$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Oświadczenie etyczne: Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Wykorzystania Zwierząt Uniwersytetu Stanowego Mississippi zatwierdził wszystkie techniki chwytania, obchodzenia się i znakowania zgodnie z protokołami 04-068, 07-036, 10-033 i 13-034.
1. Ustanowienie miejsc chwytania, unieruchomienie i transport dzikich jeleni bielików
- Zidentyfikuj nieruchomości publiczne i prywatne, które są zarejestrowane w programie Deer Management Assistance Program22 i ustanów ≥29 miejsc przechwytywania w trzech regionach źródłowych w stanie Missisipi w USA.
- Zidentyfikuj kilka miejsc schwytania w każdym regionie źródłowym, aby upewnić się, że zakres zmienności genetycznej obecnej w populacji regionalnej zostanie uchwycony.
- Uwaga: W tym przypadku regiony źródłowe obejmowały Deltę, która obejmuje prawie 17% całkowitej powierzchni lądowej w Mississippi w USA i jest uważana za region glebowy wysokiej jakości, w którym rolnictwo jest głównym zastosowaniem gruntów23,24. Wszystkie badane zwierzęta zostały schwytane z tego regionu w obrębie rozmieszczenia O. v. virginianus25. Inne regiony obejmowały region Thin Loess (górny i dolny cienki less łącznie), który obejmuje prawie 14% całkowitej powierzchni lądowej w Mississippi w USA i jest uważany za region glebowy średniej jakości. Rolnictwo jest również głównym sposobem użytkowania gruntów w regionie Thin less, choć nie tak powszechnym jak w Delta23,24. Wszystkie badane zwierzęta zostały schwytane z tego regionu w obrębie rozmieszczenia O. v. virginianus21. Wreszcie, region glebowy Lower Coastal Plain (LCP) obejmuje prawie 22% Missisipi i jest klasyfikowany jako region glebowy o niskiej jakości. Głównymi zastosowaniami gruntów w LCP są produkcja drewna sosnowego i wypas zwierząt gospodarskich23,24. LCP pokrywa się również z rozmieszczeniem geograficznym O. v. osceola; cztery z sześciu populacji źródłowych znajdowały się w promieniu 21 km od tego rozmieszczenia25. Ten podgatunek został opisany jako mniejszy niż O. v. virginianus26.

Rysunek 1: Populacje źródłowe. Regiony fizjograficzne, w których złapano ciężarne matki i jelonki w Mississippi, USA. Ten rysunek został zmodyfikowany z reference31. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
- Wybierz potencjalne miejsca odłowu, które spełniają następujące kryteria: cechy siedliska sprzyjające przemieszczaniu się jeleni, bliskość dróg dojazdowych oraz rozmieszczenie na badanym obszarze.
UWAGA: Miejsca przechwytywania muszą umożliwiać ukrycie technika chwytania.
- Miejsca przynęty z około 10 kg łuskanej kukurydzy, aby zachęcić jelenie do odwiedzenia i oceny użycia na podstawie spożycia przynęty oraz jeleni sfotografowanych przez kamery wrażliwe na ruch. Przenieś się w inne miejsca, jeśli jelenie nie pojawią się w miejscach z przynętą w ciągu 5-7 dni.
- Podczas wydarzeń związanych z przechwytywaniem usiądź w ukrytym "stojaku".
- Postaw w odległości około 20 m z wiatrem od stosu przynęty, biorąc pod uwagę dominujący kierunek wiatru, aby jelenie zbliżające się do przynęty były mniej zdolne do wyczucia technika chwytania.
UWAGA: Zdecydowanie preferowane są podwyższone stojaki i wymagane są szelki bezpieczeństwa. Istnieje kilka odmian stojaków z różnych źródeł komercyjnych, a ich użytkowanie różni się w zależności od osobistych preferencji. Na przykład stojak z blokadą obejmowałby siedzenia z drabinką umożliwiającą dostęp przymocowaną do drzewa za pomocą pasów. Przenośne stojaki wspinaczkowe mogą być wnoszone przez technika chwytania i pozwalają na zwiększenie mobilności, ponieważ technik może wybrać konkretne drzewo po przybyciu na miejsce schwytania. Przenośne stojaki wspinaczkowe są ograniczone do zastosowania na prostych drzewach bez gałęzi na wybraną wysokość.
