Ocena upośledzenia pamięci przestrzennej w mysim modelu urazowego uszkodzenia mózgu przy użyciu promienistego labiryntu z bieżnika wodnego

Summary

Tutaj prezentujemy protokół testu poznawczego specyficznego dla myszy, który nie wymaga pływania. Ten test może być wykorzystany do skutecznego odróżnienia kontrolowanych myszy z urazowym uszkodzeniem mózgu wywołanym uderzeniem kory mózgowej od pozorowanych kontroli.

Abstract

Pomimo niedawnego wzrostu wykorzystania modeli mysich w badaniach naukowych, badacze nadal korzystają z zadań poznawczych, które zostały pierwotnie zaprojektowane i zatwierdzone do użytku na szczurach. Test labiryntu pamięci przestrzennej Radial Water Tread (RWT) (zaprojektowany specjalnie dla myszy i niewymagający pływania) wykazał wcześniej, że skutecznie odróżnia kontrolowane myszy TBI wywołane uderzeniem kory mózgowej od kontroli pozorowanych. W tym miejscu przedstawiono szczegółowy protokół tego zadania. Labirynt RWT wykorzystuje naturalną tendencję myszy do unikania otwartych przestrzeni na rzecz przytulania się do boków aparatu (thigmotaxis). Ściany labiryntu są wyłożone dziewięcioma otworami ewakuacyjnymi umieszczonymi nad podłogą aparatu, a myszy są szkolone w używaniu wskazówek wizualnych do zlokalizowania otworu ewakuacyjnego, który prowadzi z labiryntu. Labirynt jest wypełniony calem zimnej wody, wystarczającej do zmotywowania do ucieczki, ale nie na tyle głębokiej, aby mysz musiała pływać. Okres akwizycji trwa tylko cztery dni treningowe, z testem zachowania pamięci w piątym dniu i testem pamięci długotrwałej w dniu 12. Przedstawione tutaj wyniki sugerują, że labirynt RWT jest wykonalną alternatywą dla zatwierdzonych na szczurach, opartych na pływaniu testów poznawczych w ocenie deficytów pamięci przestrzennej w mysich modelach TBI.

Introduction

Zaburzenia pamięci są jednymi z najczęstszych objawów zgłaszanych przez pacjentów po urazowym uszkodzeniu mózgu (TBI)^1,2. Dokładna identyfikacja i ocena analogicznych deficytów pamięci w zwierzęcych modelach TBI są zatem niezbędne do zrozumienia tego schorzenia i jego leczenia. W tym miejscu przedstawiamy protokół do testowania pamięci przestrzennej w mysim modelu TBI z wykorzystaniem labiryntu Radial Water Tread (RWT). Wcześniej wykazano, że aparat ten ocenia deficyty poznawcze w mysich modelach TBI³ i stanowi potencjalną alternaty....

Protocol

Wszystkie procedury i obchodzenie się ze zwierzętami zostały przeprowadzone zgodnie z wytycznymi dotyczącymi opieki nad zwierzętami wydanymi przez National Institutes of Health oraz przez University of Washington Animal Care and Use Committee.

1. Chirurgia

1. Znieczulić mysz 5% izofluranem w pudełku indukcyjnym do utraty przytomności. Potwierdź znieczulenie poprzez zmniejszenie częstości oddechów i brak odruchu wycofania po uszczypnięciu palca
.
2. Utrzymuj znieczulenie przez stożek nosowy na poziomie 2-2,5% przez cały czas operacji. Monitoruj częstość oddechów przez cały czas operacji, aby upewnić się, że mysz pozostaje niep....

Results

Labirynt RWT (Rysunek 1) został wykorzystany do zbadania deficytów pamięci przestrzennej zależnych od urazów u myszy losowo przydzielonych do otrzymania kontrolowanego TBI wywołanego uderzeniem w korę mózgową lub pozorowanej operacji. Uraz powstał w wyniku elektromagnetycznego uderzenia korowego z wypukłą końcówką o średnicy 3 mm i następującymi parametrami urazu: prędkość uderzenia 6 m/s, głębokość penetracji 1 mm i czas kontaktu 200 ms. Myszy otrzymały testy poznawcz.......

Discussion

Przedstawiony tutaj protokół labiryntu RWT z powodzeniem odróżnia myszy TBI indukowane przez CCI od pozorowanych kontroli i stanowi wykonalną, skoncentrowaną na myszy, alternatywę dla labiryntu kołowego MWM i Barnesa. Podczas gdy przedstawione tutaj wyniki mówią tylko o zastosowaniu labiryntu RWT w modelu myszy TBI, aparat ten był z powodzeniem stosowany w modelach starszych i transgenicznych, w których niezgodność spowodowana stresem wynikająca z testów opartych na pływaniu wykonanych przy użyciu MWM^by.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
35 gal. Okrągła wanna ze stali zanurzonej na gorąco	Home Depot	Internet #206638142	Potrzebne: 1
1-1 / 2 cala. ABS DWV SPG x SJ Trap Adapter	Depot	Internet #100344703, SKU sklepu #188956	Potrzebne: 9
1-3/4 cala x 1-7/16 cala. gumowy korek	Home Depot	Internet #100114974 Sklep SKU #755844	Potrzebne: 8
1-1 / 2 cala. ABS DWV 90 stopni Hub x Hub Elbow	Home Depot	Internet #100346663 Sklep SKU #188603	Potrzebne: 1
HDX 10 Gal. Torba do przechowywania	Home Depot	Internet #202523587 Store SKU #258804 Store SO SKU #258804	Potrzebne: 1
uderzenie Jeden impaktor stereotaktyczny dla CCI	Leica Biosystems	39463920	Potrzebne: 1
noniusz stereotaktyczny z ręcznym instrumentem stereotaktycznym Fine Drive dla małych zwierząt	Leica Biosystems	39463001	Potrzebne: 1