologicznych po manipulacjach farmakologicznych, biologicznych lub genetycznych.
Wprowadzenie
Test rozpoznawania obiektów (ORT), znany również jako test rozpoznawania nowych obiektów (NOR), jest stosunkowo szybkim i skutecznym sposobem testowania różnych faz uczenia się i pamięci u myszy. Został pierwotnie opisany przez Ennaceura i Delacoura w 1988 roku i używany głównie w szczurach1; Jednak od tego czasu został z powodzeniem zaadaptowany do użytku w myszach2,3,4,5,6,7. Test opiera się na zaledwie trzech sesjach: jednej sesji przyzwyczajenia....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Protokół
Wszystkie procedury przeprowadzone tutaj zostały przedłożone i zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania i zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi NIH.
1. Wybór obiektów i konfiguracja eksperymentalna
- Wybierz obiekty, które są na tyle różne, że mogą być łatwo rozróżniane przez myszy, ale mają podobny stopień złożoności (tekstura, kształt, wzór kolorów i jasność itp.), aby zminimalizować potencjalną preferencję obiektu, która może zniekształcić wyniki (zobacz Ennaceur 2010, aby uzyskać pełny opis wyboru obiektu7).
- Test na wrodzone preferen....
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Wyniki
Ogólny schemat eksperymentalny dla ORT przedstawiono na Rysunku 2. W dniu habituacji (T0) myszy są umieszczane w pustej arenie na 5 min. Dwadzieścia cztery godziny później myszy są ponownie umieszczane w komorze z dwoma identycznymi obiektami i mogą swobodnie eksplorować otoczenie przez maksymalnie 10 min (T1). W dniu testowym (T2) myszy są ponownie umieszczane w arenie, ale tym razem z jednym znanym i jednym nowym obiektem, i mogą eksplorować przez maksymaln.......
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Dyskusja
ORT jest wydajną i elastyczną metodą badania uczenia się i pamięci u myszy. Podczas przygotowywania eksperymentu należy wziąć pod uwagę szereg zmiennych, które mogą mieć wpływ na wynik. Jak omówiono w reprezentatywnych wynikach, obciążenie myszy będzie miało wpływ zarówno na czas eksploracji, jak i na interwał retencji. Skrócenie czasu eksploracji może zniekształcić lub zamaskować wyniki w analizie dyskryminacji bezwzględnej 2,3,5,30,32.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Oświadczenia
Autor nie ma nic do zdradzienia.
Podziękowania
Praca cytowana i wcześniej opublikowana przez autora była wspierana przez grant z Narodowego Instytutu Zdrowia Psychicznego (MH088480). Autorka chciałaby podziękować swojemu byłemu mentorowi, dr Jamesowi O'Donnellowi za wsparcie w tym projekcie. Publikacja jest finansowana z grantu Narodowego Instytutu Zdrowia (T32 DA007135).
....Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Materiały
| Nazwa | Firma | Numer katalogowy | Komentarze |
|---|---|---|---|
| Aparat Open Field Box | Panlab/Harvard | LE800SC | Dostępny w kolorze szarym, białym lub czarnym |
| ANY-maze | Stoelting Co. | 60000 | System śledzenia zachowań |
| EthoVisionXT 12 | Noldus | ; wymaga 3-punktowego śledzenia | |
| Kamera wideo | Każda | kamera wideo powinna być zamontowana bezpośrednio nad głową urządzenia | |
| 70% etanolu | Fisher Scientific | BP2818-4 | Przed rozpoczęciem testów i pomiędzy próbami każdy obiekt powinien być dokładnie oczyszczony. Podłoga i ściany urządzenia również powinny być czyszczone. |
Bibliografia
- Ennaceur, A., Meliani, K. A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats III. Spatial vs. non-spatial working memory. Behav. Brain Res. 51 (1), 83-92 (1988).
- Akkerman, S., et al.
Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.
Przedruki i uprawnienia