- Użyj pistoletu do strzałek sprzężonego ze strzałką radiotelemetryczną o pojemności 3 cm3, aby dostarczyć mieszaninę chlorowodorku teletaminy (4,4 mg/kg) i chlorowodorku ksylazyny (2,2 mg/kg).
- Zaplanuj działania związane z chwytaniem tak, aby zbiegły się z typowym cyklem aktywności zmierzchowej jelenia27. Każdą próbę schwytania rozpocznij 2-3 godziny przed zachodem słońca.
- Kontynuuj przechwytywanie przez 2-3 godziny po zachodzie słońca, używając gogli noktowizyjnych i lasera kolimatorowego do umieszczania strzałów, jeśli jelenie nie zostaną schwytane w ciągu dnia.
- Strzelaj do jeleni, gdy są bocznie i nieruchome.
UWAGA: Tylna ćwiartka jelenia jest celem, ponieważ ma znaczną tkankę mięśniową i znajduje się z dala od serca i płuc.
- Odczekaj około 15 minut, aż rzucane zwierzęta docelowe (sześciomiesięczne jelonki obu płci lub ciężarne dorosłe samice) zostaną całkowicie unieruchomione, zanim zlokalizujesz je za pomocą kierunkowego sprzętu radiotelemetrycznego.
- Upewnij się, że osoby są uspokojone, sprawdzając, czy nie ma odruchów ocznych (mruganie). Następnie nałóż maść okulistyczną na oczy i zawiąż oczy jelenia, aby zmniejszyć stres.
UWAGA: Utrata termoregulacji jest konsekwencją unieruchomienia.
- Użyj termometru doodbytniczego, aby ocenić temperaturę ciała po wyzdrowieniu. Ciepły jeleń z podgrzewanymi kocami, jeśli temperatura zwierzęcia jest niższa niż 37,7 °C. Chłodny jeleń z okładami z lodu, jeśli temperatura zwierzęcia przekracza 40,0 °C.
- Umieść jelenia w pozycji sterowej na noszach w stylu wojskowym i przetransportuj jelenia z miejsca schwytania do zamkniętej przyczepy.
- Po umieszczeniu jelenia w przyczepie, odwróć działanie ksylazyny HCl za pomocą 0,125 mg / kg johimbiny HCl28.
- Przetransportuj wszystkie schwytane jelenie do żądanego obiektu przetrzymywania w niewoli (np. Mississippi State University Rusty Dawkins Memorial Deer Unit; MSU Deer Unit) i utrzymuj je oddzielnie według regionu źródłowego.
2. Obiekty w niewoli i ogólne praktyki hodowlane zwierząt badawczych
UWAGA: Jednostka jeleni MSU jest podzielona na pięć zagród o powierzchni od 0,4 do 0,8 ha.
- Przykryj z każdej strony każdy długopis ściereczką przeciwsłoneczną, aby działała jako wizualna i fizyczna bariera między pisakami. Tkanina zacieniająca pomaga zmniejszyć obrażenia i zapewnia cień w miesiącach letnich.
- Umieść 1-2 podwyższone żaluzje skrzynkowe na jednym końcu każdego pióra, aby ułatwić zdarzenia rzucania podczas zbierania danych.
- Umieść dwa karmniki w stylu korytowym na oddzielnych końcach każdej zagrody, aby zmniejszyć konkurencję o pożywienie wśród jeleni. Zapewnij również koryto na wodę w każdym kojcu.
- Zapewnij jeleniom wysokiej jakości dietę (20% surowego białka w granulkach z jelenia) ad libitum.
UWAGA: W tym przypadku dodatkowe dostępne pasze w zagrodach obejmowały (Trifolium spp) i kostrzewę (Festuca spp) wraz z samosiewami traw i traw .
- Jeśli to możliwe, utrzymuj dostępne pasze w zagrodach, stosując mieszaninę herbicydów do zwalczania chwastów szerokolistnych i traw, stosując dawki mieszanki podane na odpowiednich etykietach.
UWAGA: Prawdopodobnie konieczne będzie korzystanie z obiektów poza kampusem w celu zakwaterowania ≥5,5-miesięcznych chłopców. Obiekty te składały się z dwóch zagród o powierzchni 0,7 ha na każdej z trzech posesji, w których stosowano praktyki hodowlane podobne do jednostki jeleni MSU.

Rysunek 2: Lokalizacje obiektów przechwytujących. Obszar badań, w którym znajdowały się urządzenia satelitarne i jednostka jeleni Uniwersytetu Stanowego Mississippi (MSU). Zacienione obszary oznaczają Oktibbeha (A), Noxubee (B), Attala (C), Scott (D) i Copiah (E), hrabstwa Mississippi, USA. Ten rysunek został zmodyfikowany z reference34. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
3. Zwalczanie pasożytów i chorób
- Monitorowanie zwierząt badawczych pod kątem pasożytów glisty (Strongyloides spp.) za pomocą flotacji kałowej z pasożytami mierzonymi w postaci jaj na gram (EPG).
- Jeśli występuje w wysokich stężeniach, należy zapewnić zwalczanie pasożytów, podając granulowany robak (substancja czynna fenbendazol) w ilości około 0,77 kg granulowanego robaka na 22,7 kg paszy w maju.
- Jeśli poziom pasożytów utrzymuje się na wysokim poziomie po początkowym leczeniu, należy zastosować preparat do nalewania iwermektyny (5 mg/ml)29, wymieszać w ilości 2 ml/0,45 kg i podać zwierzętom w ilości 0,45 kg paszy poddanej działaniu środka na 45,4 kg masy zwierzęcia.
UWAGA: Krwotoczna choroba zwierzynieniowa jest czasami śmiertelną chorobą wirusową przenoszoną przez gryzącą muszkę (Culicoides spp.) w miesiącach letnich i jesiennych. Jeśli jest obecny, potraktuj placówkę badawczą środkiem owadobójczym (5% insektycydu o bardzo małej objętości) 2-3 razy w tygodniu od 1 lipca do 1 października, aby zmniejszyć częstość występowania wektorów wśród zwierząt badawczych. Rozpyl ten środek owadobójczy w każdym kojcu i na całym obwodzie obiektu około 90 minut przed oficjalnym zachodem słońca za pomocą zamgławiacza. Preferowane metody zwalczania pasożytów i chorób są unikalne dla każdego obiektu trzymanego w niewoli. Podczas wszelkich badań nad dziką fauną i florą w niewoli należy konsultować się z weterynarzami, aby zapewnić zdrowie i bezpieczeństwo zwierząt.
4. Gromadzenie danych

Rysunek 3: Zbieranie danych o nowonarodzonych jelonkach. Pomiar długości tylnej stopy nowonarodzonego jelonka w Mississippi State University Rusty Dawkins Memorial Deer Unit w hrabstwie Oktibbeha w stanie Mississippi, USA. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
- Codziennie przeszukuj ośrodek w niewoli w poszukiwaniu jelonków w okresie porodowym.
- Unikalnie oznacz nowonarodzone jelonki średnimi plastikowymi kolczykami za pomocą kolczyka do uszu z antybiotykiem nałożonym na męski koniec kolczyka, aby zapobiec potencjalnej infekcji. Umieść kolczyk mniej więcej na środku ucha jelonka.
- Zmierz masę ciała (z dokładnością do 0,01 kg) za pomocą cyfrowej wagi wiszącej i zmierz długość tylnej stopy oraz całkowitą długość ciała (najbliższą mm).
- Zbierz próbki włosów i wyślij je do odległego miejsca w celu przypisania przodków (patrz Tabela materiałów).
UWAGA: Przypisanie rodziców zostało dokonane przy użyciu DNA w oparciu o zastrzeżoną, niestatystyczną bazę danych języka zapytań o niestandardowej strukturze. W porównaniu alleli parami, odległe miejsce przypisania rodzicielstwa przypisało rodzicielstwo, gdy wykluczyło wszystkich oprócz jednego buhaja i jednej matki na podstawie wspólnego allelu od każdego rodzica we wszystkich testowanych loci (B. G. Cassidy, komunikacja osobista). Ta metoda przypisywania rodzicielstwa była również stosowana w poprzednich badaniach przeprowadzonych na jeleniach białoogonowych żyjących w niewoli30,31.
- Podać podskórnie 2 cm3 toksoidu Clostridium perfringens typu C i D oraz antytoksyny Clostridium perfringens typu C i D oraz podać doustnie 0,3 cm3/kg iwermektyny w glikolu propylenowym (Mississippi State University Veterinarian School, Mississippi, USA) doustnie.
- Unieruchomij chemicznie dorosłych samców (≥1,5 roku) w październiku i listopadzie w celu zebrania danych.
- Unieruchomić dorosłe osoby w kojcu przy użyciu tej samej kombinacji chlorowodorku teletaminy i chlorowodorku ksylazyny, które są używane do chwytania dzikich zwierząt (krok 1.4).
- Podczas zdarzeń uspokajających idź z technikiem, który będzie rzucał się do końca kojca, w którym znajdują się podwyższone żaluzje. Miej jednego technika w każdej z dwóch rolet.
- Niech osoba, która odprowadziła technika do osoby niewidomej, wróci na przeciwległy koniec kojca.
UWAGA: Jelenie odsuwają się od tych techników i umieszczają się przed żaluzjami, gdzie technicy są w stanie oddać etyczne strzały każdemu jeleniowi.
- Strzelaj do jeleni, gdy są one w pozycji burtowej i nieruchomej (sekcja 1.4).
- Odczekaj około 15 minut, aż rzucane zwierzęta zostaną całkowicie unieruchomione, zanim się do niego zbliżysz.
- Upewnij się, że osoby są uspokojone, sprawdzając, czy nie ma odruchów ocznych (mruganie). Nałóż maść okulistyczną na oczy i zawiąż oczy jelenia, aby zmniejszyć stres.
- Po tym, jak rzutki pomyślnie uspokoją pojedynczego jelenia, monitoruj wskaźniki życiowe jelenia.
- Użyj termometru doodbytniczego, aby ocenić temperaturę ciała po wyzdrowieniu. Ciepły jeleń z podgrzewanymi kocami, jeśli temperatura zwierzęcia jest niższa niż 37,7 °C. Chłodny jeleń z okładami z lodu, jeśli temperatura zwierzęcia przekracza 40,0 °C.
- Załaduj jelenia na wóz w stylu wojskowym i przetransportuj go pojazdem użytkowym do wcześniej określonego obszaru zbierania danych.
- Po przewiezieniu należy zanotować te same pomiary morfometryczne, które zarejestrowano przy urodzeniu (krok 4.1).
- Zmierz masę ciała (z dokładnością do 0,01 kg) za pomocą cyfrowej wagi wiszącej i zmierz długość tylnej stopy oraz całkowitą długość ciała (najbliższy mm).
UWAGA: Poszczególne jelenie różnie reagują na kombinację leków stosowanych podczas wydarzeń uspokajających, więc należy podać około 0,1-0,3 cm3 mieszaniny HCl teletaminy i HCl ksylazyny (w zależności od masy ciała pojedynczego jelenia), jeśli osobnik wyjdzie z sedacji przed zakończeniem zbierania danych.
- Wszystkim jeleniom należy podać odpowiednie do wielkości ilości antybiotyku, iwermektyny, szczepionki zamykającej i szczepionki przeciwko leptospirozie po ich przetransportowaniu do obszaru gromadzenia danych (patrz punkty 1 i 3).
- Wykonaj trzy pomiary poroża od dorosłych samców za pomocą taśmy mierniczej do pomiaru poroża, podczas gdy zwierzę jest pod wpływem środków uspokajających.
- Zmierz rozpiętość wewnętrzną (najszersza odległość między belkami głównymi), obwód podstawowy (najmniejsza średnica znajdująca się między zadziorem a zębem G1) oraz długość belki głównej (odległość od podstawy poroża do końca belki głównej) poroża przed usunięciem poroża.
- Usuń poroże około 3 cm nad zadziorem za pomocą piły szablastej. Nie usuwaj poroża mniejszego niż 3 cm.

Rysunek 4: Zbieranie danych o dorosłych mężczyznach. Usuwanie poroża za pomocą piły szablastej od dorosłego samca jelenia bielika trzymanego w niewoli. Kliknij tutaj, aby zobaczyć większą wersję tego rysunku.
- Po zebraniu wszystkich danych od osoby poddanej sedacji, umieść jelenia w odpowiednim kojcu i podaj 0,125 mg / kg johimbiny HCl28 lub 4,0 mg / kg tolazoliny HCl32, aby odwrócić działanie ksylazyny HCl. Monitoruj osoby, aby upewnić się, że pozostają w pozycji mostkowej, dopóki nie wyjdą z sedacji i nie będą w pełni czujne.
UWAGA: Jeśli wystąpią komplikacje i zwierzęta muszą zostać poddane eutanazji, wówczas eutanazja poprzez zwichnięcie mózgu za pomocą ogłuszacza śrubowego i przecięcie żyły szyjnej są etycznymi sposobami pozbycia się zwierzęcia.
- Przynieś poroże w wyznaczone miejsce, aby zakończyć mierzenie rozmiaru poroża.
- Zmierz każdy pojedynczy ząb wystający z belki głównej (G1, G2, G3 itd.) oraz dodatkowe nietypowe punkty za pomocą drutu.
UWAGA: Punkty, które nie mają pasującego odpowiednika na przeciwległej belce głównej lub nie są zgodne z definicją typowego zestawu poroża, są definiowane przez Boone and Crockett Club33.
- Owiń drut wokół miejsca, w którym ząb przecina belkę główną i zaznacz ten punkt jako odniesienie.
- Zmierz od tego punktu odniesienia do czubka zęba i powtórz dla każdego zęba.
- Zbierz pozostałe pomiary obwodu, identyfikując najmniejszy punkt między zębami G1 i G2 (obwód H2), zębami G2 i G3 (obwód H3) oraz zębami G3 i G4, jeśli występują (obwód H4).
- Jeśli ząb G4 nie jest obecny, zmierz odległość między punktem środkowym zęba G3 a końcem belki głównej i zmierz obwód H4 w punkcie środkowym.
- Zmierz mniej niż cztery obwody, jeśli poroże zawiera mniej niż trzy zęby.
UWAGA: Na przykład belka główna z dwoma typowymi punktami zawiera tylko trzy pomiary obwodu. Osoby mogą skorzystać z innych wytycznych (Safari Club International) do obliczania rozmiaru poroża; Jednakże w celu prawidłowego porównania dla każdego zwierzęcia należy stosować spójne metody.
- Po wykonaniu wszystkich pomiarów oblicz wynik poroża podobny do brutto nietypowego wyniku Boone'a i Crocketta33.
- Zważyć poroże z dokładnością do 0,1 g za pomocą naukowej wagi cyfrowej i przypisać minimalną krytyczną masę poroża wynoszącą 1 g dla zwierząt pierwszorocznych z porożem krótszym niż 3 cm.
- Unieruchomić chemicznie młode osobniki w kojcu w wieku około 5,5 miesiąca przy użyciu tych samych metod dla dorosłych (sekcja 4.2) i oznaczyć młode osobniki dużym plastikowym kolczykiem w uchu (krok 4.1.1).
- Do unieruchamiania dorosłych osobników żyjących w niewoli należy stosować te same dawki mieszaniny leków, co do unieruchamiania dzikich jeleni (sekcja 1).
- Należy pobrać te same pomiary, które pobrano po urodzeniu (krok 4.1.2) i zastosować te same środki zapobiegawcze, co osoby dorosłe (punkt 4.2).
UWAGA: Po zebraniu wszystkich danych przetransportuj każdego młodego samca do losowo przydzielonego obiektu satelitarnego za pomocą przyczepy.
5. Produkcja potomstwa w pierwszym i drugim pokoleniu
- Klasyfikuj sześciomiesięczne dziko żyjące jelonki i potomstwo urodzone w ośrodku zamkniętym z dzikich matek jako osobniki pierwszego pokolenia.
- W sezonie lęgowym umieść dwa samce po 7-16 samic, aby uzyskać średni stosunek płci hodowlanej jeden samiec do ośmiu samic.
UWAGA: Wybieraj samce hodowlane z obiektów satelitarnych na podstawie wyglądu fizycznego, ponieważ najzdrowsze samce (największe poroże i rozmiar ciała) najprawdopodobniej będą obsługiwać samice przez cały sezon lęgowy bez uszczerbku na obrażeniach spowodowanych agresywną naturą samców w sezonie lęgowym.
- Zezwalaj jeleniom na rozmnażanie się tylko z innymi osobnikami z tego samego regionu źródłowego (np. samce Delta rozmnażają samice Delta, samce Thin Loess rozmnażają samice Thin less, a samce LCP rozmnażają samce LCP).
- Klasyfikuj jelenie poczęte przez rodziców w pierwszym pokoleniu jako potomstwo w drugim pokoleniu. Wychowuj te osobniki w niewoli od urodzenia i karm je taką samą wysokiej jakości dietą, jak ich rodzice.
UWAGA: Samice mogą rodzić potomstwo przez wiele lat, ale zazwyczaj z różnymi reproduktorami każdego roku. Zbierz te same dane o potomstwie w drugim pokoleniu, co o osobnikach w pierwszym pokoleniu i osobnikach schwytanych w środowisku naturalnym.